【摘要】： 前言 抑郁癥是精神科常見疾病之一,具有明顯的復發(fā)傾向或趨于慢性化。應激性生活事件尤其是慢性應激是抑郁癥的主要促發(fā)因素。慢性應激可引起大腦器質性損害,尤其是海馬結構和功能的損害,但其病理生理機制迄今不明。目前有證據(jù)表明重性抑郁及雙相障礙與精神分裂癥享有一些共同的易感基因,包括DISC1。DISC1是一個多功能的蛋白質,越來越多的證據(jù)表明DISC1在維持大腦皮層灰質及海馬體積和功能功能方面發(fā)揮著重要作用。通過與多種蛋白相互作用,其在神經(jīng)遷移、軸突生長、神經(jīng)元成熟中起關鍵作用。本研究通過觀察慢性應激抑郁模型小鼠海馬Disc1的表達,探討慢性應激所致抑郁癥的發(fā)病機制。 材料與方法 1、實驗材料 (1)實驗動物采用雄性ICR小鼠14只,體重22-25g,由中國醫(yī)科大學實驗動物中心提供。 (2)主要試劑兔抗鼠Disc1抗體(abcam,ab82041)；生物素標記的羊抗兔IgG；SABC免疫試劑盒；DAB顯色劑(以上購自武漢博士德公司)；HRP-標記二抗。 (3)實驗儀器光學顯微鏡(OLYMPUS,Japan)；高速冰凍離心機(HITACHI, Japan)；紫外可見分光光度計(HITACHI,Japan)；凝膠成像系統(tǒng)(UVP,U.S.A)；Meta Moph/Cool SnpPfx/Ax70計算機圖像分析系統(tǒng)。 2、實驗方法 (1)動物分組及模型制作選擇蔗糖攝取基線值相近的小鼠,隨機分為對照組和實驗組,組間無明顯統(tǒng)計學差異,各組單籠飼養(yǎng)。 慢性溫和性應激共實施5周,每周給予多種不可預測性(偽隨機序列)應激,應激源包括：禁食、禁水、空瓶子(2小時)、限制進食(1小時)、頻閃(120次/分)、濕籠(墊料中傾倒150ml水)、群養(yǎng)、傾斜45°,每種應激源持續(xù)14-16小時。對照組不予任何刺激。應激期間每周一上午測量實驗組及對照組小鼠體重。 (2) Disc1的檢測實驗組1和對照組1的小鼠經(jīng)多聚甲醛灌流固定后剝離腦制作含海馬的石蠟切片。采用特異性抗體的免疫組織化學方法檢測海馬CA1CA3及齒狀回中的Disc1蛋白含量。實驗組2和對照組2的小鼠斷頭處死后剝離海馬,采用Western Blotting法測定海馬Disc1蛋白的含量。 實驗結果 1、糖水消耗實驗：實驗組糖水消耗量及蔗糖偏愛值較對照組明顯減少(P0.01),糖水攝入相對值明顯低于對照組(P0.05)。 2、抑郁模型組的小鼠體重顯著低于對照組(P0.01)。水平穿越格子數(shù)與直立次數(shù)實驗組小鼠與對照組相比無顯著性差異(P0.05)。 3、Disc1的表達：免疫組織化學染色中模型組小鼠海馬CA1、CA3和DG區(qū)Disc1表達明顯低于對照組(P0.05)。Western Blotting實驗中模型組小鼠Disc1蛋白含量明顯低于對照組(P0.05)。 結論 1、慢性溫和性應激抑郁模型實驗組小鼠海馬Disc1表達水平較對照組增高。 2、Disc1可能參與了慢性應激抑郁小鼠海馬神經(jīng)元可塑性改變的病理生理過程。
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R749.4
【圖文】：

對照組與實驗組糖水偏愛值的比較(至士:)

應激3周后，實驗組小鼠糖水偏愛值明顯低于對照組(尸<0.05);應激5周后，實驗組糖水消耗量、糖水消耗相對值均明顯低于對照組(尸<0.05)，上述變化在后續(xù)造模過程中保持恒定。(參見圖1一圖3)二、體重和曠場行為指標比較慢性應激4周后，實驗組小鼠體重比對照組明顯下降(尸<0.01);水平穿越格子數(shù)與直立次數(shù)實驗組小鼠與對照組相比無明顯差異。(參見圖4，表2)三、 westemBlotting法測定小鼠海馬組織Discl蛋白表達水平對每個樣品的Discl蛋白帶進行了IDV值的測定。實驗組與對照組比較，實驗組DIV值高于對照組，組間差別有統(tǒng)計學意義(尸<0.05)。(見表3，圖5，6)四、免疫組化法測定小鼠海馬組織Discl蛋白表達水平4實驗組和對照組海馬各區(qū)細胞均有免疫組化反應陽性顆粒分布，陽性表達呈黃棕色。著色部位集中在細胞核

