發(fā)布時(shí)間：2020-08-23 14:08

【摘要】： 第一部分 阿爾茨海默病(AD)ApoE基因SNP分析 背景和目的：老年性癡呆是21世紀(jì)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域面臨的一大挑戰(zhàn)。在西方國(guó)家，本病已是位于心臟病、腫瘤和中風(fēng)之后導(dǎo)致死亡的第4位疾病。我國(guó)也將對(duì)老年性癡呆的流行病學(xué)調(diào)查，列為國(guó)家“九五”攻關(guān)計(jì)劃。通過北京、上海等39個(gè)地區(qū)4萬多名老人的調(diào)查，顯示55歲以上人群老年性癡呆的患病率接近3％，65歲以上人群患病率超過5％。在60歲以上的老年人群中，平均每增加5歲，老年性癡呆的患病危險(xiǎn)度會(huì)增加1.85倍。目前我國(guó)60歲以上的老人已達(dá)1.2億，其中大約有500萬老年性癡呆患者，約占世界總病例數(shù)的四分之一。估計(jì)到2025年我國(guó)老年人口比例將占全國(guó)人口20％，按照國(guó)內(nèi)外的研究資料每十個(gè)老年人就有一個(gè)出現(xiàn)不同程度的癡呆癥狀，這樣老年性癡呆將成為每一個(gè)中國(guó)家庭必須面對(duì)的問題，老年性癡呆發(fā)病率的不斷增長(zhǎng)，不僅給社會(huì)帶來了巨大的壓力，還造成了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此對(duì)老年性癡呆的研究，已到刻不容緩的地步。 迄今老年性癡呆病因不明，近年國(guó)內(nèi)外大量研究重點(diǎn)集中在：遺傳學(xué)、免疫學(xué)、病毒感染、神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)內(nèi)分泌等方面，結(jié)果顯示許多因素與該病發(fā)病有關(guān)。 環(huán)境因素研究顯示，鋁與細(xì)胞核內(nèi)的染色體結(jié)合可影響到基因的表達(dá)，AD的某些腦區(qū)鋁的濃度可達(dá)正常腦的10-30倍，鋁選擇性地分布于含有神經(jīng)纖維纏結(jié)(NFT)的神經(jīng)之中，老年斑(SP)核心中也有鋁的沉積。 由于某些由病毒引起的慢性神經(jīng)變性疾病(羊癢癥(Scapie).Kwru病Creutzfeldt-Jacob病(C-J病)等的臨床癥狀和病理變化和老年性癡呆有不少相似之處，從而想到老年性癡呆可能與病毒感染有關(guān)，有些實(shí)驗(yàn)結(jié)果也間接地證明了老年性癡呆可能與病毒感染有關(guān)。 遺傳學(xué)研究提示，AD具有家庭聚集性，40％的患者有陽性家族史，呈常染色體顯性遺傳及多基因遺傳。目前認(rèn)為第21號(hào)、9號(hào)、14號(hào)染色體存在基因異常，近幾年又發(fā)現(xiàn)第19號(hào)染色體ApoE基因的異常，可能與老年性癡呆發(fā)病有一定關(guān)系。并認(rèn)為ApoE4等位基因以量相關(guān)的形式增加阿爾茨海默病(AD)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。 浙江大學(xué)博士論文 摘要 尸檢發(fā)現(xiàn)，在AD患者老年斑和神經(jīng)纖維纏結(jié)結(jié)構(gòu)中有大量活性載脂蛋白E(ApoE) 沉積，而腦脊液中Ap0E水平則低于正常對(duì)照組，提示ApoE異常沉積可能參與了 AD的發(fā)病過程。APoE作為AD易感基因之一，與家族性及散發(fā)性AD均密切相 關(guān)。Ap0E基因多態(tài)性在不同的種族人群表現(xiàn)不同，其對(duì)AD發(fā)病的危險(xiǎn)性也有 所差異。目前有關(guān)ApoE與AD關(guān)系的研究大多源自西方人群，而中國(guó)對(duì)AD患者 ApoE基因多態(tài)性分析主要是以限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析技術(shù)(restriction 斤agment length polymorphism，RFLp)為基礎(chǔ)，研究結(jié)果顯示，AD患者ApoE4 基因頻率較非AD患者明顯增高，達(dá)36.4%，支持Ap0E4基因是AD發(fā)病危險(xiǎn)因子 之一的觀點(diǎn)。