發(fā)布時間：2020-04-22 15:52

【摘要】：阿爾茨海默病(Alzheimer’s Disease, AD)是導致老年人發(fā)生癡呆最常見的原因。它是指發(fā)生在老年期及老年前期的一種原發(fā)性退行性神經(jīng)系統(tǒng)疾病,它是一種持續(xù)性的高級神經(jīng)功能活動障礙,即在沒有意識障礙的狀態(tài)下,記憶、思維、分析判斷、視空間辨認、情緒等方面的障礙。隨著研究的進展,我們明確知道AD的標志性分子病理機制,即由β-淀粉樣蛋白(β-amyloid, Aβ)組成的斑塊和由過度磷酸化的Tau蛋白組成的纖維纏結(jié)。并且腦內(nèi)Aβ斑塊的數(shù)量與癡呆程度有密切關(guān)系。到目前為止,對于AD所致認知功能障礙的治療主要局限于改善癥狀及延緩疾病進程,尚無有效的藥物能夠大幅度提高認知功能及逆轉(zhuǎn)疾病進程。 用Aβ海馬注射造成Aβ沉積的AD模型在一定程度上模擬了AD的病理改變,即與神經(jīng)元相關(guān)的Aβ沉積,且出現(xiàn)了以記憶功能障礙為主的認知功能障礙。該模型對于AD的致病機制研究及尋求AD治療方法及藥物做出了巨大貢獻。多烯磷脂酰膽堿(Polyene Phosphatidyl Choline, PPC)是目前臨床上常用的肝病輔助治療藥物,它是指卵磷脂結(jié)構(gòu)中的甘油三酯骨架上不飽和脂肪酸鍵連接了二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和花生四烯酸(arachidonic acid ,AA)的磷脂酰膽堿。研究表明DHA對于Aβ毒性及Tau蛋白的磷酸化都有保護作用;AA對于衰老大鼠海馬神經(jīng)元的細胞膜的流動性具有保護作用,且有利于增加神經(jīng)突觸的可塑性。 基于以上的背景,本研究制備了AD大鼠模型,應(yīng)用多烯磷脂酰膽堿進行治療,通過水迷宮實驗觀察多烯磷脂酰膽堿對于AD模型大鼠的認知行為學改變的影響;并通過形態(tài)學及免疫組化染色觀察多烯磷脂酰膽堿對AD模型大鼠腦內(nèi)形態(tài)學改變、Aβ含量、膠質(zhì)細胞活化和突觸結(jié)構(gòu)改變的影響。進而評價其治療作用及可能的治療機制。為探討多烯磷脂酰膽堿對于AD的治療作用提供理論依據(jù)。 主要結(jié)果如下: 一、Morris水迷宮實驗行為學改變①定位航行實驗(記憶訓練測試):通過從四個象限位置找到隱匿于水面下平臺的時間來評價。PPC處理改善了Aβ灌注模型大鼠的記憶獲取能力。②空間探索實驗(記憶保留測試):通過對在曾經(jīng)放置平臺的象限內(nèi)游泳時間和游程分析來評價各組大鼠的空間探索能力。PPC處理Aβ模型大鼠可以改善其被損傷后記憶保留能力的降低。 二、海馬組織的尼氏形態(tài)學染色與正常對照組、假手術(shù)組比較,模型組針道處及灌注部位均顯示有明顯的尼氏體數(shù)量增加,并有明顯的神經(jīng)元缺失;PPC處理組與模型組比較,針道處及灌注部位尼氏體的數(shù)量明顯減少,神經(jīng)元缺失數(shù)量明顯減少。對各組選定區(qū)域尼氏體數(shù)量進行統(tǒng)計分析,與模型組比較,PPC處理組針道處及灌注部位尼氏體的數(shù)量明顯減少;與正常對照組比較,PPC處理組的尼氏體數(shù)量仍有顯著性增加。 三、海馬注射區(qū)Aβ免疫組化染色模型組與正常組比較,針道處及灌注部位有明顯的Aβ沉積,并有較多的神經(jīng)元壞死和缺失;PPC處理組與模型組比較,針道處及注射部位Aβ沉積明顯減少,且神經(jīng)元壞死和缺失區(qū)域明顯縮小。PPC處理組與正常對照組、假手術(shù)組比較,針道處及灌注部位有少量的Aβ沉積,并有少量的組織壞死區(qū)。 四、膠質(zhì)細胞活化改變大鼠海馬CA1區(qū)注射Aβ1-40后,可見注射區(qū)域星形膠質(zhì)細胞明顯增殖活化,表現(xiàn)為GFAP陽性星形膠質(zhì)細胞細胞顯著增多,胞體變大,突起增粗增長;PPC處理后注射區(qū)星形膠質(zhì)細胞活化情況減弱。注射區(qū)域小膠質(zhì)細胞明顯增殖活化,表現(xiàn)為免疫熒光性Iba1陽性小膠質(zhì)細胞細胞顯著增多,呈密集小顆粒狀;PPC處理后注射區(qū)小膠質(zhì)細胞活化情況減弱。 五、透射電鏡下突觸超微結(jié)構(gòu)變化正常大鼠海馬CA1區(qū)顯微結(jié)構(gòu)清晰,突觸結(jié)構(gòu)正常,突觸前膜、突觸后膜、突觸間隙及突觸小泡明顯可見;注射Aβ1-40后,CA1區(qū)顯微結(jié)構(gòu)模糊,正常突觸破壞,突觸小泡崩解消失;給予PPC后,混亂的CA1區(qū)顯微結(jié)構(gòu)恢復(fù)正常,可見明確的突觸前后膜、突觸間隙及突觸小泡。 綜上所述,我們的實驗證實了多烯磷脂酰膽堿從一定程度上減輕了β-淀粉樣蛋白灌注AD模型大鼠的行為學及形態(tài)學改變,并且有膠質(zhì)細胞和和突觸結(jié)構(gòu)的改變。我們的研究是首次將PPC這個臨床上治療肝病的藥物引入到AD的治療研究中。盡管PPC對于AD模型大鼠的治療作用具體是遵循何種機制目前還不清楚,但是從結(jié)果來看確實是對于AD有一定的治療和改善作用。PPC具體是是通過什么途徑減輕和逆轉(zhuǎn)AD的行為學及病理改變將會是一個很有研究意義的課題,在今后的研究中我們將會從進一步的神經(jīng)行為學,β-淀粉樣蛋白代謝通路、神經(jīng)元丟失、神經(jīng)免疫及神經(jīng)發(fā)生等機制等各個方面進一步闡述,以期為臨床治療AD提供進一步的理論和實驗依據(jù)。
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R749.16

【共引文獻】

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4 張振清;紅景天苷對Aβ_(1-40)所致AD實驗?zāi)Ｐ偷母深A(yù)作用及機制研究[D];河北醫(yī)科大學;2014年

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本文編號：2636678