發(fā)布時間：2020-07-29 09:58

【摘要】：背景及目的： 全世界每年約有一百萬自殺和上千萬自殺未遂事件發(fā)生。事實(shí)上，自殺不僅僅是一種應(yīng)激反應(yīng)，廣義上是指一種精神障礙綜合癥。盡管自殺是重型抑郁最嚴(yán)重的后果，但絕大多數(shù)的抑郁癥患者從未嘗試或自殺。這也就意味著自殺行為可能是一種區(qū)別于重型抑郁而獨(dú)立存在的疾病。然而，由于這種區(qū)別于重型抑郁的發(fā)病機(jī)制至今仍未完全闡明，導(dǎo)致目前關(guān)于伴自殺的重型抑郁靶向治療的研究停滯不前。 本研究采用基于1H-NMR的代謝組學(xué)方法，應(yīng)用核磁共振氫譜儀檢測正常對照組、抑郁不伴有自殺意圖組和出現(xiàn)過自殺意圖的抑郁患者血漿標(biāo)本，得到代謝指紋圖譜，采用正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)進(jìn)行模式識別，結(jié)合多種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，并通過模型分析和非參數(shù)檢驗(yàn)鑒別鑒定出區(qū)別于抑郁不伴自殺企圖及健康對照組，屬于伴有自殺傾向的抑郁癥的血漿代謝產(chǎn)物的變化及標(biāo)志性的代謝產(chǎn)物。 方法： 1.研究對象的納入：選取35例健康人作為正常對照組；選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的56例抑郁癥患者作為疾病組：其中35例從未出現(xiàn)自殺企圖，21例發(fā)病期間出現(xiàn)過自殺企圖。 2.標(biāo)本采集：用EDTA真空抗凝采血管采集35例健康人及56例患者靜脈血，分離并收集血漿。將血漿分裝并保存在-80℃冰箱中，避免反復(fù)凍融。 3.建立基于H1-NMR技術(shù)的血漿代謝組學(xué)分析方法，包括實(shí)驗(yàn)方法和模式識別方法的選擇。采用建立的方法對正常對照組和實(shí)驗(yàn)組血漿進(jìn)行代謝組學(xué)分析，找出并鑒定三組血漿中差異表達(dá)的代謝產(chǎn)物。 4.數(shù)據(jù)分析：通過多變量統(tǒng)計(jì)分析方法對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，經(jīng)過積分?jǐn)?shù)據(jù)歸一化后，利用正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)過濾掉與反應(yīng)沒有直接關(guān)系的變化并進(jìn)行模式識別。并將三組樣本血漿中的主要代謝產(chǎn)物的積分值通過非參數(shù)檢驗(yàn)方法分析，p0.05視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1.與正常對照組和抑郁不伴有自殺企圖組相比，抑郁伴有自殺企圖患者血漿的H1-NMR代謝指紋譜圖波峰水平有明顯差異，提示其代謝產(chǎn)物成分有明顯差異。 2.與正常對照組血漿代謝產(chǎn)物相比，在抑郁伴有自殺組的血漿中，鑒定出14個差異表達(dá)的代謝產(chǎn)物：高密度脂蛋白(HDL)，極低密度脂蛋白(VLDL)，葡萄糖，丙酮，�；撬幔懝檀�，不飽和脂類，丙酮酸鹽，醋酸，乳酸，丙氨酸，纈氨酸，甘氨酸，谷氨酰胺等波峰有增高或降低等表現(xiàn)。 3.與抑郁不伴有自殺企圖組代謝產(chǎn)物相比，在抑郁伴有自殺組的血漿中，鑒定出11個差異表達(dá)的代謝產(chǎn)物：肌醇，葡萄糖，丙酮酸，丙氨酸，甘氨酸，牛磺酸，膽固醇，低密度脂蛋白(LDL)，極低密度脂蛋白(VLDL)不飽和脂類和乳酸等波峰有增高或降低等表現(xiàn) 4.采用多種統(tǒng)計(jì)學(xué)比較分析，鑒定出抑郁伴有自殺企圖血漿中特異表達(dá)的代謝產(chǎn)物，可歸結(jié)為三類：脂質(zhì)代謝紊亂類(LDL，VLDL，不飽和脂類，膽固醇)，脂質(zhì)代謝相關(guān)物質(zhì)(葡萄糖，丙酮酸鹽，乳酸)，氨基酸類(丙氨酸，甘氨酸和�；撬�)。 結(jié)論： 通過基于NMR技術(shù)的血漿代謝組學(xué)研究，提示外周脂質(zhì)和氨基酸代謝紊亂增加了抑郁癥患者的自殺風(fēng)險(xiǎn)。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R749.4
【圖文】：

15圖 1. 采用 NMR 的代謝組學(xué)方法，篩選抑郁伴自殺意圖相關(guān)血漿標(biāo)志物流程。Figure 1. An overview of NMR-based metabonomic workflow identifying plasmmetabolite biomarkers for MDD with suicide attempts.1.2.3 樣品制備在測試前，將血漿樣品取出并在室溫條件下解凍。每 200ul 血漿樣品與 40的磷酸鹽溶液(0.2M Na2HPO4/0.2 M NaH2PO4, pH 7.4)充分振蕩混勻后 4℃離12000g/min，離心 10 分鐘，取 500ul 上清加入 5mm 核磁共振專用測試管中，加

圖 2 伴自殺意圖抑郁癥，不伴自殺意圖的抑郁癥以及健康對照血漿磁共振波譜。（A-B-C）代表性的伴自殺意圖的抑郁癥患者，不伴自殺意圖的抑郁癥與正常對照的 600 MHz 1D-CPMG波譜圖。Fig2 NMR spectra of depressed patients with suicide attempts, depressed patients(non-suicideattempts) and healthy controls. (A-B-C) Representative 600 MHz one-dimensionalCarr Purcell Meiboom Gill (1D-CPMG)1H NMR spectra of blood plasma samples fromdepressed patients with suicide attempts, depressed patients(non-suicide attempts) and healthycontrols.2.3 多變量統(tǒng)計(jì)分析抑郁癥與正常對照的樣本

圖 3 3a.OPLS-DA 得分圖顯示抑郁伴自殺意圖組( )能夠與不伴自殺意圖抑郁組( )明顯區(qū)分開; 3b.OPLS-DA 得分圖顯示抑郁伴自殺意圖組( )能夠與正常組( )明顯區(qū)分開。Figure 3 3a.OPLS-DA score plots displaying discrimination between depressed patients withsuicide attempts ( ) and depressed patients (non-suicide attempts) ( ); 3b.OPLS-DA scoreplots displaying discrimination between depressed patients with suicide attempts ( ) andhealthy controls ( ).因 OPLS-DA 是一種監(jiān)督的多變量統(tǒng)計(jì)分析方法，存在過度擬合的可能。因此，本研究采用排列驗(yàn)證（permutation test）去驗(yàn)證該 OPLS-DA 模型是否可靠。分析發(fā)現(xiàn)，該 OPLS-DA 模型的 R2 與 Q2 值明顯大于其它置換的 R2 與 Q2。這說明該OPLS-DA 模型是可靠的，不存在過度擬合。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 喻東山,楊桂梅,張心保,侯鋼,耿直,徐捷;抑郁癥患者睡眠腦電圖與自殺行為的關(guān)系[J];中國臨床康復(fù);2004年09期

本文編號：2773804