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外用bFGF-胰島素凝膠緩釋劑對(duì)糖尿病難愈創(chuàng)面的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-28 14:04

  本文關(guān)鍵詞:外用bFGF-胰島素凝膠緩釋劑對(duì)糖尿病難愈創(chuàng)面的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)將糖尿病大鼠背部深Ⅱ。燙傷,模擬糖尿病難愈創(chuàng)面愈合。觀察創(chuàng)面愈合時(shí)間、對(duì)比分析,探討外用bFGF-胰島素凝膠緩釋劑對(duì)糖尿病難愈創(chuàng)面微血管及膠原蛋白Ⅲ表達(dá)的影響。方.法:選擇SPF級(jí)雄性純系Wistar大鼠,體重(250±40g),2月齡,甘肅省中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。第一步快速腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,第二步制備深Ⅱ度燙傷模型。將75只Wistar大鼠(250±40g)隨機(jī)分為血糖正常大鼠空白緩釋凝膠對(duì)照A組、糖尿病大鼠空白凝膠對(duì)照B組、糖尿病大鼠背部深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面應(yīng)用胰島素緩釋凝膠對(duì)照C組、糖尿病大鼠背部深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面應(yīng)用bFGF緩釋凝膠D組、糖尿病大鼠背部深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面局部應(yīng)用bFGF胰島素緩釋凝膠E組,每組各15只。分別在各組大鼠燙傷后第3d、7d、11d、15d、21d觀察記錄創(chuàng)面總面積(殘余創(chuàng)面面積),透明膜法計(jì)算各組大鼠背部深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合率,創(chuàng)面組織甲醛固定后行HE染色檢查,觀察大鼠背部深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面病理視野下愈合情況。創(chuàng)面組織甲醛固定后行rat-CD31/Ⅲ型膠原免疫組化染色檢查,檢測(cè)各組大鼠背部創(chuàng)面組織中CD31、Ⅲ型膠原蛋白Ⅲ的表達(dá)情況。ELISA試劑盒檢測(cè)各組大鼠背部創(chuàng)面中bFGF的含量。檢測(cè)緩釋凝膠制劑的體外釋放穩(wěn)定性情況。結(jié)果所制備的bFGF-胰島素凝膠緩釋劑具有適宜的黏附性,良好的保濕性,方便保存及涂抹。檢測(cè)bFGF-胰島素凝膠緩釋劑,30 d內(nèi)保持良好穩(wěn)定性。各組大鼠除糖尿病模型造模注射STZ后死亡3只(已補(bǔ)充造模),正常血糖大鼠組、糖尿病大鼠組均存活至實(shí)驗(yàn)完成,創(chuàng)面未發(fā)現(xiàn)明顯感染跡象。各組大鼠深二度燙傷創(chuàng)面給予干預(yù)措施前3d內(nèi),肉眼觀察無明顯變化和差異。觀察7、11、15、21 d中,bFGF胰島素緩釋凝膠組大鼠創(chuàng)面愈合效果最佳,B組大鼠愈合率最低,E組愈合率最高。除第3d以外,各組大鼠背部深二度燙傷創(chuàng)面愈合率兩兩比較,結(jié)果差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(即:P0.05)。各時(shí)間點(diǎn)組織學(xué)觀察:E組大鼠創(chuàng)面組織中微血管化、肉芽組織生長和膠原纖維生長均優(yōu)于其余各組。燙傷后隨時(shí)間延長,各組大鼠創(chuàng)面組織中微血管、膠原蛋白Ⅲ表達(dá)逐漸增強(qiáng),在實(shí)施干預(yù)措施的第15 d各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)高峰,干預(yù)的第21 d各項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)明顯減弱;取各時(shí)間點(diǎn)大鼠背部創(chuàng)面組織免疫組織化學(xué)染色后觀察后發(fā)現(xiàn):CD31染色陽性細(xì)胞均于干預(yù)后的第3d已表達(dá),隨時(shí)間延長,各組大鼠背部創(chuàng)面組織中陽性染色細(xì)胞數(shù)量逐漸增加;從干預(yù)后的第15d免疫組化染色陽性細(xì)胞數(shù)量開始減少;各時(shí)間點(diǎn)D、E組cd31染色陽性及膠原蛋白Ⅲ表達(dá)數(shù)量明顯優(yōu)于其余各組,E組最高,B組大鼠創(chuàng)面組織中各項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)最低,各組間結(jié)果兩兩比較,結(jié)果差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(即:P0.05)。