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外源性NGAL對膿毒癥大鼠急性腎損傷的腎保護作用及機制

發(fā)布時間:2017-08-23 19:47

  本文關(guān)鍵詞:外源性NGAL對膿毒癥大鼠急性腎損傷的腎保護作用及機制


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【摘要】:目的:探討中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)對大鼠膿毒癥急性腎損傷有無保護作用及其相關(guān)機制。 方法:通過盲腸結(jié)扎穿孔法制備經(jīng)典膿毒癥大鼠急性腎損傷模型(CLP),將30只SD雄性大鼠隨機分為假手術(shù)組(A組)、CLP+生理鹽水(B組)、CLP+NGAL (C組),每組10只。取造模前(0h)、造模后24h大鼠靜脈血,用于檢測血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;造模24h后處死所有大鼠,取右側(cè)腎組織制作病理切片,采用蘇木精-伊紅(H-E)染色,觀察腎臟形態(tài)學(xué)變化;免疫組織化學(xué)染色檢測B細胞淋巴瘤/白血病-2相關(guān)X蛋白(Bax)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表達;末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(shù)(TUNEL)染色觀察腎組織內(nèi)細胞凋亡的情況。取左側(cè)腎組織制備組織勻漿,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定脂質(zhì)氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。 結(jié)果:組內(nèi)比較,B、C組24h肌酐及尿素氮水平較Oh升高明顯,P0.05;組間比較,B、C組24h的肌酐及尿素氮水平較A組升高明顯,P0.05,C組肌酐及尿素氮升高水平明顯低于B組,P0.05。H-E染色觀察下,B組腎損傷最明顯,C組腎損傷情況較B組明顯減輕。免疫組化結(jié)果顯示A組Caspase-3和Bax蛋白陽性表達率分別為(0.43±0.25)%、(1.37±1.1)%,C組分別為(7.32±2.04)%、(22.26±2.20)%,均顯著低于B組的(20.33±2.01)%、(49.2±8.55)%。TUNEL染色見A組腎臟組織偶見凋亡細胞,C組13.6±3.42個/高倍鏡視野,顯著低于B組的26.4±7.2個/高倍鏡視野(P0.05)。ELISA檢測結(jié)果顯示,A組及C組MDA含量明顯低于B組(P0.05),C組SOD含量明顯高于B組(P0.05)。 結(jié)論:外源性NGAL可能通過抑制Caspase-3的激活,降低促凋亡蛋白Bax的水平,減少細胞凋亡,同時抑制脂質(zhì)氧化,減輕組織損傷,起到保護腎臟的作用。圖7幅,表7個,參考文獻45篇。
【關(guān)鍵詞】:NGAL 急性腎損傷 Caspase-3 Bax MDA SOD
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R459.7
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-8
  • 目錄8-10
  • 符號說明10-11
  • 前言11-13
  • 第一部分 膿毒癥大鼠AKI模型的制作13-18
  • 1 材料與方法13-14
  • 1.1 實驗動物及主要試劑13
  • 1.2 動物分組及模型制備13
  • 1.3 標本采集13
  • 1.4 方法13-14
  • 1.5 統(tǒng)計學(xué)分析14
  • 2 結(jié)果14-16
  • 2.1 各組大鼠腎功能比較15-16
  • 2.2 各組大鼠腎組織病理學(xué)改變16
  • 3 討論16-17
  • 4 結(jié)論17-18
  • 第二部分 NGAL對膿毒癥急性腎損傷的作用研究18-27
  • 1 材料與方法18-20
  • 1.1 實驗動物及主要試劑18
  • 1.2 動物分組及模型制備18
  • 1.3 標本采集18-19
  • 1.4 方法19-20
  • 1.5 統(tǒng)計學(xué)分析20
  • 2 結(jié)果20-27
  • 2.1 各組大鼠腎功能比較20-22
  • 2.2 各組大鼠腎組織病理學(xué)改變22
  • 2.3 腎組織細胞凋亡情況22
  • 2.4 各組Caspase-3及Bax表達情況22-23
  • 2.5 各組大鼠MDA及SOD檢測結(jié)果23-27
  • 討論27-31
  • 結(jié)論31-32
  • 參考文獻32-36
  • 綜述36-47
  • 參考文獻43-47
  • 致謝47

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李瑞;謝志;劉江偉;錢建輝;錢若筠;張瓊;楊向新;楊帆;;COX-2在沙漠干熱環(huán)境創(chuàng)傷失血性休克大鼠肺組織中的表達及其與肺損傷的相關(guān)性研究[J];創(chuàng)傷外科雜志;2014年03期

2 劉一凡;;煙霧所致吸入性損傷的治療進展[J];臨床檢驗雜志(電子版);2013年03期

3 劉華杰;王平;沈云琳;李小兵;張儒舫;孫蕾;匡新宇;黃文彥;;中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白、腎損傷分子1和白介素18在診斷心肺分流術(shù)后急性腎損傷中的意義[J];臨床兒科雜志;2014年06期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 陶怡婷;血清NGAL和IL-8在心臟手術(shù)圍手術(shù)期AKI中的早期預(yù)測研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

2 唐蓮;右旋美托咪定對體外循環(huán)下雙瓣置換術(shù)患者術(shù)后腎功能的影響[D];中南大學(xué);2013年

3 麻慧;益氣活血解毒中藥對ALI/ARDS模型大鼠的預(yù)防作用及對凝血指標影響的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

4 文云娥;前列腺素E1治療急性腎小管損傷大鼠的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

5 孫華東;血清Klotho蛋白對心臟瓣膜置換術(shù)后急性腎損傷監(jiān)測的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

6 唐明敏;以AKIN標準診斷AKI探討sIL-6,uKim-1在心臟手術(shù)后AKI的早期預(yù)測研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年



本文編號:726966

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