【摘要】：研究背景：內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)包括大麻素受體(cannabinoid receptor, CB receptor)、內(nèi)源性大麻素(endogenous cannabinoids, eCB)和與eCB合成、降解相關(guān)的酶類(lèi)。目前已被證實(shí)的內(nèi)源性大麻素主要有兩種：N-花生四烯酸氨基乙醇(Arachidonoylethanolamine, AEA)和2-花生四烯酸甘油(2-AG),它們均具有與天然大麻素四氫大麻酚(THC)極為相似的三維結(jié)構(gòu)。 外源性和內(nèi)源性大麻素都是通過(guò)與大麻素受體結(jié)合發(fā)揮其生物學(xué)作用。目前證實(shí)體內(nèi)存在兩種大麻素受體：CB1受體和CB2受體。大麻素受體是G蛋白耦聯(lián)受體,基因克隆研究發(fā)現(xiàn)這兩種受體有44%的氨基酸序列同源。 CB2受體主要分布于外周免疫細(xì)胞,如脾臟邊緣區(qū)、免疫細(xì)胞、扁桃體等,CB2功能主要與免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。 CB1受體主要分布于腦、脊髓和外周神經(jīng)系統(tǒng)中,腦內(nèi)CB1受體主要分布于基底神經(jīng)節(jié)(黑質(zhì)、蒼白球、外側(cè)紋狀體)、海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞層,小腦和大腦皮層。CB1受體的這種分布可能與大麻素對(duì)記憶、認(rèn)知、運(yùn)動(dòng)控制的調(diào)節(jié)功能有關(guān)：此外,在延髓、中腦導(dǎo)水管周?chē)�、脊髓后角等疼痛傳�?dǎo)徑路也有大量CB1受體分布。外周神經(jīng)系統(tǒng)比中樞神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)的CB1受體量少,它們分散地表達(dá)于諸如神經(jīng)末梢等處,介導(dǎo)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。最近大量的研究數(shù)據(jù)提示,中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能的失調(diào)有可能是抑郁癥產(chǎn)生的原因。 伏隔核也稱(chēng)伏核,是基底前腦的一個(gè)較大的核團(tuán),位于基底核與邊緣系統(tǒng)交界處,隔區(qū)的外下方,尾殼核的內(nèi)下方,前方與嗅前核相連,后連接紋狀核。伏隔核于周邊核團(tuán)投射關(guān)系比較復(fù)雜,其纖維聯(lián)系與邊緣系統(tǒng)較為密切,主要接受前腦的傳入纖維,包括內(nèi)側(cè)前額皮質(zhì)、杏仁核、海馬和下丘腦；也接受腦橋區(qū)的投射纖維,包括腹側(cè)被蓋區(qū)、背側(cè)中縫、腦橋網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)腹側(cè)為腹側(cè)蒼白球和嗅結(jié)節(jié),是獎(jiǎng)賞環(huán)路中一個(gè)重要的組成部分。最近研究發(fā)現(xiàn),伏核功能的異�？赡芘c興趣缺失以及抑郁癥其他癥狀的產(chǎn)生相關(guān)。研究目的：應(yīng)用慢性非預(yù)期性應(yīng)激(chronic unpredictable stress,CUS)的小鼠抑郁模型進(jìn)行研究,探討伏核區(qū)域內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)信號(hào)傳遞的改變是否是引起抑郁行為學(xué)改變的基礎(chǔ)。 研究方法： (1)經(jīng)過(guò)6-8周的慢性非預(yù)期性應(yīng)激(CUS)建立小鼠抑郁模型,同時(shí)觀察1周的次慢性非預(yù)期性應(yīng)激(sub-CUS)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。 (2)抑郁模型完成后,進(jìn)行與抑郁癥相關(guān)的動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè),包括蔗糖水?dāng)z入實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、新環(huán)境抑制攝食實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。 (3)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)完成后,處死動(dòng)物分離胸腺和腎上腺并稱(chēng)重,評(píng)估慢性非預(yù)期性應(yīng)激對(duì)免疫系統(tǒng)和下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸功能的影響；取血,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附方法進(jìn)行血清皮質(zhì)酮含量測(cè)定；取腦并分離紋狀體,應(yīng)用高效液相色譜(HPLC)法對(duì)腦組織內(nèi)AEA和2-AG含量進(jìn)行測(cè)定。 (4)動(dòng)物處死后制備腦片(brain slice),使用電生理設(shè)備記錄CB1受體介導(dǎo)的神經(jīng)突觸可塑性變化的電生理指標(biāo),包括細(xì)胞內(nèi)記錄Depolarization-induced suppression of excitation (DSE),細(xì)胞外記錄長(zhǎng)時(shí)程抑制(LTD)和Ⅰ型代謝型谷氨酸受體(groupⅠmGluR)激動(dòng)劑DHPG對(duì)場(chǎng)-興奮性突觸后電位(fEPSP)的抑制。 (5)在腦片上應(yīng)用CB1受體激動(dòng)劑WIN 55,212-2,細(xì)胞外記錄CB1受體激動(dòng)劑對(duì)場(chǎng)-興奮性突觸后電位(fEPSP)的抑制作用,比較應(yīng)激組與非應(yīng)激組之間CB1受體功能是否發(fā)生改變。 結(jié)果： (1)給予慢性非預(yù)期性應(yīng)激6周后,小鼠表現(xiàn)出抑郁樣行為學(xué)改變,包括攝入蔗糖水絕對(duì)量和相對(duì)量減少,曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)自主活動(dòng)性降低和中央停留時(shí)間縮短,新環(huán)境攝食潛伏期延長(zhǎng),強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)。而次慢性非預(yù)期性應(yīng)激(給予應(yīng)激1周)后的動(dòng)物沒(méi)有出現(xiàn)明顯的行為學(xué)改變。 (2)在腦片的伏核核心區(qū)(Nac core)記錄興奮性突觸后電流(EPSCs),在單一使用去極化刺激條件下,無(wú)論是通過(guò)提高去極化程度(從-80mV到10或20mV)還是延長(zhǎng)去極化時(shí)間(1s,5s和10s)都無(wú)法成功誘導(dǎo)DSE。在細(xì)胞外液中加入Ⅰ型mGluR的激動(dòng)劑DHPG(5μM)后,從-80mV去極化到0mV持續(xù)5s可以成功誘導(dǎo)DSE。 (3)使用以上方法在伏核核心區(qū)域誘導(dǎo)DSE,慢性非預(yù)期性應(yīng)激與對(duì)照組相比誘導(dǎo)出DSE的幅度降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而DSE的持續(xù)時(shí)間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而次慢性非預(yù)期性應(yīng)激組誘導(dǎo)DSE無(wú)論在幅度還是持續(xù)時(shí)間上與對(duì)照組相比都無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 (4)在伏核核心區(qū)域誘導(dǎo)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)介導(dǎo)的LTD,次慢性非預(yù)期性應(yīng)激組與對(duì)照組相比LTD幅度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而慢性非預(yù)期性應(yīng)激影響LTD的形成。 (5)應(yīng)用抗抑郁藥氟西汀(Fluoxetine)治療對(duì)于慢性非預(yù)期性應(yīng)激造成的行為學(xué)異常和內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)信號(hào)的傳遞受損都有改善作用。 結(jié)論：研究結(jié)果表明,慢性非預(yù)期性應(yīng)激可以導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抑郁樣行為改變和伏核區(qū)域eCB/CB1受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受損,次慢性應(yīng)激則沒(méi)有以上作用；應(yīng)用抗抑郁藥物氟西汀可以逆轉(zhuǎn)慢性應(yīng)激造成的改變。以上結(jié)果提示慢性非預(yù)期型應(yīng)激抑郁模型動(dòng)物伏核區(qū)域的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能受損。 意義：研究慢性應(yīng)激導(dǎo)致的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)功能異常可以加深我們對(duì)抑郁癥發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí),促進(jìn)抗抑郁治方案的優(yōu)化,同時(shí)為抗抑郁藥物的研發(fā)提供了新的靶點(diǎn)。 研究背景：人類(lèi)吸食大麻(Cannabinoids,CB)的歷史已經(jīng)有一千多年,大麻中的主要有效成分是四氫大麻酚(THC)。