研究背景中暑(簡稱HS)是一種威脅生命的疾病,其定義為核心體溫升高≥40℃,多并發(fā)嚴(yán)重的多器官功能障礙(MODS)。近年來,由于溫室效應(yīng),中暑的發(fā)生率也逐年增加。在中暑早期就可出現(xiàn)不同程度的肝功能損害,且損害程度與中暑發(fā)生發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān),流行病學(xué)顯示重癥中暑合并肝衰竭時(shí),患者的死亡率也會(huì)顯著增加,甚至高達(dá)50%。目前,中暑致肝損傷的原因復(fù)雜,其機(jī)制尚未闡明。外泌體是由雙層磷脂包圍的囊泡狀結(jié)構(gòu),直徑30-200nm。外泌體內(nèi)含物中包含了成千上萬種生物活性分子,如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸,其能將這些分子傳遞到受體細(xì)胞,導(dǎo)致其功能改變。肝源性外泌體在各種肝臟病理生理機(jī)制中扮演重要作用。外泌體蛋白或miRNA可作為肝病的新型生物標(biāo)志物。人們對(duì)肝臟疾病中分泌的外泌體內(nèi)含物進(jìn)行了探索。來源細(xì)胞不同或者在不同刺激條件下,外泌體其內(nèi)部組分的生成、裝配、分泌方式及其功能具有很大的差異。此外,同細(xì)胞來源的外泌體對(duì)于不同靶細(xì)胞的影響亦存在不同。然而,關(guān)于肝細(xì)胞來源的外泌體在中暑肝損傷中的作用及蛋白質(zhì)表達(dá)譜知之甚少。因此,研究中暑中肝細(xì)胞來源的外泌體的蛋白質(zhì)譜變化及其在肝損傷中的功能作用可以提高我們對(duì)中暑發(fā)病機(jī)...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．外泌體的特征一般鑒定

１．外泌體的特征一般鑒定。（Ａ）對(duì)照組肝細(xì)胞和熱應(yīng)激后復(fù)溫０、３、６、９ｈ肝細(xì)細(xì)胞上清液中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ水平比較。（Ｂ）在透射電鏡下觀察外泌體的有圓形或橢圓形雙層囊泡，直徑約ｌ〇〇ｎｍ。Ｂａｒ＝?ｌＯＯｎｍ。（Ｃ）?ＮＴＡ測(cè)量外泌體的布，主要分布在３０－２００ｎｍ左右。（....

圖３．２．ＧＯ功能富集分析??Ｆｉｇ．３．２Ｇｅｎｅ?Ｏｎｔｏｌｏｇｙ?ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ?ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ?ａｎａｌｙｓｉｓ．??

生物學(xué)調(diào)節(jié)、代謝過程、應(yīng)激反應(yīng)及免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)。在功能上主要分為結(jié)合功??能、分子功能、催化活性、運(yùn)輸活動(dòng)。細(xì)胞組分上面差異蛋白主要定位于細(xì)胞、??細(xì)胞器部分以及細(xì)胞連接（圖３．１）。??隨后我們發(fā)現(xiàn)ＧＯ功能富集實(shí)驗(yàn)中，程序性細(xì)胞死Ｔ＇：所占比例較高（圖３．２）。??表３．３我們列....

圖４．１．ＫＥＧＧ通路注釋．??ｌ：ｉｇ．４．１．?ＫＥＧＧ?ｐａｔｈｗａｙ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ．??第二部分熱應(yīng)激肝細(xì)胞外泌體誘導(dǎo)肝損傷??

路研究的數(shù)據(jù)庫，用于鑒定可能受ＨＳ－外泌體中差異蛋白質(zhì)表達(dá)影響的途徑。我??們發(fā)現(xiàn)主要的通路中包括壞死性凋亡，ＰＩ３Ｋ?（磷脂酰肌醇３＇－激酶）－Ａｋｔ信號(hào)傳??導(dǎo)途徑，抗原加工和呈遞，細(xì)胞凋亡等。大多數(shù)通路與損傷和炎癥有關(guān)（

圖１．外泌體的直接吸收實(shí)驗(yàn)：共聚焦顯微鏡顯示標(biāo)記有ＰＫＨ６７的外泌體與肝細(xì)胞共同孵育??后，ＨｅｐＧ－２中出現(xiàn)的綠色熒光的量呈時(shí)間依賴性

獲収小同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞，在正置共聚焦顯微鏡下觀察熒光表達(dá)強(qiáng)弱。在６??小時(shí)左右開始有綠色熒光表達(dá)，而且隨時(shí)間延長，綠色熒光表達(dá)量也逐漸增加。??該實(shí)驗(yàn)表明，在體外，肝細(xì)胞可以直接攝取并內(nèi)化外泌體（圖１）。??３５??

本文編號(hào)：3971329