目的探討β1,2-N-乙酰氨基葡萄糖-氧位-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶1 POMGnT1(Protein O-linked mannose β1,2-N acetylglucosaminyltransferase 1,POMGnT1)基因是否參與了阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的病理生理過程。方法通過 Real-time PCR 和 Western blot 的方法,檢測(cè) POMGnT1 基因在AD模型細(xì)胞系(N2a/APP695swe)和正常對(duì)照細(xì)胞系(N2a/wt)這兩個(gè)細(xì)胞系轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上的差異。利用免疫熒光染色比較POMGnT1在AD模型小鼠(APP/PSEN1)和正常野生型對(duì)照小鼠腦組織中的表達(dá)差異。通過免疫組織化學(xué)的方法,檢測(cè)POMGnT1基因敲除小鼠2月齡和1歲齡腦組織中Aβ沉積。結(jié)果POMGnT1 基因在 N2a/APP695swe 中 mRNA(0.80 士 0.02)和蛋白質(zhì)(0.50士0.019)的含量均顯著低于N2a/wt(mRNA:1;蛋白質(zhì):1.31±0.039;均P0.01)。免疫熒光染色結(jié)果顯示,POMGnT1在APP/PSEN1小鼠中陽性表達(dá)率明顯低于正常野生型對(duì)照小鼠。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,2月齡POMGnT1-/-小鼠(0.358±0.014)和1歲齡POMGnT1-/-小鼠(0.266±0.0041)的腦中Aβ沉積均顯著較同月齡正常野生型小鼠多(2月齡:0.048±0.001,P0.01;1歲齡:0.229±0.0025,P=0.0015)。結(jié)論P(yáng)OMGnT1基因參與了 AD的病理生理過程,并且起到了正向保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R749.16
【部分圖文】：

（9）用 PBS 洗 3 次后，DAB 顯色，置于顯微鏡下觀察；（10）蘇木精復(fù)染 30s，流水沖洗；（11）用中性樹膠封片，北航 CM-2000b 圖像采集分析顯1.2.7 統(tǒng)計(jì)分析所有的實(shí)驗(yàn)至少用三個(gè)獨(dú)立樣本，重復(fù)三次。所有數(shù)據(jù)以（x±s）表示，兩獨(dú)立樣本均數(shù)比較采用 t 檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn) α23.0 軟件分析。利用 Graphpad Prism 7.0 作圖。2 結(jié)果2.1 POMGnT1 基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)差異對(duì) N2a/wt 和 N2a/APP695swe 細(xì)胞系進(jìn)行 Real-time PCR 實(shí)細(xì)胞系均穩(wěn)定表達(dá)這個(gè)基因，但是實(shí)驗(yàn)組 N2a/APP695swe 細(xì)胞量顯著低于對(duì)照組 N2a/wt 細(xì)胞系（0.80 ± 0.02, P<0.01）。

圖 2.2 Western blot 檢測(cè) APP 和 POMGnT1 在 N2a/wt 和 N2a/APP695swe 細(xì)胞系的表達(dá)結(jié)果。A：APP 在兩個(gè)細(xì)胞系的表達(dá)，N2a/APP695swe 明顯高于 N2a/wt（N2a/wt：x=0.13，s=0.0033；N2a/APP695swe：x=0.67，s=0.0167；n=3 ****P<0.01）B：POMGnT1 在兩個(gè)細(xì)胞系的表達(dá)，N2a/AP695swe 明顯低于 N2a/wt（N2a/wt：x=1.31，s=0.039；N2a/APP695swe：x=0.50，s=0.019； n=3.****P<0.01）Fig.2.2 Results of Western blot of APP and POMGnTA: Expressions of APP on two cell lines. N2a/wt, mean=0.13, SEM=0.0033; N2a/APP695swe,mean=0.67, SEM=0.0167; n=3.****p<0.01B: Expressions of POMGnT1 on two cell lines. N2a/wt, mean=1.31, SEM=0.039;N2a/APP695swe, mean=0.50, SEM=0.019; n=3.****p<0.012.3 POMGnT1 基因在動(dòng)物模型中的表達(dá)情況免疫熒光結(jié)果表示，AD 模型小鼠（APP/PSEN1）較正常野生型對(duì)照小鼠，

圖 2.3 免疫熒光檢測(cè) POMGnT1 基因在動(dòng)物模型中的表達(dá)。A 和 B 是 AD 模型小鼠（APP/PSEN1），C 和 D 是與之對(duì)應(yīng)的相同結(jié)構(gòu)的野生型小鼠。核是 DAPI 所染的藍(lán)色，陽性表達(dá)為熒光所染的紅色，位于胞質(zhì)中。實(shí)驗(yàn)組 A 和 B 相較于對(duì)照組 C 和 D，陽性表達(dá)率明顯更低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果由病理老師共同分析所得。Fig.2.3 Results of immunofluorescence in model mice and wild-type mice. A and B are sectionsof AD-like model mice, while C and D are sections wild-type mice. Nuclei stained with DAPIare displayed in blue. POMGnT1 is localized in the cytoplasm, where its immunostaining withred. The differences between two groups is visible significant. Red-stained positive results wereless in the A/B sections than in the C/D sections.2.4 POMGnT1 基因敲除小鼠大腦中更多 Aβ 沉積AD 的兩個(gè)病理特征，其中 NFT 現(xiàn)象已在 POMGnT1 基因缺陷患者腦中得以證實(shí)[3]。為了證明 POMGnT1 基因與 Aβ 沉積的關(guān)系，我們利用免疫組織化學(xué)的方法，分別檢測(cè) 2 月齡和 1 歲齡 POMGnT1 基因敲除小鼠的 Aβ 沉積情況。Aβ 沉