二、體重和曠場行為指標比較慢性應激4周后，實驗組小鼠體重比對照組明顯下降(尸<0.01);水平穿越格子數(shù)與直立次數(shù)實驗組小鼠與對照組相比無明顯差異。(參見圖4，表2)三、 westemBlotting法測定小鼠海馬組織Discl蛋白表達水平對每個樣品的Discl蛋白帶進行了IDV值的測定。實驗組與對照組比較，實驗組DIV值高于對照組，組間差別有統(tǒng)計學意義(尸<0.05)。(見表3，圖5，6)四、免疫組化法測定小鼠海馬組織Discl蛋白表達水平4實驗組和對照組海馬各區(qū)細胞均有免疫組化反應陽性顆粒分布，陽性表達呈黃棕色。著色部位集中在細胞核，胞漿無著色。實驗組小鼠與對照組相比，海馬CAI

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 方向;紀家武;陳元生;陳旭先;;福建省重性抑郁障礙流行病學調(diào)查[J];臨床精神醫(yī)學雜志;2011年03期

2 羅新堅;葉敏捷;姜德國;;重性抑郁障礙兒童少年的父母養(yǎng)育方式探討[J];醫(yī)學與社會;2011年07期

3 曾春蘭;鐘正賢;盧文杰;王娟;李善斌;李祥江;;大葉千斤拔的藥理作用研究[J];中醫(yī)藥導報;2011年07期

4 連雪科;肖百全;黃遠鏗;歐慧瑜;梁惠嬋;楊威;;電刺激鼠尾實驗條件的探討[J];中國醫(yī)藥指南;2011年20期

5 李美玲;劉鳳姣;劉玲;;小鼠骨髓源性內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];中國動脈硬化雜志;2011年06期

6 蔡琳;劉瑩;叢峰;王秋雨;;膳食纖維復合沖劑及其輔劑的降血糖作用研究[J];食品與藥品;2011年05期

7 王冬梅;陳偉;;銀杏葉提取物對小鼠耐缺氧作用的影響[J];社區(qū)醫(yī)學雜志;2011年12期

8 蘇健裕;沈會平;石磊;劉國琴;唐昭;溫葉明;;吐瀉肚痛膠囊急性毒性的研究[J];時珍國醫(yī)國藥;2011年06期

9 李潤峰;何蓉蓉;栗原博;陳建新;;蘋果多酚體內(nèi)外抗甲型流感病毒作用[J];廣東農(nóng)業(yè)科學;2011年14期

10 向志光;林樹柱;董娜;袁偉;徐艷峰;秦川;;結核分枝桿菌感染小鼠的脾臟和肺臟組織荷菌量與病理變化[J];中國比較醫(yī)學雜志;2011年08期

相關會議論文 前10條

1 賈丹兵;李乃民;劉珊;李春杰;張永豐;;參姜鎖陽益氣片的急性毒性實驗研究[A];中國中西醫(yī)結合學會診斷專業(yè)委員會2009’年會論文集[C];2009年

2 張偉;馮娟;陳煒;張小娟;袁樹民;廉虹;張連峰;;系統(tǒng)表達HB-EGF轉基因小鼠的建立[A];實驗動物與藥理學、毒理學研究學術交流會論文匯編[C];2009年

3 宋根娣;柴保國;趙衛(wèi)東;李春麗;鄭振宇;;卵子突變基因在小鼠早期胚胎發(fā)育過程中作用機理研究[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學術討論會論文集[C];2009年

4 閔靜;;竹節(jié)參皂苷抗炎作用的實驗性研究[A];2009年中國藥學大會暨第九屆中國藥師周論文集[C];2009年

5 陳福偉;楊國宇;李宏基;郭豫杰;魯維飛;;小鼠脂肪組織中孤啡肽及其受體基因表達的研究[A];全國動物生理生化第十一次學術交流會論文摘要匯編[C];2010年

6 劉向前;吳少庭;秦莉;袁仕善;黃達娜;雷明軍;潘暉榕;林綺萍;張仁利;高世同;劉能保;;幾種SARS DNA疫苗對Balb/c小鼠重要器官影響的組織病理學研究[A];全國寄生蟲學與熱帶醫(yī)學學術研討會論文集[C];2006年

