【摘要】：目的：隨著世界老齡化的到來(lái)，老年疾病已是一個(gè)不容忽視的問(wèn)題。包括阿爾茨海默�。ˋlzheimer disease，AD）在內(nèi)的老年癡呆患者越來(lái)越多。據(jù)國(guó)外一項(xiàng)流行病學(xué)調(diào)查研究,老年癡呆癥已成為繼心腦血管病、腫瘤等之后的第4大死亡原因。AD患者腦組織內(nèi)有大量β-淀粉樣蛋白(β-amyloid peptide, Aβ)的沉積、老年斑的形成以及神經(jīng)纖維的纏結(jié)，并且這些病理改變不斷地引起神經(jīng)退行性變。 目前認(rèn)為Aβ的生成增加及其在腦內(nèi)的沉積是AD發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素。引起Aβ生成增加的因素是多方面的。細(xì)胞培養(yǎng)及整體實(shí)驗(yàn)均證明，高膽固醇是AD的一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)因素。 腦組織的膽固醇都是自身合成的，HMG-CoA還原酶(HMGR)是其合成過(guò)程中的限速酶。用HMGR的抑制劑，抑制膽固醇的合成，降低細(xì)胞及血液中膽固醇，可以減少Aβ的生成，降低AD的患病率。但是，膽固醇是細(xì)胞膜、神經(jīng)髓鞘的重要組成成分，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的通透性、流動(dòng)性以及物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)等功能。抑制膽固醇合成會(huì)帶來(lái)很多副作用。 腦內(nèi)膽固醇含量還受其轉(zhuǎn)出量的影響。腦內(nèi)膽固醇在膽固醇24S-羥化酶的（Cholesterol-24S-hydroxylase 即CYP46）催化下，生成24S-羥基膽固醇（24S-hydroxycholesterol）出腦，通過(guò)血腦屏障入肝，在肝臟代謝生成膽汁酸后排出體外。 膽固醇在肝臟轉(zhuǎn)化為膽汁酸是機(jī)體清除膽固醇的主要方式，首先，膽固醇在7α-羥化酶的催化下生成7α-羥膽固 WP=4 醇。后者經(jīng)過(guò)一系列的還原、羥化后，進(jìn)入過(guò)氧化物酶體，經(jīng)側(cè)鏈斷裂、加輔酶A等反應(yīng)，最后生成24碳的初級(jí)膽汁酸。促進(jìn)膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化，是否能夠降低腦組織β-淀粉樣蛋白生成、是否能夠達(dá)到延緩AD的發(fā)生發(fā)展的目的呢？未見(jiàn)報(bào)道。 因膽汁酸結(jié)合樹(shù)脂類藥物考來(lái)烯胺可以促進(jìn)膽汁酸的合成、排出，降低膽固醇。過(guò)氧化酶體增殖誘導(dǎo)劑鄰苯二甲酸二異辛酯(Diethylhexyl phthalate, DEHP)激活PPAR-α,促進(jìn)過(guò)氧化物酶體增殖，也可以促進(jìn)膽汁酸合成，降低血膽固醇。本實(shí)驗(yàn)分別用考來(lái)烯胺、DEHP促進(jìn)膽汁酸的合成，加強(qiáng)膽固醇轉(zhuǎn)化成膽汁酸，觀察腦中膽固醇及β-淀粉樣蛋白的含量變化。弄清是否可通過(guò)促進(jìn)膽固醇向膽汁酸的代謝來(lái)降低β-淀粉樣蛋白，最終達(dá)到治療AD的目的。為AD的治療提供新思路和新途徑。 方法 1動(dòng)物分組： 選用6月齡清潔級(jí)Wistar雄性大鼠60只，隨機(jī)分為兩組，一組為45只，給予高膽固醇飲食（含2%膽固醇、10%豬油）；另一組為15只，給予普通飲食。第4周，高膽固醇飲食大鼠造成高膽固醇血癥。然后將高膽固醇血癥大鼠再隨機(jī)分成四組，分別給予不同的飲食：①高膽固醇飲食組(High cholesterol diet, HCD)：高膽固醇飼料；②考來(lái)烯胺組（cholestyramine diet, CD）：含1%考來(lái)烯胺的普通飼料；③誘導(dǎo)劑DEHP組(DEHP diet, DD)：含2%DEHP的普通飼料；④轉(zhuǎn)普通飲食組（Change to basal diet, CBD）：普通飼料。