發(fā)布時間：2020-06-20 01:13

【摘要】： β-淀粉樣蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)和淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein,APP)與阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的發(fā)生、發(fā)展密切相關。本論文圍繞這兩種蛋白開展了相關研究。 為了克服從前免疫治療AD引起的嚴重副作用,本論文開展了應用不同長度的Aβ的實驗免疫研究。本論文表達純化了的三種重組蛋白Aβ28H8、Aβ35H8和Aβ42H8,與Aβ42(純品)一起,作為免疫原免疫小鼠,獲得血清抗體。四種免疫原誘導產生抗體的滴度分別為1:6400、1:3200、1:6400、1:6400。研究發(fā)現(xiàn),獲得的四種血清抗體均能夠識別包括Aβ42單體、寡聚體、原纖維和成熟纖維在內的各種聚集形式的Aβ42,具有抑制Aβ42的聚集、誘導Aβ42聚集體解聚的功效,具有抑制和中和Aβ42細胞毒性的作用。與其他三種免疫原相比,Aβ28H8主要誘導了體液免疫應答,因此可以避免由細胞免疫應答引起的炎癥反應。由此證明:Aβ28是一種有效且較Aβ42更為安全的免疫原。 為了進一步探討AD的致病機理,探索APP分子間相互作用的關鍵區(qū)域,本論文以COS-7為靶細胞,通過免疫共沉淀、細胞傷口愈合、transwell、免疫熒光、細胞粘附等實驗證實,APP對靶細胞的遷移有阻滯作用,APP分子間可以發(fā)生相互作用,并介導靶細胞間的相互聚集,或介導靶細胞在基質Aβ4-8,Aβ11,Aβ28,Aβ35,Aβ42,C99上的粘附,而Aβ42或由Aβ28誘導產生的抗體能夠抑制上述所有的作用。因此可以推斷:Aβ42的胞外區(qū),特別是Aβ4-8區(qū)域,有可能是導致包含該區(qū)域的相關分子間發(fā)生相互作用的最關鍵區(qū)域。 上述結果為免疫預防與治療AD的疫苗設計提供了理論指導,為進一步探索AD的致病機理奠定了理論基礎。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R749.16
【圖文】：

成熟的 Aβ42 淀粉樣纖維相比，Aβ42 寡聚體和原纖維可能具有更。Aβ42 寡聚體的結構與一類可以在細胞膜上形成通道的細菌毒素很研究者認為其毒性機理可能是在細胞膜上形成了特殊的離子通道，系失衡[17]。由于認知正常的老年人腦內也可能有大量的 Aβ42 纖維研究者對 Aβ42 與 AD 的關系存在懷疑[18，19]；但可溶性的 Aβ42 寡有更好的相關性[20，21]，這表明大量不可溶的 Aβ42 纖維可能作為一放具有細胞毒性的可溶的 Aβ42 寡聚體[13]。由此我們可以推斷，清內各種聚集形式的 Aβ42，都可能對 AD 的治療起作用。圖 1.1 APP 的水解及 Aβ 的產生�！璏 DAEFRHDSGYEVHHQK LVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGV V IA TV……βαAβ40Aβ39 Aβ42γ γγ

APP 分子從 N 端到 C 端，總體上可以劃分為三個高度保域：E1 區(qū)域，E2 區(qū)域和 C 端區(qū)域[46，47]。E1 區(qū)域包括一個肝素結合結Heparin-binding domain，HBD1），又名類生長因子結構域（growth factormain，GFLD）和一個銅結合結構域（copper-binding domain，CuBD）；E 之間是一個高度酸性的區(qū)域，在 APP751 和 APP770 分子中，酸性區(qū)域與域之間還存在一個 KPI 或 KPI 及 Ox-2 抗原結構域；E2 區(qū)域又稱為 APP 域（centralAPP domain，CAPPD），包含一個促胸腺生成素序列（RERMS個高親和力的肝素結合結構域（HBD2），E2 和其后的一小段近膜區(qū)域又圖 1.2 APP 結構域劃分。從 N 端到 C 端依次劃分為三個高度保守的區(qū)域：E1 區(qū)域，E2 區(qū)域和 C 域（其中 RERMS 序列可能是 APP 促進細胞生長和分化的活性位點）

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 吳惠玲;文國強;王冰雁;;阿爾茨海默病的細胞凋亡機制[J];海南醫(yī)學;2010年01期

2 蔡高梅;畢建忠;;TRAIL在Aβ25-35誘導的大鼠海馬組織中的表達[J];醫(yī)學臨床研究;2008年10期

3 王晶;余惠e

本文編號：2721631