7 李文麗;梁欣;海春旭;;光氣誘導小鼠肺水腫的凋亡相關基因表達[A];2008陜西省環(huán)境與健康論壇論文集[C];2008年

8 張玉仙;王文利;陳耀星;王子旭;李然;張凡健;;不同濃度大蒜溶液對小鼠小腸黏膜免疫相關細胞數(shù)量變化影響的研究[A];新型疫苗研發(fā)及基因工程疫苗應用研討會論文集[C];2010年

9 趙剛;倪婭;徐云丹;;一種基于實驗新理念的小鼠微核實驗方法[A];基因開啟未來：新時代的遺傳學與科技進步——湖北省遺傳學會第八次代表大會暨學術討論會論文摘要匯編[C];2009年

10 劉玉龍;周劍影;王國權;戴宏;段瑩瑩;郭曉葵;李元;;人重組白細胞介素-8(rhIL-8)對受照小鼠抗放作用的實驗研究[A];中華醫(yī)學會放射醫(yī)學與防護學分會第三次全中國青年學術交流會論文摘要匯編[C];2001年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 王雪飛;日本：用冷凍小鼠克隆健康小鼠[N];健康報;2008年

2 記者 杜華斌　張巍巍;科學家成功創(chuàng)建小鼠痛苦表情指數(shù)[N];科技日報;2010年

3 阿倫;小鼠標也人性化[N];中國信息報;2003年

4 張筠;南京專家建立可調(diào)控小鼠生物鐘模型[N];江蘇科技報;2010年

5 王鳳梅;上�；蛐∈笊硎捞矫豙N];遼寧日報;2003年

6 編譯 傳說;科學家鑒定可能會脫發(fā)的基因[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2009年

7 常麗君;哈佛育出能“聞”出光線的小鼠[N];科技日報;2010年

8 鄒德慶 記者 馬云霄;克隆的小鼠名叫“哈爾濱”[N];黑龍江日報;2005年

9 辛華;小鼠神經(jīng)元讓機器人“聽話”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

10 黃敏;吃鹽也上癮[N];新華每日電訊;2011年

相關博士學位論文 前10條

1 丁軍;首發(fā)未藥物治療青少年重性抑郁障礙的腦磁共振影像結構與功能病例對照研究[D];中南大學;2010年

2 吳楓;首發(fā)、未用藥重性抑郁障礙患者腦磁共振研究[D];中國醫(yī)科大學;2010年

3 劉琰;五羥色胺對小鼠社會行為的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2008年

4 馬寧;小鼠神經(jīng)行為測試組合建立及鄰苯二甲酸二異丁酯對小鼠學習記憶影響的研究[D];中國疾病預防控制中心;2011年

5 王芳;應激和豐富環(huán)境及1-脫氧野尻霉素對小鼠衰老相關行為改變的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2012年

6 馬靜;長沙市中學生抑郁伴/不伴焦慮的調(diào)查及青少年重性抑郁障礙特定基因—基因、基因—環(huán)境交互作用研究[D];中南大學;2010年

7 張斌;適于微米切片的小鼠全腦標本制備方法研究[D];華中科技大學;2011年

8 許袖;谷胱甘肽過氧化物酶3在小鼠圍著床期子宮中的表達、調(diào)節(jié)與功能[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2011年

9 馮秋婷;PDK1在小鼠心血管發(fā)育過程中的作用和機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2011年

10 張松林;誘導受體產(chǎn)生一氧化碳減輕小鼠移植心缺血再灌注損傷和排斥反應的機制研究[D];華中科技大學;2010年

相關碩士學位論文 前10條

1 安燕;慢性溫和性應激對小鼠海馬區(qū)Disc1表達的影響[D];中國醫(yī)科大學;2010年

2 熊會海;針灸中藥對腫瘤模型小鼠細胞免疫功能影響的實驗研究[D];天津中醫(yī)學院;2003年

3 楊煒曦;新肌纖生成調(diào)節(jié)因子MR-1基因功能的初步探討[D];吉林大學;2004年

4 趙學明;雙重套式PCR對小鼠桑椹胚OPS法冷凍后性別鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

5 代小華;醋酸棉酚對小鼠精母細胞中染色體配對行為的影響[D];河南大學;2005年

6 井小會;人參皂甙Rg3治療小鼠惡性腹腔積液的實驗研究[D];昆明醫(yī)學院;2007年

7 廖海艷;一氧化氮對小鼠胚胎植入的影響[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2008年

8 曲玉秀;兩種遺傳工程小鼠的檢測、鑒定與種質保存方法的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2003年

9 顧克菊;免疫抑制宿主Toll樣受體表達及對煙曲霉菌感染免疫應答[D];第四軍醫(yī)大學;2005年

10 陳永衛(wèi);肝癌微波治療后殘留腫瘤生物學特性的變化及對機體的影響[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2005年

本文編號：2763507