【摘要】： 目的 隨著人類期望壽命的延長，人口老齡化和癡呆的發(fā)病率呈上升趨勢。老年期癡呆不僅是個體疾病，而且因其帶來的巨大社會負擔(dān)，也成為一個重要的社會公共問題。阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是老年期癡呆的一個重要類型，，AD是一種原發(fā)變性型老年性癡呆，其特點是發(fā)病年齡較早，多在65歲以前，故又稱為早老性癡呆，病程進展緩慢，主要表現(xiàn)為近期記憶力明顯減退，在神經(jīng)化學(xué)方面，往往多種神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)受損。發(fā)達國家對此病的研究較早，也較深入。我國對老年期癡呆的研究也已取得了一定的成果。 AD最早病變主要是海馬病變所致記憶缺損，接著是大腦皮層病變，不僅導(dǎo)致記憶惡化，而且其他認知功能如語言、空間結(jié)構(gòu)能力亦受到損害。關(guān)于AD的病理機制，目前較為明確的是：(1)基底前腦核群內(nèi)乙酰膽堿(acetylcholine，Ach)能神經(jīng)元的變性和丟失；(2)患者腦內(nèi)形成神經(jīng)元纖維纏結(jié)(Neurofibrillary tangle，NFT)；(3)新皮質(zhì)和海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)出現(xiàn)大量的淀粉樣沉積，其數(shù)量的多寡與AD的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。建立一個可靠的AD動物模型是研究AD的重要前提，建立AD動物模型的方法很多，各有其優(yōu)缺點，迄今為止尚無一種公認的最理想的方法。這里我們選取了離斷穹隆海馬傘通路來建立AD模型，此種方法主要是通過切斷隔-海馬通路，破壞膽堿能及非膽堿能纖維傳入，導(dǎo)致實驗動物行為及神經(jīng)化學(xué)方面的缺損，造成動物空間定向和記憶障礙及膽堿能神經(jīng)元的丟失。 泛素是一種相對分子質(zhì)量為8，565的小分子熱休克蛋白，由76個氨基酸組成，由多泛素基因和單泛素融合基因編碼，它僅存在于真核生物中，蛋白結(jié)構(gòu)在不同物種之間差異很小。泛素是ATP依賴性溶酶體外蛋白降解 系統(tǒng)的啟動信號，主要降解正常的短時效蛋白和異常蛋白。通過泛素途徑 降解的底物蛋白至少具備2個條件：氨基酸N末端和賴氨酸殘基。泛素被 活化酶激活后，傳遞給泛素結(jié)合酶，并通過泛素連接酶與底物蛋白結(jié)合，而 后在26s蛋白酶體的作用下降解。泛素分子之間通過48位賴氨酸連接形 成的多泛素鏈?zhǔn)菃拥鞍捉到獾谋匾獥l件。 蛋白激酶Chrotein kinase C，PKC）是廣泛分布于真核細胞特別是哺 乳動物細胞中的一種蛋白激酶，是由多種同工酶組成的蛋白質(zhì)家族，它們的 結(jié)構(gòu)相似，但各具有不同的生化特性及生理功能。通過分子克隆方法證明， PKC不是單一分子的酶，而是一組密切相關(guān)的有多種亞型的蛋白質(zhì)家族。 PKC有多種亞型，各亞型顯示了不同的酶學(xué)特性及不同的組織表達和特定 的細胞酶定位。目前已明確在動物組織中有12種亞型，且已分組并命名。 膠質(zhì)細胞源性的神經(jīng)營養(yǎng)因子（glial cell line－derived llltrOPhiC faC－ tor，GDNF）是一種強的神經(jīng)營養(yǎng)因子，可以增進中腦多巴胺能神經(jīng)元的存 活。GDNF是一種糖基化的二硫鍵同二聚體，是轉(zhuǎn)化生長因子叭（TG p）超 家族的遠親。GDNF含有7個保守的半腕氨酸殘基，與TGF 6超家族的所 有成員有同樣的相對空間特點。胚胎中腦培養(yǎng)，GDNF促進多巴胺能神經(jīng) 元的存活和形態(tài)學(xué)分化，并能增強對多巴胺攝取的高親和性。 絲裂原激活蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）是80年 代末期在研究生長因子受體磷酸化產(chǎn)物時發(fā)現(xiàn)的一類絲／蘇氨酸蛋白激酶。 可被生長因子、細胞因子、激素、神經(jīng)遞質(zhì)、細胞應(yīng)激等廣泛刺激激活，不僅 在細胞增殖中起中心作用，還在細胞分化、發(fā)育、凋亡、惡性轉(zhuǎn)化中扮演重要 角色。在哺乳動物中，MAPK包括 5個亞類：即胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶hxtra cellular。吵ated protein kinase，ERK）上－inn氨基末端激酶（Jun N－te而－ nal kinase，hKXp38上RK3／4上。這些激酶的信號通路具有高度保守 性，即都經(jīng)3個關(guān)鍵激酶通過級聯(lián)信號將胞外刺激傳遞到胞核，通過磷酸化 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)細胞功能。不同的激酶也有相對獨立的信號通路，作用于不 同的底物介導(dǎo)不同的細胞效應(yīng)。 ERK通刪究最早最深人，ERK包括兩個高度同源的亞類ERKI和 ERKZ。胞外刺激可經(jīng)G蛋白受體、生長因子受體和酪氨酸蛋白激酶受體， 經(jīng) Raf一MEK－ERK級聯(lián)信號激活 ERK，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子（女 Elki、AWl、C－ MyC、STAT等）和一些激酶活性，促進細胞增殖，蛋白質(zhì)的合成。 ·2· 我們檢測了穹隆海馬傘切斷大鼠海馬的 PKC，ERK和 GDNF水平，進 而探討它們之間的關(guān)系，對研究A／D的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制有一定的意義。并希 望通過干預(yù)不同信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為人。D治療提供新的思路和途徑。 材料和方法 1．用腦立體定位儀建立穹隆海馬傘切斷AD大鼠模型，用Y型迷宮對 大鼠進行學(xué)習(xí)和記憶觀察。 2．應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測泛素在大鼠腦中的分布。 3．應(yīng)用同位素檢測了大鼠海馬PKC和ERK的活性。 4．應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)，檢測了大鼠海馬泛素、GDNF和ERK的水平。 5，應(yīng)用RT－PCR技術(shù)檢測了大鼠海馬的ERKZ表達。 結(jié) 果 1．Y型迷宮測試大鼠行為學(xué)顯；示假手術(shù)組和正常對照組大鼠迷宮學(xué)習(xí) 記憶
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R749.16

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 徐勇,黃頌敏;MAPK家族與糖尿病并發(fā)癥[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;2001年01期

2 劉凌志;肺疾病中有關(guān)蛋白激酶C的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊;1999年04期

3 錢亦華,胡海濤;建立Alzheimer病動物模型的方法[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;1999年01期

4 李翠風(fēng);老年性癡呆與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J];生命的化學(xué);2000年06期

5 蔡圣蕓,肖林,邱儉,倪鑫,陳宜張;雌激素的神經(jīng)保護作用[J];生命的化學(xué);2001年02期

6 張璐,張琳,姜勇,趙克森;絲裂原激活蛋白激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在細胞凋亡中的作用[J];生命的化學(xué);1998年04期

7 張璐,姜勇,張琳;絲裂素活化蛋白激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);1999年02期

8 張巍,袁云,陳清棠;運動神經(jīng)元病的病理進展和泛素陽性包涵體[J];中華神經(jīng)科雜志;2001年05期

本文編號：2592553