【摘要】：目的:阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一種進(jìn)行性神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,臨床主要表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶減退和認(rèn)知障礙。AD的病理表現(xiàn)主要是細(xì)胞外淀粉樣蛋白沉積(amyloidβ,Aβ)、神經(jīng)纖維纏結(jié)和神經(jīng)元丟失。目前大量流行病學(xué)資料顯示高脂血癥可能與AD的發(fā)病相關(guān),高脂高膽固醇血癥已成為一個(gè)公認(rèn)的AD危險(xiǎn)因子,在最新的體外實(shí)驗(yàn)中,激活核受體PPARγ能下降細(xì)胞內(nèi)膽固醇水平,并因此抑制β,γ分泌酶的活性。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谟懻撛诎楦咧Y的阿爾茨海默病雙轉(zhuǎn)基因小鼠動(dòng)物模型中辛伐他汀是否發(fā)揮保護(hù)作用以及辛伐他汀是否通過改變核受體的表達(dá)調(diào)節(jié)膽固醇,進(jìn)而影響Aβ的產(chǎn)生,并為臨床應(yīng)用他汀類藥物治療AD提供理論依據(jù)。 方法:本實(shí)驗(yàn)建立了不同血膽固醇濃度梯度的APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠模型:陰性對(duì)照組、高脂陰性組、陽性組、陽性辛伐他汀組、高脂陽性組、高脂陽性辛伐他汀組。分別給予高脂高膽固醇飼料或正常飼料喂養(yǎng)6個(gè)月后給予辛伐他汀(50mg/Kg·天)或安慰劑灌胃3個(gè)月,使各組動(dòng)物出現(xiàn)不同血膽固醇濃度梯度。通過免疫組織化學(xué)染色,Thioflavin S染色觀察Aβ沉積的變化情況,Morris水迷宮檢測(cè)小鼠學(xué)習(xí)、記憶能力,RT-PCR、Western blot方法分別檢測(cè)PPARγ在mRNA和蛋白水平的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1、本實(shí)驗(yàn)初步建立了不同血膽固醇濃度梯度的APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠模型。 2、免疫組織化學(xué)染色和ThioflavinS染色顯示高脂飼料組較正常飼料組Aβ沉積增多,辛伐他汀處理組較安慰劑對(duì)照組Aβ沉積減少,均有顯著性差異。辛伐他汀組與對(duì)照組小鼠學(xué)習(xí)、記憶能力未檢測(cè)出明顯差異。 3、RT-PCR結(jié)果顯示PPARγmRNA表達(dá)沒有改變,Western blot結(jié)果顯示辛伐他汀處理組PPARγ蛋白表達(dá)增高。 結(jié)論: 1、通過對(duì)不同血膽固醇梯度的轉(zhuǎn)基因小鼠研究,發(fā)現(xiàn)膽固醇水平可以影響Aβ的生成,高脂血癥可能是AD的危險(xiǎn)因素,辛伐他汀可以有效地降低其膽固醇水平,發(fā)揮保護(hù)作用。 2、辛伐他汀處理后PPARγ表達(dá)增高,推測(cè)辛伐他汀可能與激動(dòng)PPARγ有關(guān)。 3、辛伐他汀可能通過調(diào)節(jié)PPARγ的表達(dá)改變膽固醇濃度,從而影響Aβ的生成。
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R589.2;R749.16
【圖文】：

圖 1 PS DNA 片段 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的鑒定結(jié)果，陽性產(chǎn)物為 3,4,8,9,10，12；陰1,2,5,6,7,11,13,14；marker：DNA Marker DL2,000，PCR 產(chǎn)物片段為 608bp。2、采用 PCR 法擴(kuò)增技術(shù)，以鼠尾 DNA 為模板，擴(kuò)增 APP 基因片段1%瓊脂糖凝膠電泳分離。結(jié)果如圖所示，在 377bp 附近有一條明亮的帶的基因 APP DNA 片段的預(yù)期位置相符。1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 marker1007550

三、轉(zhuǎn)基因鼠的 Aβ的表達(dá)1、免疫組織化學(xué)染色檢測(cè) A β 沉積用小鼠抗人 A β(WO-2)單抗對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠腦片進(jìn)行免疫組化染色后，對(duì)各鼠 A β 沉積情況進(jìn)行觀察。陰性對(duì)照組基本不出現(xiàn) Aβ 沉積，高脂陰性組與組相比，Aβ 沉積的數(shù)量增多，陽性組可見大量 Aβ 沉積沉積，說明轉(zhuǎn)基因鼠較正常同窩陰性對(duì)照鼠神經(jīng)元內(nèi) Aβ 沉積增高明顯。說明轉(zhuǎn)基因陽性鼠 A表達(dá)明顯高于同窩陰性對(duì)照鼠，在形態(tài)學(xué)上證明了轉(zhuǎn)入的人基因的高表達(dá)。他汀處理的陽性小鼠較陽性小鼠 Aβ 沉積數(shù)量減少，高脂陽性小鼠 Aβ 沉積經(jīng)辛伐他汀處理后的高脂陽性小鼠較高脂陽性小鼠 Aβ 沉積數(shù)量減少。從以果可以看出，膽固醇水平可以影響腦內(nèi) Aβ 沉積表達(dá)水平，經(jīng)辛伐他汀處理Aβ 沉積均有所減少。

