【摘要】：阿爾茨海默氏病(Alzheimer's disease,AD)是一種以認(rèn)知障礙和記憶力損害為特征的中樞神經(jīng)進(jìn)行性退行性疾病。中樞膽堿能系統(tǒng)與學(xué)習(xí)記憶等密切相關(guān)。AD患者膽堿能神經(jīng)細(xì)胞明顯丟失,膽堿能神經(jīng)纖維發(fā)生退變,導(dǎo)致中樞膽堿能系統(tǒng)功能紊亂,皮層、基底前腦的膽堿乙�；D(zhuǎn)移酶(acetylCoA:choline-O-acetyltransferase,EC2.3.1.6;ChAT)表達(dá)減少,并以海馬最為明顯,乙酰膽堿(acetylcholine,ACh)的生成和釋放量降低。ACh是腦中與學(xué)習(xí)記憶等智能狀態(tài)相關(guān)的重要分子,由ChAT合成,膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)水解,通過ACh受體發(fā)揮生物學(xué)作用。ACh水平降低是引起AD患者學(xué)習(xí)記憶等認(rèn)知功能障礙的直接原因。從源頭上補(bǔ)充膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)ACh的合成酶ChAT,應(yīng)能增強(qiáng)膽堿能神經(jīng)功能,提高學(xué)習(xí)記憶能力。本研究獨(dú)具創(chuàng)意,為國(guó)內(nèi)外首次提出。 然而,ChAT是一分子量69 kDa的蛋白質(zhì),難以通過血腦屏障和細(xì)胞膜。我們采用新近發(fā)展起來的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù),將HIV-1反式激活蛋白(trans-activator transcription,TAT)中的蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)(protein transduction domain,PTD)與ChAT經(jīng)基因重組進(jìn)行連接,通過基因工程技術(shù)得到PTD-ChAT融合蛋白。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明重組的PTD-ChAT靜脈注射給小鼠后能穿越血腦屏障,在中樞提高大腦皮層中ChAT的活性,催化ACh的生成。采用聚集態(tài)β-淀粉樣肽(β-amyloid peptide,Aβ)所致AD動(dòng)物模型和自然衰老認(rèn)知障礙小鼠模型,觀察PTD-ChAT靜脈注射后是否能夠提高學(xué)習(xí)記憶能力,改善癡呆癥狀。結(jié)果顯示在主動(dòng)逃避實(shí)驗(yàn)中,治療小鼠犯錯(cuò)誤的次數(shù)明顯減少,記憶時(shí)間明顯延長(zhǎng)。水迷宮實(shí)驗(yàn)中,治療小鼠游泳時(shí)間明顯縮短,空間辨別能力明顯提高。 將PTD與異源蛋白質(zhì)血藍(lán)蛋白(Tachypleus Tridentatus Hemocyanin,TTH)或同源蛋白質(zhì)小鼠大腦蛋白粗提物(mouse brain extract,MBE)分別通過碳二亞胺偶連,腹腔和皮下注射免疫小鼠。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PTD-MBE注射組小鼠血中無明顯特異性抗體出現(xiàn)(P/N值小于2),而PTD-TTH雖可引發(fā)抗體產(chǎn)生,但免疫原性很低,抗體滴度僅為250。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

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1 付愛玲,李前;蛋白質(zhì)藥物的入腦轉(zhuǎn)運(yùn)[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2003年06期

2 楊會(huì)宣，王文學(xué)，柯金水，梁欣，董瑩，周四元;堿性羥胺比色法測(cè)定全血乙酰膽堿[J];臨床檢驗(yàn)雜志;1995年03期

3 劉燕強(qiáng),顧景范,張鳳川;缺鋅對(duì)生長(zhǎng)大鼠記憶的影響及有關(guān)機(jī)制的研究[J];南開大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2001年02期

4 馮小黎;重組包涵體蛋白質(zhì)的折疊復(fù)性[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2001年04期

5 楊曉儀,林鍵,吳文言;重組蛋白包涵體的復(fù)性研究[J];生命科學(xué)研究;2004年02期

6 中國(guó)生物物理代表團(tuán);從第十三屆國(guó)際生物物理大會(huì)看生物物理學(xué)研究的現(xiàn)狀和趨勢(shì)[J];生物物理學(xué)報(bào);1999年04期

7 王志珍;蛋白質(zhì)折疊和分子伴侶[J];生物學(xué)通報(bào);2004年05期

8 王穎彥;老年性癡呆動(dòng)物模型及其評(píng)價(jià)[J];中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2004年03期

9 劉暢,王哲;阿爾茨海默病的膽堿能損害機(jī)制[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2003年01期

10 陳霽,貢岳松,張均田;17-β-雌二醇和人參總皂苷對(duì)去卵巢大鼠記憶障礙的改善作用[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2001年08期

本文編號(hào)：2791472