本文關(guān)鍵詞：THP-1細(xì)胞中miRNA-223、miRNA-15a和miRNA-16膿毒癥相關(guān)靶基因驗(yàn)證

  更多相關(guān)文章： 膿毒癥 miRNA-223 miRNA-15a miRNA-16 FOXO1 ACVR2A

【摘要】：目的：膿毒癥(Sepsis)是感染導(dǎo)致的全身炎癥反應(yīng)綜合征,病情發(fā)展快、預(yù)后差、病死率高,是臨床面對(duì)的重要問(wèn)題和研究熱點(diǎn)。我們通過(guò)生物信息學(xué)技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)：FOXO1和ACVR2A可能是在膿毒癥患者生存組和死亡組差異表達(dá)的miRNA-223、miRNA-15a和niRNA-16的靶基因。本課題選擇THP-1細(xì)胞系驗(yàn)證上述推論,為后續(xù)信號(hào)通路研究奠定基礎(chǔ)。方法：(1)用LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞后,采用qRT-PCR檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)(Oh、12h、 24h、48h、72h)三種miRNAs和(Oh、24h、48h、72h)兩種靶基因mRNAs表達(dá)水平變化情況；(2)將miRNAs模擬物、抑制物轉(zhuǎn)染THP-1細(xì)胞48h后,采用qRT-PCR檢測(cè)各轉(zhuǎn)染組相應(yīng)miRNAs含量變化情況；(3)采用qRT-PCR和Western Blot分別檢測(cè)miRNAs模擬物、抑制物轉(zhuǎn)染THP-1細(xì)胞48h后FOXO1和ACVR2A的：mRNAs和蛋白表達(dá)變化情況。結(jié)果：(1)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞后,miRNA-223/15a/16表達(dá)量均逐漸減少,在24h-48h達(dá)到最低點(diǎn),72h時(shí)恢復(fù)至接近Oh水平,三種miRNAs在12h、24h、48h的表達(dá)量與各自O(shè)h的表達(dá)量的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),miRNA-223在72h的表達(dá)量高于其Oh的表達(dá)量且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),miRNA-15a和miRNA-16在72h的表達(dá)量與各自O(shè)h的表達(dá)量相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；靶基因FOXO1和ACVR2A的mRNAs表達(dá)量則逐漸升高,在48h達(dá)到最高點(diǎn)后逐漸減少,兩種目的基因nRNAs目對(duì)含量在24h、48h、72h的相對(duì)表達(dá)量均高于各自O(shè)h的表達(dá)量,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(2)THP-1細(xì)胞按分組分別轉(zhuǎn)染miRNA-223/15a/16模擬物后,M-223/15a/16組與模擬物對(duì)照組相比相應(yīng)的miRNA含量均明顯增加,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);M-223/15a/16組FOXO1的mRNA水平和編碼蛋白表達(dá)量均明顯低于模擬物對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)：M-223/15a/16組ACVR2A的mRNA水平均低于模擬物對(duì)照組且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),而ACVR2A編碼蛋白表達(dá)量與模擬物對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P0.05)。(3)按分組分別轉(zhuǎn)染miRNA-223/15a/16抑制物后,I-223/15a/16組與抑制物對(duì)照組相比相應(yīng)的miRNA含量均明顯減少,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；I-223/15a/16組FOXO1的mRNA水平和編碼蛋白表達(dá)量均明顯高于抑制物對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；I-223/15a/16組ACVR2A的mRNA水平均高于抑制物對(duì)照組且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),而ACVR2A編碼蛋白表達(dá)量與抑制物對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論：在THP-1細(xì)胞系中,miRNA-223、miRNA-15a和miRNA-16能夠調(diào)控FOXO1基因的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：膿毒癥 miRNA-223 miRNA-15a miRNA-16 FOXO1 ACVR2A
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R459.7
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 第一章 前言11-15
• 第二章 儀器設(shè)備和試劑耗材15-19
• 第一節(jié) 儀器設(shè)備15-16
• 第二節(jié) 試劑耗材16-19
• 第三章 實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)步驟19-31
• 第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-39
• 第五章 討論39-43
• 第六章 結(jié)論43-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 文獻(xiàn)綜述49-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況59-61
• 致謝61

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 閻錫新;劉威威;李帥;;膿毒癥發(fā)病機(jī)制及集束化治療[J];臨床薈萃;2007年22期

2 常文秀;張金鐘;曹書(shū)華;;膿毒癥研究的綜合思路[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(臨床決策論壇版);2007年09期

3 幸澤茂;盧君強(qiáng);;膿毒癥臨床治療的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年06期

4 康焰;;膿毒癥的現(xiàn)代診斷與治療[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2009年02期

5 楊樂(lè);鄒曉靜;李樹(shù)生;萬(wàn)磊;姚尚龍;楊光田;;膿毒癥心肌抑制研究進(jìn)展[J];內(nèi)科急危重癥雜志;2010年01期

6 李文亮;張錦;;膿毒癥休克患者免疫細(xì)胞變化與疾病演變及預(yù)后關(guān)系的研究[J];中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志;2010年04期

7 張娜;謝淑霞;林廣裕;;兒科常見(jiàn)嚴(yán)重病毒性膿毒癥的發(fā)病機(jī)制及其治療進(jìn)展[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2010年18期

