【摘要】：目的：研究一定濃度谷氨酸對(duì)PC12細(xì)胞的損傷作用，，同時(shí)觀察胍基丁胺對(duì)谷氨酸作用的影響，并初步探討胍基丁胺的作用機(jī)制。方法：采用MTT法觀察谷氨酸和胍基丁胺對(duì)PC12細(xì)胞活性的影響，熒光顯微鏡吖啶橙染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)特征，瓊脂糖凝膠電泳觀察細(xì)胞有無DNA斷裂，結(jié)合流式細(xì)胞儀定量檢測(cè)凋亡峰(AP)。結(jié)果：(1)MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：谷氨酸濃度在2.5-20mmol／L范圍內(nèi)能明顯抑制細(xì)胞活性，并呈濃度和時(shí)間依賴性(2)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)到DNA斷裂條帶。(3)以5mmol／L谷氨酸作用24h為損傷模型，用吖啶橙染色熒光顯微鏡觀察可見PC12細(xì)胞發(fā)生凋亡樣改變。(4)在損傷模型組中加入不同濃度的胍基丁胺，MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)胍基丁胺濃度在0.1mmol／L～5mmol／L范圍內(nèi)能明顯提高細(xì)胞活性。其中1mmol／L胍基丁胺+5mmol／L谷氨酸實(shí)驗(yàn)組在瓊脂糖凝膠電泳分析中沒有見到DNA梯形條帶：流式細(xì)胞儀檢測(cè)特凋亡峰，可見胍基丁胺能明顯下降損傷模型組的細(xì)胞凋亡率，并隨胍基丁胺的濃度加大，凋亡率隨之下降。 結(jié)論：較高濃度的谷氨酸有興奮毒性作用，細(xì)胞死亡機(jī)制主要為誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。胍基丁胺能明顯拮抗谷氨酸所致的PC12細(xì)胞凋亡，其 肌基丁胺對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡的影響中文摘要 機(jī)制可能和其非競(jìng)爭(zhēng)性阻斷谷氨酸的NMDA受體，減少鈣離子內(nèi)流， 以及改善線粒體功能和減輕谷氨酸的氧化毒性有關(guān)。
【圖文】：

一80120umo比均能明顯抑制DNA斷裂，0.1~ol幾肌基丁胺與損傷組相比無明顯改變(圖2一2)。A.MK一80120umol/L組B.肌基丁胺lrnrno比組C.肌基丁胺0.lmmo比組D.谷氨酸組E.正常細(xì)胞對(duì)照組E200bpDNA標(biāo)準(zhǔn)圖2一2各實(shí)驗(yàn)組對(duì)PC12細(xì)胞DNA斷裂的影響3流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡峰細(xì)胞破膜后，斷裂的DNA被釋放，DNA在組方圖上出現(xiàn)二倍體峰減少，GI峰左側(cè)出現(xiàn)亞二倍體細(xì)胞峰的峰群，即凋亡峰(Ap峰)。結(jié)果顯示不同劑量肌基丁胺0.1~of幾，1~ol幾，5~of幾均能明顯降低模型組即5~ol幾谷氨酸作用與細(xì)胞24h的凋亡率。結(jié)果如下。見表2一2，圖2一3
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R749.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2656128