⑤自始至終食用普通飲食 (Basal diet,BD) 的15只大鼠為對(duì)照 WP=5 組。繼續(xù)飼養(yǎng)9周，共13周。測(cè)定大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力后，取血、腦分別用于血膽固醇、血膽汁酸的測(cè)定以及腦總mRNA的提取、腦Aβ和腦膽固醇的測(cè)定。迅速剝離海馬，70%酒精固定，用于細(xì)胞凋亡的測(cè)定。 2 測(cè)定指標(biāo)及方法 ①用被動(dòng)回避性跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。 ②用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血膽固醇、血膽汁酸； ③腦組織膽固醇用氯仿/甲醇（2：1 V/V）抽提、蒸干、復(fù)溶于水后，采用膽固醇氧化酶-比色法測(cè)定其含量； ④應(yīng)用RT-PCR技術(shù)測(cè)定腦HMG-CoA還原酶及CYP46 的mRNA表達(dá)量； ⑤用放免法測(cè)定腦β-淀粉樣蛋白的含量； ⑥用FACS420型流式細(xì)胞儀測(cè)定海馬組織細(xì)胞凋亡率； 結(jié)果 1 學(xué)習(xí)、記憶能力的變化 大鼠的學(xué)習(xí)能力，各組無(wú)顯著差別。但高膽固醇飲食組（HCD）大鼠的記憶能力下降，出錯(cuò)次數(shù)明顯高于其他各組（p＜0.05）。表明，大鼠記憶能力的下降與高膽固醇血癥有關(guān)。 2 腦組織Aβ含量的變化 腦內(nèi)的Aβ含量，高膽固醇飲食組（HCD）最高，明顯地高于對(duì)照組（p＜0.05），其余各組之間無(wú)顯著性差別。說(shuō)明腦Aβ含量與血高膽固醇有關(guān)。 3 海馬組織細(xì)胞凋亡率的變化 與對(duì)照組相比，各組的細(xì)胞凋亡率都明顯地增高( p＜ WP=6 0.05)；其中高膽固醇飲食組（HCD）最高，考來(lái)烯胺組（CD）較轉(zhuǎn)普通飲食組（CBD）低( p＜0.05)。說(shuō)明海馬組織的細(xì)胞凋亡率與血膽固醇的水平有關(guān)。 4 血中膽固醇含量的變化 血中膽固醇與對(duì)照組相比，高膽固醇飲食組（HCD）血膽固醇明顯升高( p＜0.001)，考來(lái)烯胺組（CD）血膽固醇明顯降低( p＜0.001)，誘導(dǎo)劑DEHP組（DD）血膽固醇無(wú)變化。 綜上所述，大鼠記憶能力的降低與海馬組織的細(xì)胞凋亡率、Aβ的含量增加有關(guān)；Aβ的含量與血膽固醇水平有關(guān)。 5 腦組織膽固醇量的變化 與對(duì)照組相比,腦膽固醇含量，除誘導(dǎo)劑DEHP組（DD）明顯增高（p＜0.05）外，其余各組均無(wú)變化；說(shuō)明腦膽固醇含量與血膽固醇水平無(wú)直接關(guān)系。 6 腦組織HMG-CoA還原酶(HMGR) mRNA表達(dá)的變化 與對(duì)照組相比，考來(lái)烯胺組（CD）、誘導(dǎo)劑DEHP組（DD）的HMGR mRNA表達(dá)增加（p＜0.05）；高膽固醇飲食組（HCD）的HMGR mRNA表達(dá)無(wú)顯著差別。提示血中高膽固醇并不抑制腦膽固醇的合成。 7 腦組織膽固醇-24S-
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 張均田,齋藤洋;十二種化學(xué)藥品破壞小鼠被動(dòng)回避性行為——跳臺(tái)試驗(yàn)和避暗試驗(yàn)的作用的比較觀察[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);1986年01期

2 王琦,謝瑤,姚志彬;β-淀粉樣蛋白31～35對(duì)體外培養(yǎng)的隔區(qū)膽堿能神經(jīng)元的作用[J];中國(guó)神經(jīng)科學(xué)雜志;1999年02期

3 王玲玲,奚濤,沈子龍,成國(guó)祥;老年癡呆癥轉(zhuǎn)基因小鼠模型研究進(jìn)展[J];藥物生物技術(shù);2001年02期

本文編號(hào)：2722020