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 薛惠文;;睡眠不足與兩種阿爾茨海默病蛋白質(zhì)的增加密切相關(guān)[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2019年10期

2 劉曉荻;;為什么阿爾茨海默病患者女性多于男性[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2019年10期

3 ;2019中日科學(xué)家防治阿爾茨海默病高層論壇在京召開[J];阿爾茨海默病及相關(guān)病;2019年03期

4 ;《阿爾茨海默病及相關(guān)病》雜志征集廣告啟事[J];阿爾茨海默病及相關(guān)病;2019年03期

5 王宏元;;照顧阿爾茨海默病父親手記[J];敘事醫(yī)學(xué);2019年04期

6 梁寶生;;用健康醫(yī)療大數(shù)據(jù)分析平臺(tái)挑戰(zhàn)阿爾茨海默病[J];科學(xué)中國(guó)人;2019年17期

7 一飛;;盡早預(yù)防早期阿爾茨海默病，減緩“記憶橡皮擦”的清除速度[J];祝您健康;2019年09期

8 袁越;;牙周炎與阿爾茨海默病[J];大眾健康;2019年04期

9 ;新設(shè)備可用于早期診斷阿爾茨海默病[J];祝您健康;2019年04期

10 蔣萍;;阿爾茨海默病患者的家庭護(hù)理 我們應(yīng)當(dāng)做些什么[J];祝您健康;2019年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 于恩彥;;阿爾茨海默病的預(yù)防新理念“早期-全面-系統(tǒng)-長(zhǎng)期”[A];2014浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)精神病學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)、浙江省醫(yī)師協(xié)會(huì)精神科醫(yī)師分會(huì)第七屆年會(huì)論文匯編[C];2014年

2 張琳琳;宋宛珊;王凱;孫偉明;王一夫;;阿爾茨海默病發(fā)病機(jī)制及藥物治療研究進(jìn)展[A];第十一次中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2015年

3 曾凡;謝婉婷;練燕;王延江;;中國(guó)普通群眾對(duì)阿爾茨海默病態(tài)度和觀念的研究[A];中華醫(yī)學(xué)峰會(huì)暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)中青年神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2015年

4 鄒明;葉金敏;何志勇;陳松芳;鄭文興;祝建洪;;硒蛋白H對(duì)阿爾茨海默病的調(diào)控作用及機(jī)制探討[A];2015年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2015年

5 賈建平;;對(duì)阿爾茨海默病研究的思考[A];中華醫(yī)學(xué)峰會(huì)暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)中青年神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2015年

6 王延江;;阿爾茨海默病治療新方法和新策略[A];中華醫(yī)學(xué)峰會(huì)暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)中青年神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2015年

7 卜先樂;向陽;劉雨輝;王延江;;Aβ的天然外周清除能力可抑制阿爾茨海默病相關(guān)病理改變[A];中華醫(yī)學(xué)峰會(huì)暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)中青年神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2015年

8 喬園;王剛;陳生弟;;阿爾茨海默病患者的元音語音特征分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2015年

9 鄒明;葉金敏;何志勇;陳松芳;鄭文興;祝建洪;;硒蛋白H對(duì)阿爾茨海默病的調(diào)控作用及機(jī)制探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2015年

10 卜先樂;向陽;劉雨輝;王延江;;Aβ的天然外周清除能力可抑制阿爾茨海默病相關(guān)病理改變[A];第四屆全國(guó)癡呆與認(rèn)知障礙學(xué)術(shù)研討會(huì)及高級(jí)講授班論文匯編[C];2015年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 崔雪芹;北京大學(xué)第三醫(yī)院 提出誘發(fā)阿爾茨海默病新假說[N];中國(guó)科學(xué)報(bào);2019年

2 本報(bào)記者 高瑜靜;阿爾茨海默病防治之痛[N];中國(guó)經(jīng)營(yíng)報(bào);2019年

3 記者 李治國(guó);我國(guó)原創(chuàng)治療阿爾茨海默病新藥獲準(zhǔn)上市[N];經(jīng)濟(jì)日?qǐng)?bào);2019年

4 本報(bào)記者 崔爽 王春;新藥上市!針對(duì)阿爾茨海默病的“中國(guó)方案”出爐[N];科技日?qǐng)?bào);2019年

5 記者 黃辛 丁佳 廖洋;我國(guó)原創(chuàng)治療阿爾茨海默病新藥有條件獲準(zhǔn)上市[N];中國(guó)科學(xué)報(bào);2019年

6 中國(guó)青年報(bào)·中國(guó)青年網(wǎng)見習(xí)記者 魏其o

本文編號(hào)：2811894