目的:體內(nèi)觀察富半胱氨酸蛋白61(CYR61/CCN1)在正常肺組織中的表達(dá)定位和在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷中的表達(dá)變化,體外研究LPS調(diào)控CCN1表達(dá)的分子機(jī)制和CCN1在LPS誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)表達(dá)中的作用。方法:分別通過(guò)免疫組化(IHC)染色及免疫熒光法觀察CCN1在小鼠肺組織和氣道上皮細(xì)胞16HBE中的表達(dá)定位;氣道滴注LPS建立小鼠急性肺損傷模型,IHC觀察CCN1在肺組織中的表達(dá)變化;體外研究中,分別予氣道上皮16HBE細(xì)胞以ERK1/2、JNK、P38和PI3K信號(hào)通路特異性抑制劑預(yù)處理2 h后加入LPS刺激,通過(guò)RT-qPCR和Western blot檢測(cè)CCN1的mRNA和蛋白表達(dá)變化;分別通過(guò)CCN1-siRNA和重組CCN1蛋白刺激16HBE細(xì)胞,qPCR檢測(cè)炎癥介質(zhì)白細(xì)胞介素6(IL-6)、IL-8、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的mRNA水平。結(jié)果:CCN1在正常肺組織中以氣道上皮表達(dá)為主,在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠氣道上皮細(xì)胞中CCN1表達(dá)升高;LPS可刺激16HBE細(xì)胞中CCN1的表達(dá)水平升高,其中ERK1/2、JNK、P...

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 材料和儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 動(dòng)物模型復(fù)制
        2.2 免疫組化染色
        2.3 免疫熒光染色
        2.4 RT-qPCR
        2.5 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.6 siRNA轉(zhuǎn)染
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 CCN1在氣道上皮中的定位與表達(dá)
    2 LPS誘導(dǎo)氣道上皮CCN1的表達(dá)升高
    3 ERK1/2、JNK、P38和PI3K信號(hào)傳導(dǎo)途徑參與LPS誘導(dǎo)的CCN1表達(dá)
    4 CCN1參與LPS誘導(dǎo)的炎癥介質(zhì)IL-6、IL-8、TGF-β和VEGF的mRNA合成
討 論



本文編號(hào)：3742147