人類(lèi)應(yīng)用大麻類(lèi)物質(zhì)可以產(chǎn)生精神興奮、改善抑郁癥狀的作用,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用大麻類(lèi)物質(zhì)以及大麻素受體1(CB1 receptor)激動(dòng)劑可以產(chǎn)生抗抑郁樣作用,而治療肥胖癥的藥物CB1受體拮抗劑利莫那班(Rimonabant)在臨床實(shí)驗(yàn)中則增加患者焦慮和抑郁的發(fā)生率。因此,調(diào)節(jié)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)(eCB system)的功能有可能是治療抑郁癥的一種新的有效方法。直接的CB1受體激動(dòng)劑可以增強(qiáng)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的功能,但其缺陷是CB1受體激動(dòng)劑無(wú)差別的廣泛作用于全部CB1受體。通過(guò)選擇性的阻斷內(nèi)源性大麻素物質(zhì)降解而達(dá)到增強(qiáng)內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的功能則可以克服以上缺點(diǎn),在增強(qiáng)eCB功能的同時(shí)保證在正常生理狀態(tài)下CB1受體激動(dòng)的部位和持續(xù)時(shí)間。腦內(nèi)最主要的兩種eCB配體AEA和2-AG分別通過(guò)脂肪酰胺水解酶(FAAH)和單�；视椭�(MAGL)降解。有研究表明FAAH和AEA運(yùn)輸?shù)囊种苿┛梢詫?duì)嚙齒類(lèi)動(dòng)物產(chǎn)生抗焦慮和抗抑郁的作用,然而對(duì)MAGL的抑制是否能產(chǎn)生相似的作用仍然未知。研究目的：JZL184是新合成的一種高選擇性MAGL抑制劑,可以選擇性的抑制腦內(nèi)MAGL,增加2-AG含量。通過(guò)對(duì)慢性非預(yù)期性應(yīng)激小鼠長(zhǎng)期應(yīng)用JZL184,探討對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)MAGL的抑制是否可以產(chǎn)生抗抑郁作用。 研究方法： (1)經(jīng)過(guò)6-8周的慢性非預(yù)期性刺激(CUS)建立小鼠抑郁模型。 (2)抑郁模型完成后,進(jìn)行相關(guān)的動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè),包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),新鮮環(huán)境抑制攝食實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。 (3)用免疫組織化學(xué)方法測(cè)定各組海馬齒狀回(DG) BrdU陽(yáng)性和DCX陽(yáng)性新生神經(jīng)元數(shù)量。 (4)記錄DG區(qū)域神經(jīng)突觸的基本電生理特征如paired-pluse ratio(PPR), input-output(I/O)relationships,誘導(dǎo)新生神經(jīng)元依賴(lài)性LTP。 (5)對(duì)小鼠進(jìn)行條件性位置偏愛(ài)(conditioned place preference,CPP)實(shí)驗(yàn),評(píng)價(jià)治療劑量下(8mg/kg)小鼠有無(wú)對(duì)JZL184產(chǎn)生依賴(lài)。 結(jié)果： (1)慢性非預(yù)期性應(yīng)激后小鼠產(chǎn)生抑郁樣行為學(xué)改變,在體內(nèi)應(yīng)用MAGL抑制劑JZL184后產(chǎn)生抗抑郁樣行為學(xué)效應(yīng)。 (2)慢性非預(yù)期性應(yīng)激后DG區(qū)域的BrdU陽(yáng)性和DCX陽(yáng)性細(xì)胞與對(duì)照組相比明顯減少,應(yīng)用JZL184治療后,新生神經(jīng)元的數(shù)量增加。 (3)慢性非預(yù)期性應(yīng)激和JZL治療對(duì)PPR無(wú)顯著影響。 (4)慢性非預(yù)期性應(yīng)激降低I/O曲線(xiàn)的斜率,JZL184治療后I/O曲線(xiàn)斜率恢復(fù)。 (5)慢性非預(yù)期性應(yīng)激后,DG新生神經(jīng)元依賴(lài)性LTP受損,經(jīng)JZL184治療后LTP得到改善。CUS和JZL184治療都未影響非新生神經(jīng)元依賴(lài)性LTP。 (6)CPP實(shí)驗(yàn)表明使用JZL184 8mg/kg的劑量對(duì)小鼠無(wú)成癮效應(yīng)。 結(jié)論：體內(nèi)應(yīng)用MAGL抑制劑JZL184治療慢性非預(yù)期性應(yīng)激抑郁小鼠產(chǎn)生抗抑郁樣效應(yīng),并且增加了海馬新生神經(jīng)元數(shù)量,增強(qiáng)海馬新生神經(jīng)元依賴(lài)的LTP,表明MAGL抑制劑可以通過(guò)增加海馬神經(jīng)發(fā)生產(chǎn)生抗抑郁作用。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R749.4