17高脂陽性 高脂陽性辛伐他汀圖 5 Thioflavin S 染色結(jié)果每張片子選取 4 個(gè)高倍視野運(yùn)用 Image-pro Plus 圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行圖象分分析結(jié)果顯示，陰性組的 Aβ 沉積數(shù)明顯低于陽性組，高脂陰性組較陰性組多，陽性辛伐他汀組較陽性組 Aβ 沉積數(shù)量減少。高脂陽性組較陽性組 Aβ 明顯增多，高脂陽性辛伐他汀組比高脂陽性組減少。說明，高膽固醇增加 Aβ積的數(shù)量。辛伐他汀處理減少高脂造成的Aβ沉積增多。均有顯著性差異（p<0.與免疫組化結(jié)果一致。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 郝紅;;辛伐他汀 普伐他汀治療高脂血癥療效比較[J];醫(yī)藥論壇雜志;2007年16期

2 徐靜;;辛伐他汀與脂必妥調(diào)脂療效觀察[J];中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2009年08期

3 周宏星;周婕;黃勇;;辛伐他汀治療2型糖尿病合并高脂血癥療效觀察[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2011年15期

4 周長(zhǎng)玉;王哲;元紹敏;;辛伐他汀治療脂肪肝并發(fā)高脂血癥的臨床觀察[J];深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志;2006年05期

5 孫立軍;;辛伐他汀治療糖尿病合并高脂血癥80例[J];首都醫(yī)藥;2007年10期

6 陳文麗;白冬陽;;辛伐他汀治療高脂血癥55例臨床療效分析[J];河南職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年04期

7 陳秋影;;血脂康和辛伐他汀治療高脂血癥的臨床觀察[J];中國(guó)醫(yī)療前沿;2007年21期

8 吳永忠;李曉君;;苯扎貝特和辛伐他汀治療重度高脂血癥一例報(bào)告[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2008年04期

9 廖紅華;;辛伐他汀治療高脂血癥的療效觀察[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2006年02期

10 劉志香;李惠敏;;辛伐他汀治療高脂血癥60例療效觀察及護(hù)理[J];中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2006年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 趙金龍;徐黛玉;;不同劑量辛伐他汀治療高脂血癥的臨床觀察[A];2006年浙江省心血管病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

2 趙巧萍;盧巧英;;絞股藍(lán)總苷與辛伐他汀治療原發(fā)性腎病綜合征高脂血癥療效比較[A];2008年浙江省腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

3 張晉萍;凌春燕;李剛;;脂必妥與辛伐他汀調(diào)節(jié)血脂代謝的成本-效果分析[A];2006第六屆中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

4 楊曉玲;;辛伐他汀增強(qiáng)高脂血癥大鼠抗氧化作用[A];第八次全國(guó)動(dòng)脈硬化性疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

5 楊體模;榮祖元;;國(guó)產(chǎn)辛伐他汀急性毒性及治療高脂血癥的藥理研究[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第九屆制藥工業(yè)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2000年

6 邱賽紅;李磊;李富元;李琳;殷德良;陳北陽;;鵪鶉動(dòng)脈粥樣硬化模型的制備及辛伐他汀作用的觀察[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中藥實(shí)驗(yàn)藥理分會(huì)第八屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

7 何松彬;唐維國(guó);朱永禮;於孝龍;孫茂軍;;辛伐他汀治療對(duì)腦梗死病人血脂及頸動(dòng)脈粥樣斑塊的影響[A];2006年浙江省內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)、2006年浙江省老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

8 傅向華;賈辛未;汪雁博;王學(xué)超;張晶;谷新順;范衛(wèi)澤;;辛伐他汀聯(lián)合山莨菪堿治療對(duì)約克豬冠狀動(dòng)脈介入治療后心肌灌注的保護(hù)作用[A];第十三次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

9 郝文君;白小涓;李占全;;辛伐他汀抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體表達(dá)和p38絲裂素活化蛋白激酶通路激活[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第11次心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

10 鐘業(yè)娟;韋凌云;;辛伐他汀治療早期糖尿病腎病的臨床研究[A];第七屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎臟病會(huì)議論文匯編[C];2003年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 主管藥師 張廣求;高脂血癥的藥物治療[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

2 福建省南平市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 蘭毅;正確認(rèn)識(shí)高脂血癥[N];市場(chǎng)報(bào);2000年

3 施永連;高脂血癥的中醫(yī)治療[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2003年

4 廣東省中醫(yī)院教授 吳煥林;降脂試試兩款藥膳[N];健康時(shí)報(bào);2007年

5 王業(yè)龍;怎樣辨治高脂血癥[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2006年

6 陜西省中醫(yī)藥研究院 洪文旭;高脂血癥辨證論治[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2010年

7 ;高脂血癥治療三部曲[N];保健時(shí)報(bào);2003年

8 李玉梅;高脂血癥者的健康飲食[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2005年

9 市一院心內(nèi)科副主任醫(yī)師 羊鎮(zhèn)宇;如何預(yù)防高脂血癥[N];無錫日?qǐng)?bào);2006年

10 濟(jì)南軍區(qū)青島第一療養(yǎng)院中醫(yī)科 李軍艷;高脂血癥宜從濕毒論治[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李錦;高脂血癥對(duì)兔心室肌電重構(gòu)的影響及其機(jī)理研究[D];四川大學(xué);2006年

2 于睿;疏肝清脂顆粒延緩或消退動(dòng)脈粥樣硬化斑塊機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];遼寧中醫(yī)學(xué)院;2005年

3 張偉華;辛伐他汀對(duì)野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈高壓的作用及機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

4 王瑞;高膽固醇血癥腎損害的機(jī)制及辛伐他汀的干預(yù)作用[D];武漢大學(xué);2010年

5 金f幬

本文編號(hào)：2744949