發(fā)布時(shí)間：2017-07-16 19:17

  本文關(guān)鍵詞：復(fù)方苦參對內(nèi)毒素致兔急性呼吸窘迫綜合征保護(hù)作用機(jī)制的研究

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【摘要】：目的：急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是威脅人類健康的嚴(yán)重危重癥之一，其發(fā)病機(jī)理至今尚未闡明，病死率極高，為臨床亟待解決的一個(gè)主要課題。本實(shí)驗(yàn)以大腸桿菌內(nèi)毒素（其主要致病成分為脂多糖LPS）復(fù)制兔ARDS模型，通過觀察模型動(dòng)物病理生理及病理變化，探討內(nèi)毒素（ET）致傷機(jī)理及復(fù)方苦參的保護(hù)性作用，旨在為臨床提供理論參考。 方法：隨機(jī)將21只新西蘭白兔分為3組：對照組(A組)、致傷組(B組)和治療組(C組)，每組7只。實(shí)驗(yàn)前12h禁食、禁水，25%烏拉坦（4ml/kg）腹腔麻醉，分離左側(cè)頸動(dòng)脈，檢測生命體征和采集血液標(biāo)本，建立耳緣靜脈通道用于給藥。A組靜脈注射生理鹽水（4ml/kg），B、C兩組經(jīng)靜脈一次性注射LPS720ug/kg體重復(fù)制兔的ARDS模型，C組同時(shí)靜脈注射復(fù)方苦參注射液（4ml/kg）進(jìn)行干預(yù)治療。具體檢測指標(biāo)如下： 1.0h、0.5h、1h、2h、4h點(diǎn)記錄血壓、呼吸等生命體征； 2.0h、0.5h、1h、2h、4h點(diǎn)測量動(dòng)脈血?dú)猓?3.測定肺組織濕干重比; 4.光鏡下觀察各組動(dòng)物肺組織病理學(xué)改變； 5.免疫組化方法測定各組動(dòng)物肺組織髓樣細(xì)胞觸發(fā)性受體1（TREM-1）、髓過氧化物酶（MPO）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、細(xì)胞間粘附因子-1（ICAM-1）、水通道蛋白-1（AQP-1）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達(dá)。 結(jié)果： 1.A組在實(shí)驗(yàn)過程中各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)相對平穩(wěn)，三組間在實(shí)驗(yàn)前各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.生命體征測定： (1)呼吸：靜注LPS后，B組動(dòng)物出現(xiàn)呼吸急促，最快頻率約78次/分，0.5h變化最為顯著，之后呼吸頻率逐漸下降；C組亦出現(xiàn)先快后慢的變化趨勢。 (2)血壓：A組動(dòng)物在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中血壓維持在93mHg以上；B組在給LPS后0.5h，血壓明顯下降，明顯低于A組(P0.01)；C組實(shí)驗(yàn)后血壓亦呈下降趨勢，其各時(shí)點(diǎn)顯著低于A組但明顯高于B組。 (3)血?dú)夥治觯篈組動(dòng)物血?dú)夥治鲋稻谡７秶�，靜注LPS后，B組兔血PaO2及Pa02/Fi02顯著降低，0.5h為最低點(diǎn)，分別為55.23mmHg和258.7mmHg，符合ARDS診斷標(biāo)準(zhǔn)，之后隨著時(shí)間延長逐漸恢復(fù)。C組兔Pa02/Fi02值在0.5h點(diǎn)雖然有所下降，與A組比較有差異(P0.05)，但未達(dá)到ARDS診斷標(biāo)準(zhǔn)，仍部分高于B組(P0.01)。PaCO2在B組和C組均有下降。 3.實(shí)驗(yàn)4h后，B組肺組織濕/干比顯著高于A組(P0.01)，，C組明顯高于A組(P0.01)但低于B組(P0.05)； 4.肺組織光鏡下病理學(xué)檢查：A組肺泡結(jié)構(gòu)基本正常，肺泡腔內(nèi)無明顯出血、滲出等；B組可見肺泡間隔增厚、充血、肺水腫表現(xiàn)，肺泡腔變小，其內(nèi)可見紅染物質(zhì)滲出及散在蔟集的中性粒細(xì)胞粘壁、扣押，可見小灶性肺不張；C組肺泡間隔輕度增厚，肺泡腔較B組增大，炎細(xì)胞浸潤減少，肺泡淤血水腫減輕，肺損傷輕于內(nèi)毒素組。 5.免疫組化方法測定TREM-1表達(dá)結(jié)果：A組中未見明顯TREM-1表達(dá)；B組肺泡間隔、中性粒細(xì)胞可見大量深棕色顆粒；C組肺泡間隔、中性粒細(xì)胞可見深棕色顆粒較致傷組明顯減少。 6.