【摘要】： 目的 通過研究血管性癡呆大鼠海馬谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體Glast的表達(dá)變化，以探討谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體Glast與血管性癡呆的關(guān)系。 方法 ①采用Morris水迷宮篩選空間學(xué)習(xí)記憶能力正常的6月齡雄性SD大鼠60只，將其分為2組，假手術(shù)對(duì)照組(Sham)和癡呆模型組(VD)，采用結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈法制作大鼠血管性癡呆模型； ②造模六周后，再通過Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變，確定造模成功后，處死取材； ③運(yùn)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)海馬Glast蛋白的表達(dá)，比較癡呆組和假手術(shù)對(duì)照組海馬Glast表達(dá)的改變； ④運(yùn)用原位雜交和半定量RT-PCR法檢測(cè)大鼠海馬Glast mRNA的表達(dá)，比較癡呆組和假手術(shù)對(duì)照組Glast mRNA表達(dá)的位置及量的改變。 結(jié)果 ①M(fèi)orris水迷宮實(shí)驗(yàn)：雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎六周后，定位航行實(shí)驗(yàn)表明手術(shù)組與對(duì)照組相比，平均逃避潛伏期以及搜索策略的總成績(jī)明顯增加，說明模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降； ②與假手術(shù)組相比，癡呆大鼠的免疫組化結(jié)果顯示GLAST陽性面積減少、平均灰度值升高。 ③血管性癡呆大鼠海馬Glast mRNA原位雜交和RT-PCR的結(jié)果與假手術(shù)對(duì)照組相比無顯著差別； 結(jié)論 ①雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎可以建立穩(wěn)定的血管性癡呆模型； ②血管性癡呆大鼠海馬Glast的表達(dá)變化主要在蛋白水平，在mRNA水平變化不大；谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體Glast的表達(dá)變化可能參與了血管性癡呆的發(fā)生。
【圖文】：

Morris水迷宮行為學(xué)方法共篩選出56只學(xué)習(xí)記憶能力相當(dāng)?shù)拇笫�。雙側(cè)頸總扎后出現(xiàn)體溫降低，呼吸減慢;術(shù)后早期觀察大鼠運(yùn)動(dòng)減少，走路共濟(jì)失調(diào)，行和轉(zhuǎn)圈;術(shù)中麻醉過深死亡2只，術(shù)后死亡4只。術(shù)后2周已基本恢復(fù)，無明動(dòng)障礙。模型制作6周后，對(duì)照組18只，模型組32只。行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)后6周，假手術(shù)對(duì)照組和手術(shù)組的平均逃避潛伏期和探索成績(jī)均隨學(xué)習(xí)次數(shù)的增加而縮短。每組內(nèi)潛伏期和總成績(jī)均數(shù)經(jīng)單因素方差差異無顯著意義(P>0.05);組間比較有顯著性差異(P<0.05)，，說明實(shí)驗(yàn)組功能明顯受損，癡呆模型成功建立。假手術(shù)對(duì)照組術(shù)后6周平均逃避潛伏期為143125士2.813291)See和探索路徑總成績(jī)?yōu)?245.5688士64.98195)，手術(shù)6周平均逃避潛伏期為(22.88313士3.26673)See和探索路徑總成績(jī)(307.38.28516)。

RT一PCR法研究GlastmRNA表達(dá)的變化PCR法研究癡呆大鼠海馬GlastmRNA表大鼠和癡呆后大鼠的GlastmRNA表達(dá)相對(duì)在癡呆組大鼠中，GlastmRNA的表達(dá)水平異未見有顯著性(P>0.05)。SV
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R749.16

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本文編號(hào)：2632233