ApoEZ基因在sAD中明顯減少，并提示ApoEZ基因可能具有預(yù)防 sAD發(fā)病的作用，也有學(xué)者認(rèn)為ApoEZ基因是人類的長(zhǎng)壽基因。ApoE3基因 頻率在AD患者中明顯下降，ApoE3具有減少B淀粉樣蛋白積聚和保護(hù)tau蛋白 磷酸化，減少神經(jīng)纖維纏結(jié)的形成作用，提示ApoE3基因可能具有減低AD發(fā)病 的危險(xiǎn)性。 單核營(yíng)酸多態(tài)性(single nuelootsde polynlorphism，SNp)作為一種遺傳性 多態(tài)，具有分布廣、數(shù)量多、易于批量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，以SNP為華礎(chǔ)的關(guān)聯(lián)分析及 連鎖不平衡分析，己)’泛應(yīng)用J‘神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域中。本研究在國(guó)內(nèi)外研究的簽礎(chǔ)l_， 采用PCR、基因測(cè)序等技術(shù)，對(duì)杭州地區(qū)老年人群中AD患者及浙北地區(qū)人群的 ApoE基因序列進(jìn)行檢測(cè)，分析其突變位點(diǎn)，以探討Ap0E基因多態(tài)性在散發(fā)性AD 發(fā)病機(jī)制中的作用及研究ApoE基因多態(tài)性在浙北地區(qū)人群中的分布頻率。 方法:選擇1999年5月一2001年12月于我院就診的AD患者30例，男10例， 女22例，平均年齡(70.31士9.74)歲。所有檢查者均進(jìn)行神經(jīng)精神檢查、神經(jīng)系 統(tǒng)檢查、神經(jīng)放射檢查，并根據(jù)美國(guó)精神障礙診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(cè)第四版(DSM一W) 的癡呆診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行初篩，再根據(jù)NENCDS一ADRDA做出AD診斷。癡呆患者 MMSE得分在8一12分;日常生活雖表得分在38~46;受檢者為中至重度AD患 者。對(duì)照組選擇同期進(jìn)行健康體檢者26例，男11例，女15例，平均年齡 (64，78到0.37)歲。病例組及對(duì)照組的年齡性別具有可比性。應(yīng)用自動(dòng)化測(cè)序儀 對(duì)ApoE基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，分析其基因單核普酸多態(tài)性，進(jìn)行關(guān)聯(lián)分 析。 同時(shí)我們?nèi)≌惚钡貐^(qū)94例健康體檢者為研究對(duì)象，按年齡高低分為A、B、C 三組，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增ApoE墓因第四外顯子長(zhǎng)為244bp的片段，擴(kuò)增產(chǎn)物 經(jīng)自動(dòng)化測(cè)序儀進(jìn)行測(cè)序，分析三組間基因單核昔酸多態(tài)性(SNP)，進(jìn)行關(guān)聯(lián)分 浙江大學(xué)博士論文 摘要 析。 結(jié)果:1、20.0。%的AD患者ApoE基因第462位單核營(yíng)酸發(fā)生了C?G單堿基突 變，462c/G多態(tài)性與AD發(fā)病有明顯關(guān)聯(lián)(p0.05)。2、隨著年齡的增長(zhǎng)，ApoE 基因第526位點(diǎn)易發(fā)生C?T突變，第451單核營(yíng)酸位點(diǎn)易出現(xiàn)C缺失突變 (P0.05)，A、B、C三組526C/T、45 IC/O的突變率分別為3.45%、14.81%、29.63% 及3，22%、9.68%、31.25%;年齡與526C/T、451C/0點(diǎn)突變的發(fā)生呈正相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R749.16
【圖文】：

圖2AD患者的ApoE基因測(cè)序結(jié)果人群組的ApoE基因SNP位點(diǎn)分析ApoE基因測(cè)序結(jié)果分析，第526位C/T突變、第470歲以上人群中多見，尸(0.05。見表2。n/

本文編號(hào)：2801615