結(jié)論1.外用bFGF緩釋系統(tǒng)可促進(jìn)糖尿病大鼠背部深二度燙傷創(chuàng)面愈合。2.外用bFGF-胰島素凝膠系統(tǒng)可促進(jìn)創(chuàng)面組織損傷的修復(fù),提高創(chuàng)面愈合率;可促進(jìn)創(chuàng)面組織中膠原的合成;促進(jìn)創(chuàng)面組織微血管化,改善創(chuàng)面組織血液微循環(huán)有助于肉芽組織形成。
【關(guān)鍵詞】:難愈創(chuàng)面 外用胰島素 bFGF緩釋凝膠 深Ⅱ度燙傷 創(chuàng)面愈合 糖尿病大鼠
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R587.1;R641
【目錄】:
  • 中文摘要3-5
  • Abstract5-11
  • 第一章 引言11-15
  • 第二章 實(shí)驗(yàn)材料和法15-24
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-16
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器15
  • 2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
  • 2.1.4 試劑配制16
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-20
  • 2.2.1 糖尿病大鼠模型制備16-18
  • 2.2.2 糖尿病創(chuàng)面模型制作18-19
  • 2.2.3 bFGF-胰島素緩釋劑制備19
  • 2.2.4 酶聯(lián)免疫法測(cè)bFGF19
  • 2.2.5 胰島素標(biāo)準(zhǔn)曲線19
  • 2.2.6 透析法測(cè)藥物體外釋放19-20
  • 2.2.7 凝膠中bFGF的包封率和載藥量20
  • 2.2.8 創(chuàng)面面積愈合率20
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)分組20-21
  • 2.4 實(shí)驗(yàn)干預(yù)措施21
  • 2.5 糖尿病大鼠創(chuàng)面情況觀察21-23
  • 2.5.1 病理組織學(xué)觀察21-22
  • 2.5.2 rat-CD31免疫組織化染色22-23
  • 2.5.3 Ⅲ型膠原蛋白免疫組化檢測(cè)23
  • 2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23-24
  • 第三章 結(jié)果24-36
  • 3.1 緩釋凝膠外觀觀察24
  • 3.2 緩釋藥物釋放24-26
  • 3.2.1 bFGF標(biāo)準(zhǔn)品曲線24-25
  • 3.2.2 體外緩釋系統(tǒng)藥物釋放率25-26
  • 3.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-36
  • 3.3.1 創(chuàng)面肉眼大體觀察26-28
  • 3.3.2 組織學(xué)觀察28-31
  • 3.3.3 MVD(微血管密度)免疫組化檢測(cè)31-33
  • 3.3.4 Ⅲ型膠原蛋白免疫組化檢測(cè)33-36
  • 第四章 討論36-40
  • 第五章 結(jié)論40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-44
  • 致謝44

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 姚慶君,賈赤宇,陳璧,湯朝武,徐明達(dá),丁國斌,王洪濤;一種大鼠蒸氣燙傷模型的建立[J];中華燒傷雜志;2004年03期

2 陸樹良 ,向軍 ,青春 ,金曙雯 ,廖鎮(zhèn)江 ,史濟(jì)湘;Effect of necrotic tissue on progressive injury in deep partial thickness burn wounds[J];Chinese Medical Journal;2002年03期

3 雷靜;劉旭昭;陳淡嫦;張永斌;湯順清;;凝膠型膠原敷料修復(fù)糖尿病皮膚缺損及促進(jìn)血管再生[J];中國組織工程研究;2014年52期


  本文關(guān)鍵詞:外用bFGF-胰島素凝膠緩釋劑對(duì)糖尿病難愈創(chuàng)面的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):402766

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