發(fā)布時(shí)間：2024-03-07 18:40

　　目的:中暑是一種嚴(yán)重的熱性疾病,主要表現(xiàn)為體溫過(guò)高與中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙,嚴(yán)重的中暑可導(dǎo)致多臟器功能衰竭,具有較高的死亡率與致殘率。當(dāng)前研究認(rèn)為,下丘腦主動(dòng)參與體溫調(diào)節(jié)功能障礙,在重癥中暑發(fā)生過(guò)程中具有關(guān)鍵作用,但目前具體病理生理機(jī)制尚未明確。本研究中通過(guò)建立重癥中暑小鼠模型,利用組織病理學(xué)、二維熒光差異凝膠電泳分析、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜明確下丘腦的損傷并分析鑒定下丘腦差異表達(dá)的蛋白質(zhì),進(jìn)一步通過(guò)嗜鉻細(xì)胞瘤-12(PC12)神經(jīng)元細(xì)胞系建立熱打擊神經(jīng)元細(xì)胞模型研究海馬鈣結(jié)合蛋白對(duì)細(xì)胞凋亡的作用,以揭示重癥中暑神經(jīng)元細(xì)胞的病理過(guò)程。最后,通過(guò)在體、體外研究烏司他丁在熱打擊動(dòng)物與細(xì)胞中的作用及具體可能作用機(jī)制,并進(jìn)一步驗(yàn)證HPAC的作用,為重癥中暑的臨床治療以及研究提供基礎(chǔ)與新思路。方法:在體實(shí)驗(yàn)中利用仿真氣候艙建立中暑小鼠模型,利用組織病理學(xué)檢測(cè)不同中暑程度小鼠下丘腦損傷情況;通過(guò)熒光二維差異凝膠電泳分析下丘腦中14種差異表達(dá)的蛋白質(zhì),并通過(guò)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定,并選擇海馬鈣結(jié)合蛋白(HPAC)作為我們的研究對(duì)象,應(yīng)用TUNEL、Western blot、免疫...

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 文獻(xiàn)研究
    第一節(jié) 流行病學(xué)
    第二節(jié) 下丘腦損傷在重癥中暑發(fā)病中的作用
    第三節(jié) 重癥中暑腦損傷的病理生理機(jī)制
    第四節(jié) HPAC在下丘腦損傷中的研究現(xiàn)狀
    第五節(jié) 烏司他丁在中暑中的治療
第二章 材料與方法
    第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        一、動(dòng)物與細(xì)胞
        二、主要儀器
        三、主要試劑
        四、主要試劑配制
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        一、重癥中暑小鼠模型制備與冷卻處理方法
        二、給藥方案
        三、組織病理學(xué)分析
        四、雙向熒光差異凝膠電泳和基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析
        五、細(xì)胞培養(yǎng)和熱打擊方案
        六、MTT法細(xì)胞活力檢測(cè)
        七、總蛋白提取及BCA法蛋白定量
        八、Caspase-3活性測(cè)定
        九、流式細(xì)胞術(shù)分析
        十、細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        十一、免疫組化
        十二、TUNEL原位檢測(cè)凋亡細(xì)胞
        十三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    第一節(jié) 熱打擊致下丘腦損傷的在體研究
        一、熱打擊致下丘腦組織神經(jīng)元損傷
        二、熱打擊小鼠下丘腦中差異表達(dá)蛋白質(zhì)的鑒定結(jié)果
        三、熱打擊小鼠下丘腦中HPAC的表達(dá)顯著下調(diào)
    第二節(jié) HPAC在熱打擊下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡中的作用研究
        一、熱打擊PC12細(xì)胞HPAC表達(dá)下降
        二、熱打擊至PC12細(xì)胞凋亡
        三、HPAC過(guò)表達(dá)可降低熱打擊誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡
        四、HPAC表達(dá)下調(diào)增加熱打擊誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡
    第三節(jié) 烏司他丁在中暑下丘腦損傷的保護(hù)作用
        一、烏司他丁可抑制熱打擊PC12細(xì)胞HPAC表達(dá)的下調(diào)
        二、烏司他丁可減輕熱打擊PC12細(xì)胞凋亡
        三、烏司他丁抑制中暑小鼠下丘腦HPAC表達(dá)的下降
        四、烏司他丁預(yù)處理可降低中暑小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞凋亡水平
        五、烏司他丁可降低中暑小鼠下丘腦病理?yè)p傷評(píng)分
        六、烏司他丁可延長(zhǎng)中暑小鼠中心體溫變化平臺(tái)期增加小鼠耐熱性
第四章 討論
結(jié)語(yǔ)
    參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表論文情況
致謝
附件



本文編號(hào)：3921570