發(fā)布時(shí)間：2020-04-19 06:39

【摘要】： 研究背景與目的 阿爾茨海默氏病(Alzheimer disease,AD)主要的病理學(xué)特征為腦內(nèi)(主要為海馬和皮層)細(xì)胞外淀粉樣蛋白(amyloid peptides)斑塊沉積、細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)(Neural fibrillary tangles,NFTs)以及神經(jīng)元丟失。其中β淀粉樣多肽(β-amyloid peptides,Aβ)的過(guò)量生成與沉積,被認(rèn)為是AD主要的發(fā)病機(jī)制之一。沉積的Aβ具有神經(jīng)毒性,可導(dǎo)致神經(jīng)元樹(shù)突和軸突萎縮,神經(jīng)元變性、死亡與丟失。因此,在體研究中通過(guò)Aβ多肽腦內(nèi)(包括側(cè)腦室、海馬)注射來(lái)建立AD模型,已被廣泛采用。AD的病因及其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,目前根據(jù)其發(fā)病的病理生理學(xué)特點(diǎn),臨床主要的藥物治療手段與方案都是著力于改善患者認(rèn)知功能障礙,阻止或延緩發(fā)病進(jìn)程。藥物治療措施可以起到一定的療效,但無(wú)法彌補(bǔ)中晚期患者大腦皮層及海馬神經(jīng)元的丟失,因而對(duì)于中晚期AD療效有限。對(duì)于AD這一以神經(jīng)元丟失為中晚期特征病變的神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變而言,神經(jīng)細(xì)胞移植被視為能從根本上解決細(xì)胞丟失的全新治療策略。 胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cells,ESCs)是從著床前胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離得到的細(xì)胞系,具有全能分化潛能、能夠在體外培養(yǎng)、無(wú)限增殖、易于基因操作而不失分化潛能。體外培養(yǎng)ES細(xì)胞的關(guān)鍵就是既要保持其快速分裂增殖能力,又要控制其未分化狀態(tài)。通過(guò)無(wú)血清培養(yǎng)法可維持ES的未分化狀態(tài)并且可獲得較高純度的神經(jīng)前體細(xì)胞(Neural precursor cells,NPCs)。NPCs既具有增殖分化潛能,又沒(méi)有直接移植ES細(xì)胞生成畸胎瘤的危險(xiǎn),故是較好的神經(jīng)移植材料。 諸多神經(jīng)細(xì)胞移植治療AD模型的研究中采用的種子細(xì)胞來(lái)源是自體或異體的神經(jīng)干細(xì)胞,但是卻面臨移植材料、種子細(xì)胞來(lái)源匱乏以及倫理學(xué)等限制。目前尚沒(méi)有關(guān)于使用ES細(xì)胞來(lái)源的神經(jīng)細(xì)胞移植治療AD模型的研究報(bào)道。而且目前國(guó)內(nèi)外研究中使用Aβ海馬注射來(lái)建立AD大鼠模型,多數(shù)著重于Aβ在體神經(jīng)毒性研究,包括組織病理學(xué)和行為學(xué)改變。而涉及細(xì)胞移植治療的相關(guān)研究中細(xì)胞移植途徑集中反映在側(cè)腦室注射,偶有海馬和皮質(zhì)細(xì)胞移植報(bào)道。側(cè)腦室范圍廣、易定位,手術(shù)難度小;但是側(cè)腦室移植后細(xì)胞會(huì)發(fā)生廣泛遷移,包括穹隆海馬傘、胼胝體、隔區(qū)、室管
【圖文】：

圖 1.大鼠 MORRIS 水迷宮行為測(cè)試系統(tǒng)示意圖D 模型大鼠的組織病理學(xué)鑒定： 周行 Morris 水迷宮行為學(xué)檢測(cè)后，部分模型大鼠以及生理剛果紅染色、尼氏染色、GFAP 免疫組化檢測(cè)。觀察 AD、神經(jīng)元丟失以及 Aβ1-40 注射區(qū)域的膠質(zhì)細(xì)胞增生和 A�？椀墓潭ǎ捍笫蠼�(jīng)戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，4℃生理鹽水脈灌注固定，取全腦。再以 4％多聚甲醛后固定過(guò)夜，進(jìn)醛配置）脫水直至組織塊沉底。色：10μm 冰凍切片裱片后自然風(fēng)干，ddH2O 稍浸潤(rùn)后梯蘇木素染液 3min.，自來(lái)水漂洗玻片干凈，，入 1%鹽酸乙醇條帶清晰則自來(lái)水終止分化。再入 1%剛果紅水溶液浸染

NS 注射對(duì)照組大鼠尋找平臺(tái)軌跡分布 Aβ注射組大鼠尋找平臺(tái)軌跡分布圖 2. 定位航行試驗(yàn)中大鼠尋找平臺(tái)軌跡分布示意圖比較（第九段第 4 次測(cè)試）NS 注射對(duì)照組大鼠探索軌跡分布 Aβ注射組大鼠探索軌跡分布圖 3. 空間探索試驗(yàn)中撤除平臺(tái)后大鼠探索軌跡分布示意圖比較大鼠Morris水迷宮空間探索試驗(yàn)14
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R749.16

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2633043