免疫組化方法測定MPO表達(dá)結(jié)果：A組肺組織中MPO幾乎無表達(dá)；B組致傷組的陽性表達(dá)產(chǎn)物為棕黃色，多分布在肺泡壁、肺泡間隔及中性粒細(xì)胞的細(xì)胞膜中，C組中棕黃色產(chǎn)物減少。 7.免疫組化方法測定TNF-α表達(dá)結(jié)果：A組肺泡腔內(nèi)可見少許淡黃色片狀或顆粒狀產(chǎn)物輕度表達(dá)；致傷組陽性產(chǎn)物呈棕黃色或深棕色，多分布在肺組織的中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。C組陽性表達(dá)產(chǎn)物較B組減輕。 8.免疫組化方法測定ICAM-1表達(dá)的結(jié)果：A組正常肺組織中無明顯ICAM-1表達(dá)；B組致傷組ICAM-1明顯表達(dá),肺泡間隔、血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中均可見大量深棕色顆粒；C組可見數(shù)量不等的棕黃色顆粒，但數(shù)量較致傷組明顯減少。 9.免疫組化方法測定AQP-1表達(dá)結(jié)果：A組肺組織中無AQP-1表達(dá)；B組陽性產(chǎn)物呈棕黃色，主要在肺泡間隔及肺泡上皮細(xì)胞的胞漿中表達(dá)，C組肺泡腔中可見少許炎性細(xì)胞浸潤，棕黃色表達(dá)產(chǎn)物減少，AQP-1表達(dá)減弱。 10.免疫組化方法測定VEGF表達(dá)結(jié)果：A組肺組織中的VEGF水平處于低表達(dá)狀態(tài)；而B組肺組織中表達(dá)明顯，表達(dá)產(chǎn)物呈棕黃色，多分布于血管內(nèi)皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞的胞膜或胞漿中；C組肺泡間隔增厚減輕，棕黃色表達(dá)產(chǎn)物減少，VEGF表達(dá)減弱。 結(jié)果判定:不著色為陰性,淡黃色為弱陽性(+),深棕色為強(qiáng)陽性(+++),中度陽性介于弱陽性與強(qiáng)陽性之間(++)。 結(jié)論: 1.一次性靜脈注射LPS(720ug/kg)可以建立兔ARDS動(dòng)物模型。 2. ARDS時(shí)炎癥反應(yīng)失控，促炎反應(yīng)和抗炎反應(yīng)平衡失調(diào)。 3.內(nèi)毒素致傷組肺組織出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、炎性細(xì)胞浸潤、微循環(huán)障礙等一系列病理生理變化。 4.免疫組化方法測定TREM-1、MPO、TNF-α、ICAM-1、AQP-1、VEGF各項(xiàng)指標(biāo)在LPS致傷組均有明顯表達(dá)，在復(fù)方苦參注射液保護(hù)組表達(dá)較前減弱。 5.復(fù)方苦參具有抗炎、抗應(yīng)激、提高免疫力作用，對血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附具有抑制作用，通過降低內(nèi)皮細(xì)胞的通透性，維護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的完整性，對受損肺組織起一定的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：急性呼吸窘迫綜合征 內(nèi)毒素 免疫組化 苦參素
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563.8
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-15
• 材料和方法15-19
• 結(jié)果19-33
• 討論33-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)54-58
• 英文縮寫58-59
• 致謝59-60
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表和撰寫論文情況60-61

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 陳海松,劉維俊;抗內(nèi)毒素藥物的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);2002年04期

2 黃河頌;蔣慧;孔祥龍;劉婷婷;譚志平;陳平;羅紅;;細(xì)胞間黏附分子-1基因K469E多態(tài)性與慢性阻塞性肺疾病的相關(guān)性[J];中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2012年01期

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本文編號：550166