【摘要】：【研究背景與目的】慢性應激誘導海馬小膠質細胞激活,使其產生大量的炎性介質,并介導抑郁癥的發(fā)生。小膠質細胞極化的兩種表型經典型M1和替代激活M2型對中樞神經炎癥有重要的調節(jié)作用,并參與了抑郁癥的發(fā)生發(fā)展。已有研究顯示Apelin-13具有抗抑郁的作用,但其具體的機制仍未闡明。本研究從小膠質細胞極化的角度探討Apelin-13改善慢性應激誘導大鼠抑郁樣行為的可能機制�！痉椒ā砍赡晷坌許prague Dawley(SD)大鼠接受28天的慢性浸水束縛應激。每只應激組大鼠通過側腦室微量注射Apelin-13(2μg/2μl),連續(xù)注射7天。采用糖水偏好、強迫游泳和懸尾實驗檢測大鼠抑郁樣行為。采用Western blot檢測大鼠海馬小膠質細胞M1型極化標志物誘導型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,i NOS)、促炎因子白細胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和白細胞介素-1β(Interleukin-1beta,IL-1β)的蛋白表達以及小膠質細胞M2型極化標志物精氨酸酶1(Arginase 1,Arg1)、抗炎因子白細胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白細胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)的蛋白表達。采用免疫熒光雙標檢測小膠質細胞的標記物離子鈣接頭蛋白抗原(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1,Iba-1)分別與小膠質細胞極化標志物Arg1和i NOS的免疫熒光共表達。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(2μg/m L)處理N9小膠質細胞6 h,再用Apelin-13(0.1μM)處理24 h,Western blot檢測i NOS和Arg1的蛋白表達�！窘Y果】慢性束縛浸水應激誘導的大鼠抑郁樣行為的產生;與應激組相比,Apelin-13組顯著抑制大鼠相對糖水消耗、體重增量、以及強迫游泳和懸尾不動時間;慢性束縛浸水應激誘導的大鼠海馬小膠質細胞極化;與應激組相比,Apelin-13抑制下調大鼠海馬小膠質細胞i NOS、IL-1β和IL-6的蛋白表達,而促進了大鼠海馬小膠質細胞Arg1、IL-4和IL-10的蛋白表達;Apelin-13抑制Iba-1與i NOS的共定位表達,而促進Iba-1與Arg1的共定位表達。與空白對照組比較,N9小膠質細胞LPS組Arg1的蛋白表達顯著降低,i NOS的蛋白表達顯著增加,而給予Apelin-13處理后,Arg1的蛋白表達顯著增加,而i NOS的蛋白表達明顯降低�！窘Y論】Apelin-13改善慢性應激誘導大鼠抑郁樣行為,其機制可能與調控小膠質細胞極化有關。
【圖文】：

曝光。2.10 實驗設計2.10.1 Apelin-13 對 CWIRS 誘導大鼠抑郁癥樣行為的影響大鼠在適應環(huán)境后（3-5 天），隨機分為四組：無應激生理鹽水組（Non stressed+ Vehicle 組），無應激 Apelin 組（Non stressed + Apelin 組），應激生理鹽水組（CWIRS + Vehicle 組）及應激 Apelin 組（CWIRS +Apelin 組）。應激組接受慢性浸水束縛應激（CWIRS）4 周，無應激組則不予應激。應激結束后，第二天所有實驗大鼠進行側腦室置管，手術后恢復 24 h。隨后連續(xù) 7 天四組均給予側腦室微注射生理鹽水（2 μL/只）或 Apelin-13 (3 μg/2μL/只)。給藥結束后，四組實驗大鼠均進行自發(fā)活動，強迫游泳，懸尾行為學檢測。

17圖 2 大鼠 CWIRS 與免疫熒光檢測流程圖2.10.3 Apelin-13 對 CWIRS 誘導大鼠海馬細胞因子表達的影響大鼠在適應環(huán)境后（3-5 天），隨機分為四組：無應激生理鹽水組（Non stressed+ Vehicle 組），無應激 Apelin 組（Non stressed + Apelin 組），應激生理鹽水組（CWIRS + Vehicle 組）及應激 Apelin 組（CWIRS +Apelin 組）。應激組接受慢性浸水束縛應激（CWIRS）4 周，無應激組則不予應激。應激結束后，第二天實驗大鼠進行側腦室置管，，手術后恢復 24 h。隨后連續(xù) 7 天四組均給予側腦室微注射生理鹽水（2 μL/只）或 Apelin-13 (2 μg/2μL/只)。大鼠給藥結束，待 24 h 后處死大鼠并取腦分離海馬。采用 Western blot 法分別檢測海馬內 M1 型標志分子iNOS 的蛋白表達及其促炎因子 IL-6，IL-1β 的蛋白表達與 M2 型標志分子 Arg1的蛋白表達及其抗炎因子 IL-4，IL-10 的蛋白表達。圖 3 大鼠 CWIRS 與 Western blot 檢測細胞因子流程圖2.10.4 Apelin-13 對 CWIRS 誘導大鼠海馬小膠質細胞極化的影響大鼠在適應環(huán)境后（3-5 天）
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R749.4

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