8 楊斌;文雅;;惡性腫瘤患者并發(fā)膿毒癥39例臨床分析[J];中國(guó)藥物與臨床;2011年10期

9 段青和;萬(wàn)艷;詹福壽;;經(jīng)皮腎鏡碎石取石術(shù)后尿膿毒癥休克的診治體會(huì)[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)工程;2012年01期

10 伏曉琳;劉曉義;魯彥;郭雅瓊;李宏寶;周榮;;糖調(diào)節(jié)蛋白78在膿毒癥損傷心肌中表達(dá)的意義[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2012年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 任海波;許衛(wèi)江;;膿毒癥休克治療進(jìn)展[A];第三屆重癥醫(yī)學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2009年

2 鄭江;;天然藥物拮抗膿毒癥的研究進(jìn)展[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

3 金鳳衿;;輸新鮮血治療膿毒癥休克3例[A];2000年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2000年

4 馬中富;;膿毒癥[A];2009年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

5 岳茂興;;嚴(yán)重外科膿毒癥的診斷和臨床救治進(jìn)展[A];第五屆全國(guó)災(zāi)害醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨常州市醫(yī)學(xué)會(huì)急診危重病及災(zāi)害醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)首屆年會(huì)學(xué)術(shù)論文集[C];2009年

6 劉長(zhǎng)文;;膿毒癥機(jī)體發(fā)生了什么?[A];2009年浙江省危重病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

7 何聰;趙鶴齡;;不同藥物對(duì)膿毒癥休克大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合酶及內(nèi)皮素、腎臟細(xì)胞凋亡的影響[A];第三屆重癥醫(yī)學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2009年

8 莫紹春;馬春林;;淺談膿毒癥休克的中醫(yī)藥治療[A];首屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合重癥醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)重癥醫(yī)學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2010年

9 方宇;周鋼橋;王志富;馮凱;羅志毅;龐偉;李壘;凌焱;李玉霞;劉保池;;髓樣分化因子88基因多態(tài)性與中國(guó)人群膿毒癥易感性的研究[A];第六屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合災(zāi)害醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議學(xué)術(shù)論文集[C];2010年

10 劉旭;張_g;;膿毒癥心功能變化及其監(jiān)測(cè)的研究進(jìn)展[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合危重病、急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 本報(bào)記者 徐述湘;膿毒癥診療研究期待突破[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門(mén)醫(yī)院急診科;基于四個(gè)環(huán)節(jié)辨治膿毒癥[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

3 特約記者 石諳丁;小兒膿毒癥抗菌要領(lǐng)(三)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2011年

4 顧泳 肇暉 周霄 賴(lài)鑫琳;方邦江：急診“快郎中”[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2014年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄔明;MicroRNA-23b調(diào)節(jié)膿毒癥血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)及在膿毒癥患者外周血白細(xì)胞的表達(dá)[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 陳軍;腹腔開(kāi)放療法治療腹腔感染伴腹腔間隙綜合征肝功能損害的研究[D];南京大學(xué);2009年

3 曾紅科;膿毒癥預(yù)后預(yù)測(cè)指標(biāo)的篩選及小檗堿和育亨賓合劑對(duì)它們的影響[D];暨南大學(xué);2009年

4 陳全福;益氣活血法治療膿毒癥相關(guān)心肌抑制的臨床及實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2010年

5 藺靜;膿毒癥大鼠骨骼肌蛋白高分解代謝的蛋白質(zhì)組研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

6 周靜;細(xì)菌脂蛋白耐受對(duì)膿毒癥小鼠心功能保護(hù)作用的機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

7 楊聞;法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)膿毒癥小鼠免疫功能及預(yù)后影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2012年

8 張耀宗;骨骼對(duì)膿毒癥的影響及相關(guān)機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

9 張麗娜;膿毒癥相關(guān)性腦病的臨床及基礎(chǔ)研究[D];中南大學(xué);2012年

10 張輝;兒童重癥監(jiān)護(hù)病房中膿毒癥及膿毒癥急性腎臟損傷的臨床研究[D];中南大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林國(guó);烏司他丁預(yù)處理對(duì)膿毒癥大鼠肝組織基因表達(dá)及相關(guān)通路的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 胥朵;膿毒癥大鼠腸組織IL-6/STAT3信號(hào)通路對(duì)HMGB1表達(dá)的調(diào)控作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 張振飛;乙酰膽堿及M型乙酰膽堿受體在膿毒癥大鼠心肌損傷中的作用研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

4 趙利;HO-1在膿毒癥大鼠肺組織中的表達(dá)及意義[D];石河子大學(xué);2015年

5 崔雷;低分子肝素對(duì)膿毒癥大鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響[D];石河子大學(xué);2015年

6 夏為;ICU膿毒癥患者臨床特征及死亡相關(guān)因素分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 張力;左西孟旦對(duì)嚴(yán)重膿毒癥及膿毒癥休克心肌抑制患者心功能的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 朱永蒙;胸腺五肽對(duì)膿毒癥大鼠腎損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

9 趙志銳;THP-1細(xì)胞中miRNA-223、miRNA-15a和miRNA-16膿毒癥相關(guān)靶基因驗(yàn)證[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

10 李小雙;地塞米松對(duì)膿毒癥小鼠CD11b~+Gr-1~+髓源抑制性細(xì)胞的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：985221