嚴(yán)重?zé)齻笫笱鍖?duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的影響及初步機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞:嚴(yán)重?zé)齻笫笱鍖?duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的影響及初步機(jī)制研究
更多相關(guān)文章: 嚴(yán)重?zé)齻?/b> 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 微管 遷移 PI3K/Akt信號(hào)通路
【摘要】:第一部分嚴(yán)重?zé)齻笫笱鍖?duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖、遷移能力的影響目的:用嚴(yán)重?zé)齻笫笱迮囵B(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),模擬燒傷后的體內(nèi)環(huán)境,觀察嚴(yán)重?zé)齻笫笱鍖?duì)BMSCs增殖、遷移能力的影響。方法:建立嚴(yán)重?zé)齻笫竽P?并制備嚴(yán)重?zé)齻蟠笫笱濉?shí)驗(yàn)分組:正常培養(yǎng)組(含10%胎牛血清)、燒傷血清組(含10%燒傷大鼠血清),MTT法檢測(cè)各組BMSCs增殖能力;Transwell小室檢測(cè)燒傷組不同時(shí)間點(diǎn)BMSCs遷移情況。結(jié)果:燒傷血清處理24h后,BMSCs增殖比正常培養(yǎng)組快(P0.01);燒傷血清作用0、1、3、6、12、24 h時(shí),BMSCs細(xì)胞遷移數(shù)量分別為0、1.0±0.7、14.6±4.6、45.0±6.4、82.8±8.3、122.2±11.4個(gè),3 h時(shí)BMSCs出現(xiàn)遷移增多,6、12、24h時(shí)BMSCs遷移數(shù)量多于3h(P0.01)。結(jié)論:嚴(yán)重?zé)齻笫笱鍖?duì)BMSCs增殖和遷移有促進(jìn)作用。第二部分嚴(yán)重?zé)齻笫笱逄幚砗蟠笫蠊撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞的p38和Akt磷酸化水平變化目的:觀察嚴(yán)重?zé)齻笫笱逄幚砗蠊撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)胞內(nèi)的p38和Akt磷酸化水平變化。方法:建立嚴(yán)重?zé)齻笫竽P?制備燒傷后大鼠血清。用體積分?jǐn)?shù)10%的嚴(yán)重?zé)齻笫笱宕碳MSCs不同時(shí)間后,Western blot檢測(cè)BMSCs內(nèi)磷酸化p38(p-p38)和磷酸化Akt (p-Akt)表達(dá)水平。結(jié)果:燒傷血清作用0、1、3、6、12、24 h時(shí),BMSCs胞內(nèi)p-p38表達(dá)分別為1.02±0.50、1.11±0.17、1.04±0.23、1.02±0.20、1.16±0.22、1.0±0.19,在各時(shí)間點(diǎn)p-p38蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)不明顯,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而p-Akt表達(dá)分別為0.59±0.08、0.65±0.06、0.83±0.22、1.10±0.21、1.22±0.19、1.62±0.30,6、12、24 h時(shí)p-Akt蛋白表達(dá)較作用O h時(shí)(加入血清后即刻)水平明顯增高(P0.05);12、24 h時(shí)較3 h時(shí)明顯增高(P0.05)。結(jié)論:嚴(yán)重?zé)齻笫笱蹇稍龈連MSCs的Akt磷酸化水平。第三部分嚴(yán)重?zé)齻笫笱宕龠M(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的機(jī)制探討目的:探討PI3K/Akt信號(hào)通路在嚴(yán)重?zé)齻笫笱宕龠M(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)遷移中的作用。方法:實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為4組:正常培養(yǎng)組(含10%胎牛血清)、燒傷血清組(含10%嚴(yán)重?zé)齻笫笱?、燒傷血清+抑制劑組(含10%嚴(yán)重?zé)齻笫笱?10μmol/L的LY294002)、燒傷血清+激動(dòng)劑組(含10%嚴(yán)重?zé)齻笫笱?200 ng/mL的IGF-1), Transwell小室檢測(cè)各組BMSCs的遷移情況;激光共聚焦顯微鏡觀察各組BMSCs微管結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果:各組培養(yǎng)24 h后,燒傷血清組BMSCs微管結(jié)構(gòu)出現(xiàn)解聚,細(xì)胞遷移數(shù)量較正常培養(yǎng)組增多(P0.01)。與燒傷血清組比較,燒傷血清+激動(dòng)劑組BMSCs微管結(jié)構(gòu)解聚增多,細(xì)胞遷移數(shù)量增多(P0.01),燒傷血清+抑制劑組細(xì)胞微管結(jié)構(gòu)變化不明顯,但BMSCs遷移數(shù)量明顯減少(P0.01)。結(jié)論:嚴(yán)重?zé)齻笫笱蹇纱龠M(jìn)BMSCs遷移,可能與燒傷血清中細(xì)胞因子IGF-1激活PI3K/Akt信號(hào)通路相關(guān),進(jìn)而引起B(yǎng)MSCs微管結(jié)構(gòu)變化,促進(jìn)BMSCs遷移。
【關(guān)鍵詞】:嚴(yán)重?zé)齻?/strong> 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 微管 遷移 PI3K/Akt信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R644
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對(duì)照5-6
- 中文摘要6-9
- 英文摘要9-15
- 前言15-19
- 參考文獻(xiàn)17-19
- 第一部分 嚴(yán)重?zé)齻笫笱鍖?duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖、遷移能力的影響19-24
- 1 材料與方法19-21
- 2 結(jié)果21-23
- 3 討論23-24
- 第二部分 嚴(yán)重?zé)齻笫笱逄幚砗蟠笫蠊撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞的p38和Akt磷酸化水平變化24-31
- 1 材料與方法24-28
- 2 結(jié)果28-29
- 3 討論29-31
- 第三部分 嚴(yán)重?zé)齻笫笱宕龠M(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移的機(jī)制探討31-38
- 1 材料與方法31-33
- 2 結(jié)果33-35
- 3 討論35-38
- 全文小結(jié)38-39
- 參考文獻(xiàn)39-43
- 文獻(xiàn)綜述43-51
- 參考文獻(xiàn)47-51
- 致謝51-52
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文52
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,本文編號(hào):971943
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