β-淀粉樣肽寡聚體的制備及鑒定
發(fā)布時(shí)間:2018-03-26 23:01
本文選題:阿爾茲海默癥 切入點(diǎn):β-淀粉樣肽 出處:《生物技術(shù)》2015年06期
【摘要】:[目的]制備β-淀粉樣肽(amyloid-βpeptide,Aβ)的可溶性寡聚體。[方法]選取化學(xué)合成的Aβ25-35、Aβ1-42及對(duì)照肽Aβ35-25,體外37℃孵育7 d制備Aβ寡聚體。采用dot blotting,免疫印跡鑒定Aβ的聚集狀態(tài);并通過TUNEL法檢測(cè)Aβ的神經(jīng)毒性。[結(jié)果]經(jīng)dot blotting和免疫印跡檢測(cè),顯示本研究制備獲得的Aβ25-35和Aβ1-42均為寡聚體,且Aβ25-35寡聚體的分子量以2 kDa、3 kDa和17 kDa為主,Aβ1-42分子量主要為4kDa和8kDa,而對(duì)照肽Aβ35-25并不能形成寡聚體。TUNEL法則顯示Aβ25-35寡聚體可以引起SH-SY5Y細(xì)胞凋亡。[結(jié)論]在體外成功建立制備Aβ寡聚體的方法,且通過形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)該Aβ有神經(jīng)毒性,為后續(xù)研究阿爾茲海默癥的致病機(jī)制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
[Abstract]:[objective] to prepare the soluble oligomers of amyloid- 尾 peptideA 尾. [methods] A 尾 -amyloid- 尾 -peptideA 尾 _ 1-42 and A 尾 _ (35-25), a 尾 -amyloid peptide, were prepared by incubating at 37 鈩,
本文編號(hào):1669963
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