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李偉;唐曉偉;林圣彬;周鴻銘;魯亞平;;雌激素受體α在抑郁癥模型大鼠海馬中的分布[J];安徽師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年01期

2 闞紅衛(wèi),明亮,鄭麗芳,尹艷艷;BCPT對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠行為及體重的影響[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年02期

3 周志華;韓詠竹;;抑郁癥動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)學(xué);2008年02期

4 周蘭蘭,明亮,馬傳庚,程燕,江勤;新型蟲(chóng)生菌提取物對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌的影響[J];安徽醫(yī)藥;2005年06期

5 鄭麗芳,明亮;抑郁癥動(dòng)物模型的研究與應(yīng)用[J];安徽醫(yī)藥;2005年11期

6 張有志,聶惠民,張德昌;柴地合方對(duì)慢性應(yīng)激大鼠大腦前額皮質(zhì)和海馬單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年01期

7 秦麗娜;史榕荇;圖婭;;電針對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠腦腸肽類(lèi)激素的影響[J];安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年01期

8 崔冬雪;范秦海;劉建國(guó);季瀏;;游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)實(shí)驗(yàn)性抑郁癥大鼠行為學(xué)指標(biāo)及皮質(zhì)酮含量的影響[J];北京體育大學(xué)學(xué)報(bào);2007年01期

9 賀立娟;王玉來(lái);馬玉峰;郭蓉娟;趙秀梅;李丹;杜雅薇;尹嶺;;柴胡疏肝散對(duì)肝氣郁結(jié)證大鼠行為學(xué)及血漿IL-6、TNF-α的影響[J];北京中醫(yī)藥;2012年05期

10 周海虹;陸lN;陳艷玲;朱紅梅;王訓(xùn);胡紀(jì)原;韓詠竹;;柴郁溫膽湯對(duì)大鼠抑郁模型行為學(xué)及腦內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2008年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 ;Biochemical mechanism studies of venlafaxine by metabonomic method in rat model of depression[A];共鑄醫(yī)藥學(xué)術(shù)新文明——2012年廣東省藥師周大會(huì)論文集[C];2012年

2 剛宏林;何志一;劉相輝;;玻璃苣醇提物對(duì)慢性抑郁模型小鼠腦組織中神經(jīng)遞質(zhì)的影響[A];2011年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第11屆中國(guó)藥師周論文集[C];2011年

3 陳純白;都霞;趙樂(lè)萍;王林;吳淑娟;潘建春;;白藜蘆醇拮抗圍絕經(jīng)期抑郁模型小鼠的行為異常及機(jī)制研究[A];2011年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第11屆中國(guó)藥師周論文集[C];2011年

4 趙樂(lè)萍;林蒙蒙;邵拓;潘建春;;白藜蘆醇與胡椒堿聯(lián)用的抗抑郁作用可能涉及下丘腦5-HT系統(tǒng)及HPA軸[A];2011年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第11屆中國(guó)藥師周論文集[C];2011年

5 范軍銘;;電針對(duì)腦卒中后抑郁大鼠單胺類(lèi)遞質(zhì)的影響[A];2011中國(guó)針灸學(xué)會(huì)年會(huì)論文集（摘要）[C];2011年

