LL-37是人體內發(fā)現(xiàn)的抗菌肽Cathelicidin家族的唯一成員，由37個氨基酸殘基組成，因其N端前兩個氨基酸殘基為亮氨酸（L）而得名。LL-37抗菌譜廣，體外研究顯示對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌、病毒均發(fā)揮抑制作用，特別是對部分臨床耐藥菌及臨床易感菌株也有較強的抑菌活性，因此有很好的應用前景。本文采用原核表達系統(tǒng)實現(xiàn)小分子抗菌多肽LL-37的可溶表達，并研究其在皮膚創(chuàng)傷感染中發(fā)揮的活性作用。本課題將LL-37連接入pET32a載體中進行可溶表達，通過考察表達誘導因素獲得高產(chǎn)量的LL-37，體外實驗驗證其抗菌活性，最后研究LL-37對于小鼠深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）感染的預防治療作用，并從抗細菌生物膜方面探討其作用機制。 研究目的： 本文主要是采用pET32a表達載體實現(xiàn)LL-37的可溶表達，同時還探討了LL-37對于小鼠深Ⅱ度燙傷耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）創(chuàng)傷感染模型的預防治療作用，并對其機制進行初步研究，為小分子抗菌肽的基因工程表達提供參考，也為LL-37的深入研究和開發(fā)應用提供實驗依據(jù)。 研究方法： 1.融合蛋白Trx-L...

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1Cathelicins家族結構示意圖

2圖1.1Cathelicins家族結構示意圖Fig.1.1Schematicrepresentationofthecathelicidinfamily

圖1.2LL-37殺菌模式示意圖

圖1.2LL-37殺菌模式示意圖ig.1.2SchematicrepresentationofLL-37bactericidalmod-37作為Cathelicidin家族唯一一個人源抗菌肽，修復中發(fā)揮了重要作用，受到越來越多學者的關

圖2.2融合蛋白Trx-LL-37疏水性分析

（3）疏水性預測結果用ProtScaleServer進行親水性/疏水性分析，正值越大表示越疏水，負值越大表示越親水，而介于+0.5到-0.5之間為兩性氨基酸。結果（圖2.2）顯示，多肽鏈第146位的Met親水性最強（-2.467），第26位的Val疏水性最強（1....

圖2.3目的基因LL-37的PCR擴增M：DNA分子量標準DL2000；1：PCR擴增產(chǎn)物

圖2.3目的基因LL-37的PCR擴增A分子量標準DL2000；1：PCR擴Fig2.3PCRamplificationofLL-37:DNAMarkerDL2000;1:PCRpro-LL-37的鑒定化成功的單克隆菌落作為模板與預期的....

本文編號：4036340