【摘要】：目的:探討醌氧化還原酶1(NQO1)基因mRNA和蛋白在甲基苯丙胺(METH)依賴人群的病理生理作用,NQO1 609 C/T(rs1800566)多態(tài)性等位基因和基因型與METH依賴者相關(guān)性及其影響因素,分析NQO1609C/T基因型是否影響NQO1基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平變化,為METH依賴的預(yù)防和治療提供分子生物學(xué)依據(jù)。方法:收集392例中國漢族METH依賴者(實(shí)驗(yàn)組)和669例中國漢族無METH依賴的健康體檢者(對照組)的人口學(xué)特征、實(shí)驗(yàn)室檢查資料及外周血樣;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)檢測NQO1 mRNA在PBMCs的相對表達(dá)量,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測血漿蛋白的表達(dá)水平,NQO1 609C/T多態(tài)性采用限制片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)(RFLP-PCR)和直接測序基因分型技術(shù)進(jìn)行檢測。利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對所得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以P0.05為檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組在年齡、性別、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和收縮壓與對照者均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);實(shí)驗(yàn)組身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)20.44±5.14 kg/m~2明顯低于對照組BMI 22.19±3.13kg/m~2(P0.01);實(shí)驗(yàn)組的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白量和舒張壓均顯著高于對照組(P0.01)。NQO1 mRNA實(shí)驗(yàn)組的相對表達(dá)量3.2650±2.2943明顯高于對照組相對表達(dá)量1.0125±0.7959(P0.001),NQO1血漿蛋白在實(shí)驗(yàn)組表達(dá)水平0.2368±0.1486顯著低于對照組表達(dá)水平0.5844±0.1742(P0.001)。392例實(shí)驗(yàn)組和669例對照組完成NQO1 609C/T等位基因和基因型分型,NQO1 609C/T多態(tài)性基因型頻率在對照組人群具有較好的代表性(基因型頻率分布符合HWE,P=0.06)。實(shí)驗(yàn)組NQO1 609C/T多態(tài)性T等位基因頻率46.56%明顯高于對照組T等位基因頻率41.78%(P=0.032,OR=1.214,95%CI=1.017-1.450)。實(shí)驗(yàn)組NQO1 609C/T多態(tài)性CC、CT、TT基因型頻率分別為24.49%、57.91%和17.60%,對照組CC、CT、TT基因型頻率分別為32.14%、52.17%和15.69%;在同質(zhì)遺傳模式(TT vs CC)、異質(zhì)遺傳模式(TC vs CC)、顯性遺傳模式(TC+TT vs CC)和隱性遺傳模式(TT vs TC+CC)分析NQO1 609C/T多態(tài)性基因型與METH依賴人群的風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系發(fā)現(xiàn)在異質(zhì)遺傳模式和顯性遺傳模式下差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(TC vs CC:P=0.012,OR=1.457,95%CI=1.087-1.952;TC+TT vs CC:P=0.008,OR=1.460,95%CI=1.102-1.935),在同質(zhì)遺傳模式和隱性遺傳模式下差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(TT vs CC:P=0.051,OR=1.472,95%CI=0.999-2.168;TT vs TC+CC:P=0.418,OR=1.147,95%CI=0.822-1.601)。多因素Logistic回歸分析調(diào)整年齡和性別后,仍得到類似結(jié)果。實(shí)驗(yàn)組按照同質(zhì)遺傳模式和異質(zhì)遺傳模式對年齡、性別、BMI、血壓和血常規(guī)進(jìn)行分層分析發(fā)現(xiàn)NQO1 609C/T多態(tài)性基因型無論在同質(zhì)遺傳模式或異質(zhì)遺傳模式下均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。NQO1 609C/T多態(tài)性的功能評價(jià)采用對照組基因型與其mRNA和蛋白是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異進(jìn)行評價(jià),結(jié)果表明NQO1 609C/T多態(tài)性CT、TT和CT/TT基因型與NQO1 mRNA和血漿蛋白無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);實(shí)驗(yàn)組也得出類似結(jié)果。結(jié)論:(1)METH依賴可能引起人體身體素質(zhì)和生理生化指標(biāo)的改變;(2)NQO1基因mRNA和蛋白在METH依賴的病理生理過程中起著重要的作用;(3)NQO1 609C/T多態(tài)性可能與中國漢族METH依賴人群的遺傳易感性有關(guān),并不受年齡、性別、BMI、血壓和炎癥狀態(tài)等因素影響;(4)NQO1 609C/T多態(tài)性可能不引起NQO1轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的變化。 【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R749.64

【圖文】：

圖 1 總 RNA 瓊脂糖凝膠電泳圖Fig 1 The total RNA of electrophoretogramCR 擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率的檢測 擴(kuò)增的特異性檢驗(yàn)：圖 2 顯示的是 β-actin 和 NQO峰值分別為 85.9℃和 83.9℃，兩者的溶解曲線均呈峰，無雜峰，表明擴(kuò)增產(chǎn)物具有良好的特異性。

圖 2 β-actin 和 NQO1 的熔解曲線Fig2 The melting curve of β-actin and NQO1A：β-actin 熔點(diǎn)峰值：85.9℃；B：NQO1 熔點(diǎn)峰值：83.9℃；A：The melting peak of β-actin was 85.9℃ ；B：The melting peak of NQO1 was 83.9℃qPCR 擴(kuò)增效率的檢驗(yàn)：圖 3 顯示的是 β-actin 和 NQO1 的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)品經(jīng) 10 倍濃度梯度稀釋后進(jìn)行 qPCR 擴(kuò)增而獲得的，β-acO1 的直線相關(guān)系數(shù)（R2）分別 0.997 和 0.991，斜率（slope）分614 和-3.3349，經(jīng)公式換算后擴(kuò)增效率分別為 94.49%和 99.46%直線的相關(guān)性好，擴(kuò)增效率高，qPCR 反應(yīng)體系和條件適宜；圖是 β-actin 和 NQO1 標(biāo)準(zhǔn)品 10 倍濃度梯度稀釋的 qPCR 擴(kuò)增曲滑，復(fù)孔高度一致，，濃度梯度間距基本一致；表明在此條件下

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 Goldman J.S.;Johnson J.K.;McElligott K.;郭俊;;慎重解釋早老素-1基因Glu318Gly的多態(tài)性[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(神經(jīng)病學(xué)分冊);2006年02期

2 俞民澍,邱信芳,薛京倫,劉祖洞,談家楨,李厚均,劉德祥,李力,余伍忠,唐仙珍,周美蓉;中國漢族、維吾爾族、哈薩克族和回族群體線粒體DNA多態(tài)性的研究[J];中國科學(xué)(B輯 化學(xué) 生物學(xué) 農(nóng)學(xué) 醫(yī)學(xué) 地學(xué));1988年01期

3 耿社民;;牛的血紅蛋白多態(tài)性與經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)系[J];中國黃牛;1988年01期

4 趙永升,宋麗華;面向?qū)ο蟪绦蛟O(shè)計(jì)語言的多態(tài)性探究[J];山東師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2002年02期

5 杜誠;郭浩志;;多態(tài)性的分類及其特性[J];計(jì)算機(jī)科學(xué);1994年01期

6 Bacanli A.;Sallakci N.;Yavuzer U.;E.Alpsoy;任建文;;土耳其Beh

本文編號(hào)：2712366