K ATP 在硫氫化鈉對燒傷血清干預表皮細胞線粒體膜電位及膜通透轉換孔影響中的作用研究
發(fā)布時間:2023-04-18 21:38
目的:探討硫氫化鈉是否通過介導ATP敏感性鉀離子通道(ATP-sensitive potassium channel,KATP)抑制表皮細胞線粒體膜電位(Mitochondrial membrane potential,MMP)的降低及膜通透轉換孔(Mitochondrial membrane permeability transition pore,MPTP)的激活。方法:體外培養(yǎng)新出生1天SD乳鼠背部表皮細胞至第3代。抽取350-400g正常雄性SD大鼠及燒傷雄性SD大鼠腹主動脈血離心后分別標記為正常大鼠血清及燒傷大鼠血清,300目濾網過濾,分別制備成10%正常血清完全培養(yǎng)液及10%燒傷血清完全培養(yǎng)液備用。硫氫化鈉干預濃度為150μM(μmol/L),格列本脲干預濃度為200μM。實驗分為正常血清組,燒傷血清組,燒傷血清+硫氫化鈉(sodium hydrosulfide,NaHS)組,燒傷血清+格列本脲(glibenclamide,Gli)組,燒傷血清+Gli+NaHS組,共5組,分別干預體外培養(yǎng)第3代乳鼠表皮細胞。各組干預4h后按照線粒體膜電位及線粒體膜通透...
【文章頁數】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號對照表
第1章 引言
1.1 H2S與線粒體損傷的關系
1.2 本課題研究目的及意義
1.3 應用前景
第2章 材料與方法
2.1 實驗場所及動物
2.2 實驗所用儀器和設備
2.3 實驗所用試劑和耗材
2.4 主要溶液的配置
2.5 技術路線圖
2.6 實驗操作步驟
2.6.1 燒傷大鼠建模及血清的制備
2.6.2 乳鼠表皮細胞的提取、培養(yǎng)
2.6.3 乳鼠表皮細胞的傳代、凍存及復蘇
2.6.4 實驗分組處理及操作步驟
2.7 MMP、MPTP檢測原理、方法及步驟
2.8 統(tǒng)計學分析
第3章 結果
3.1 表皮細胞同步化至同一時期
3.2 乳鼠表皮細胞MMP數據分析
3.3 乳鼠表皮細胞MPTP數據分析
第4章 討論
第5章 結論
參考文獻
致謝
附錄A 各組表皮細胞線粒體膜電位降低百分比流式熒光圖
附錄B 各組表皮細胞線粒體膜通透轉換孔激活百分比流式熒光圖
綜述
參考文獻
作者簡介
本文編號:3793080
【文章頁數】:56 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號對照表
第1章 引言
1.1 H2S與線粒體損傷的關系
1.2 本課題研究目的及意義
1.3 應用前景
第2章 材料與方法
2.1 實驗場所及動物
2.2 實驗所用儀器和設備
2.3 實驗所用試劑和耗材
2.4 主要溶液的配置
2.5 技術路線圖
2.6 實驗操作步驟
2.6.1 燒傷大鼠建模及血清的制備
2.6.2 乳鼠表皮細胞的提取、培養(yǎng)
2.6.3 乳鼠表皮細胞的傳代、凍存及復蘇
2.6.4 實驗分組處理及操作步驟
2.7 MMP、MPTP檢測原理、方法及步驟
2.8 統(tǒng)計學分析
第3章 結果
3.1 表皮細胞同步化至同一時期
3.2 乳鼠表皮細胞MMP數據分析
3.3 乳鼠表皮細胞MPTP數據分析
第4章 討論
第5章 結論
參考文獻
致謝
附錄A 各組表皮細胞線粒體膜電位降低百分比流式熒光圖
附錄B 各組表皮細胞線粒體膜通透轉換孔激活百分比流式熒光圖
綜述
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本文編號:3793080
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