發(fā)布時間：2020-08-23 19:30

【摘要】：目的:恒定電量下,隨著ECS次數(shù)的增加(electroconvulsive shock,ECS)對抗抑郁和學(xué)習(xí)記憶功能受損與大鼠海馬Shaffer側(cè)枝-CA1區(qū)興奮性突觸后場電位(Field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)和長時程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP)的關(guān)系;進(jìn)一步增大電量后,觀察ECS對突觸傳遞效能(α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸受體(α-amino-3-hydroxyl-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor,AMPAR蛋白的表達(dá)及fEPSP斜率),探討突觸再可塑性在抑郁動物ECS電量抵抗效應(yīng)及學(xué)習(xí)記憶功能受損的機(jī)制。方法第一部分選取健康SPF級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,采用孤籠飼養(yǎng)+慢性不可預(yù)見性輕度應(yīng)激(chronic unpredictable mild stresses,CUMS)方法建立抑郁動物模型。模型建立成功后,采用隨機(jī)數(shù)字表的方法選取80只抑郁大鼠分為抑郁組(D組)和抑郁+ECS組(DE組)。其中DE組根據(jù)ECS處理次數(shù)分為單次ECS組(DE1),3次ECS組(DE3),5次ECS組(DE5),7次ECS組(DE7),每組各16只,另配16只同期同等條件喂養(yǎng)的大鼠作為對照組(C組)。D組和DE各組分別給予偽ECS(刺激電極夾于大鼠雙耳,不通電)和ECS處理(120m C)。DE各組大鼠給予不同次數(shù)的ECS,大鼠每天只接受一次ECS處理。采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)(sucrose preference test,SPT)和采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)(morris water maze,MWM)觀察大鼠ECS處理前后的抑郁行為改變及ECS處理后的空間學(xué)習(xí)記憶功能。采用細(xì)胞外記錄各組離體急性海馬腦片Shaffer側(cè)枝到CA1區(qū)(SC-CA1)神經(jīng)通路的fEPSP和高頻刺激誘導(dǎo)長時程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP)的情況。第二部分選取健康SPF級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,采用孤養(yǎng)+CUMS建立抑郁模型。隨機(jī)選取建模成功的大鼠共32只,分為5次ECS組(De5)和7次ECS組(De7)。兩組大鼠前5天接受每天120mC的ECS處理,第6天和第7天De7組接受180mC的ECS處理,而De5組接受偽ESC處理。檢測海馬GluR1的表達(dá),AMPAR介導(dǎo)的fEPSP以及LTP結(jié)果第一部分(1)糖水偏好實(shí)驗(yàn):CUMS建模后,各組間SPP差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=19.33,P0.05)。與C組比較,D組和DE各組(DE1,DE3,DE5,DE7)抑郁模型大鼠糖水偏好百分比均下降(P0.05),而其中D、DE兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);ECS處理后,各組SPP差異有統(tǒng)計學(xué)差異(F=22.52,P0.05)。與D組相比,DE5,DE7組SPP明顯升高(P0.05),但仍低于C組(P0.05);其中DE5組和DE7組組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),D、DE1、DE3組三組間的SPP無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(2)MWM評估學(xué)習(xí)記憶功能:MWM實(shí)驗(yàn)在各組的游泳速度無明顯差異(P0.05);D、DE兩組較C組比較,抑郁模型大鼠逃避潛伏期(escape latency,EL)均延長(P0.05),空間探索時間(space exploration time,SET)均縮短(P0.05);與D組比較,DE5組,DE7組逃避潛伏期(escape latency,EL)均延長(P0.05),空間探索時間(space exploration time,SET)均縮短(P0.05)。(3)Baseline fEPSP slope,各組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=66.127,P0.05)。與D、DE1組比較,DE3、DE5、DE7 baseline fEPSP slope均升高(P0.05);其中D組與DE1組兩組baseline fEPSP slope無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。與DE3組比較,DE5組,DE7組的baseline fEPSP slope明顯升高(P0.05),DE5組,DE7組間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(4)給予(100Hz,200P)誘導(dǎo)LTP,各組LTP差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=43.522,P0.05),與C組比較,D組與DE各組(DE1組,DE3組,DE5組,DE7組)LTP明顯下降(P0.05),其中D組與DE1組兩組LTP無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。與D、DE1組比較,DE3組,DE5組,DE7組三組LTP明顯下降(P0.05);與DE3組比較,DE5組,DE7組LTP進(jìn)一步下降(P0.05),其中DE5組與DE7組兩組LTP無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。第二部分結(jié)果:(1)糖水偏好實(shí)驗(yàn):ECS刺激電量增加至180mc后,De7組較De5組SPP明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);(2)MWM評估學(xué)習(xí)記憶功能:兩組大鼠游泳速度無明顯差異(P0.05);De7組較De5組逃避潛伏期(escape latency,EL)均延長(P0.05),空間探索時間(space exploration time,SET)均縮短(P0.05);(3)電生理實(shí)驗(yàn):De7組較De5組fEPSP slope明顯增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);給予LTP誘導(dǎo)刺激后,De7組較De5組明顯降低(P0.05);(4)Western blot檢測:De7組GluR1的表達(dá)明顯高于De5組(P0.05)。結(jié)論:(1)抑郁大鼠存在電休克電量抵抗和學(xué)習(xí)記憶功能受損的現(xiàn)象。(2)恒定電量下,ECS對大鼠海馬突觸傳遞效能和突觸可塑性的影響存在次數(shù)依賴性,并存在封頂效應(yīng)。(3)突觸再可塑性可能是參與ECS電量抵抗和學(xué)習(xí)記憶受損的內(nèi)在聯(lián)系的機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R749.4
【圖文】：

1各組大鼠ECS處理前（CUMS建模后）和ECS處理后分別的糖水偏好百分比檢測結(jié)果

但 DE5 組與 DE7 組逃避潛伏期無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。見圖2.1.2(B)空間探索時間在第六天進(jìn)行檢測，各組大鼠在原平臺所在象限的游泳時間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F=10.229，P<0.001）。與 C 組比較，D 組和 DE 組（DE1 組，DE3 組，DE5 組，

圖 2.2.1 各組大鼠離體海馬腦片 baseline fEPSP（SC-CA1）。（a）刺激電極與位置的示意圖(圖片引自 Brain Research,2014,1560:10-17)。（b）各組大鼠 ba原始軌跡,紅色區(qū)域代表 EPSP slope 的計算，穩(wěn)定記錄 30min。（c）各組 bas統(tǒng)計結(jié)果； *與 C 組比較，P＜0.05；#與 D 組比較，P＜0.05；%接

本文編號：2801929