6 黃學(xué)寬;;電針“四關(guān)”穴對(duì)抑郁模型大鼠結(jié)腸組織的保護(hù)作用[A];重慶市針灸學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2010年

7 蘇芬麗;高維;涂繼瑩;李煥德;;文拉法辛在抑郁癥模型大鼠體內(nèi)生化機(jī)制的代謝物組學(xué)研究[A];2010年廣東省藥師周大會(huì)論文集[C];2011年

8 王彥云;鄭軍;李多嬌;潘菊華;黃世敬;;開(kāi)心解郁湯對(duì)血管性抑郁大鼠模型的行為及體重的影響[A];2009年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第九屆中國(guó)藥師周論文集[C];2009年

9 王彥云;鄭軍;李多嬌;潘菊華;黃世敬;;開(kāi)心解郁湯對(duì)血管性抑郁大鼠模型的行為及體重的影響[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

10 黃世敬;王彥云;鄭軍;李多嬌;潘菊華;;開(kāi)心解郁方對(duì)血管性抑郁大鼠模型的行為學(xué)干預(yù)研究[A];2009年全國(guó)中藥學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 錢(qián)霞;K-ATP通道與帕金森病的相關(guān)性研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 孔輝;水通道蛋白4對(duì)成年CD1小鼠腦內(nèi)神經(jīng)再生的調(diào)節(jié)作用[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

3 王曉濱;坤寧安對(duì)圍絕經(jīng)期慢性應(yīng)激抑郁大鼠行為的影響及作用機(jī)制研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 王瑩;藥物難治性抑郁形成的炎癥機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

5 黨永輝;腹外側(cè)眶皮層參與抗傷害感受與情緒調(diào)節(jié)的研究[D];西安交通大學(xué);2010年

6 紀(jì)孝偉;卒中后抑郁大鼠腦內(nèi)單胺類(lèi)遞質(zhì)及FGF-2表達(dá)的研究[D];山東大學(xué);2011年

7 鄭興東;CRH、ACTH、NPY和GAL在抑郁癥發(fā)病中作用及其機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 韓毳;電針治療抑郁癥的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2002年

9 趙虎;天敵應(yīng)激對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元的損害作用及海馬類(lèi)固醇激素受體系統(tǒng)對(duì)精神應(yīng)激反應(yīng)的調(diào)節(jié)效應(yīng)研究[D];汕頭大學(xué);2003年

10 周蘭蘭;一種白僵菌代謝產(chǎn)物提取物（BCEF0083）抗實(shí)驗(yàn)性抑郁的作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 桑倩;慢性應(yīng)激對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶影響機(jī)制的研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

2 李慧;肝郁血瘀型宮環(huán)出血病病癥結(jié)合大鼠模型的建立及研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2010年

3 王玉其;枳菊解郁湯對(duì)抑郁模型小鼠行為學(xué)的影響及其機(jī)制[D];曲阜師范大學(xué);2011年

4 張亞楠;年齡相關(guān)的小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的變化及GDNF的作用[D];曲阜師范大學(xué);2011年

5 陳茉弦;不同時(shí)期產(chǎn)前應(yīng)激對(duì)大鼠子代行為學(xué)及分子生物學(xué)的影響[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

6 黃江劍;百合抗抑郁有效部位質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及藥理作用研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

7 董素平;海馬NMDA受體參與慢性應(yīng)激經(jīng)SP-NK1受體通路誘發(fā)抑郁樣行為[D];陜西師范大學(xué);2011年

8 原婷婷;海馬多巴胺D1受體激活抑制谷氨酸介導(dǎo)的大鼠慢性應(yīng)激性抑郁[D];陜西師范大學(xué);2011年

9 何婷;慢性應(yīng)激性抑郁發(fā)生與海馬Glu和GABA水平變化及其受體機(jī)制[D];陜西師范大學(xué);2011年

10 周冉;阿司匹林聯(lián)合氟西汀對(duì)CUMS抑郁模型大鼠行為學(xué)的影響及其可能機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

本文編號(hào)：2739127