目的觀察不同濃度脂多糖（lippopolysaccharide, LPS）對肺上皮細胞壞死性凋亡和線粒體動力學相關(guān)蛋白1（dynamin related protein 1, Drp1）依賴的線粒體自噬的影響,探討LPS制作膿毒癥急性肺損傷模型的合適濃度。方法對數(shù)生長期A549細胞分為對照組、5 mg/L LPS組、10 mg/L LPS組、25 mg/L LPS組、50 mg/L LPS組,5 mg/L LPS組、10 mg/L LPS組、25 mg/L LPS組、50 mg/L LPS組分別采用PBS稀釋的5、10、25、50 mg/L LPS處理16 h,對照組給予等體積PBS培養(yǎng)16 h。采用Western blot法檢測各組細胞壞死性凋亡標志蛋白p-RIP3、RIPK1、p-MLKL和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF）-α以及線粒體自噬標志蛋白PINK1、LC3B、Drp1、p-Mfn2相對表達量,并采用JC-1線粒體探針檢測線粒體膜電位。結(jié)果 10、25、50 mg/L LPS組細胞p-RIP3、RIPK1、p-MLKL、TNF-α、PIN... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 一般材料
    1.2 方法
        1.2.1 主要試劑
        1.2.2 分組與實驗方法
        1.2.3 Western blot法檢測各組細胞線粒體自噬蛋白及壞死性凋亡蛋白表達情況
        1.2.4 線粒體膜電位檢測
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結(jié) 果
    2.1 各組細胞壞死性凋亡標志蛋白p-RIP3、RIPK1、p-MLKL和TNF-α相對表達量比較
    2.2 各組細胞線粒體自噬蛋白p-Mfn2、Drp1、PINK1、LC3B相對表達量比較
    2.3 各組細胞線粒體膜電位比較
3 討 論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]膿毒癥繼發(fā)急性肺損傷患者肺組織和血清細胞因子變化及臨床意義[J]. 謝敏崇,杜劍文,張海天,王華.  中華實用診斷與治療雜志. 2018(04)
[2]自噬對脂多糖致大鼠急性肺損傷模型的炎癥調(diào)控[J]. 李琴,樊佳,陳斌,張愛民,許圣榮.  中華實用診斷與治療雜志. 2017(04)
[3]線粒體功能障礙及保護在多器官功能衰竭中作用研究進展[J]. 徐美玲,張媛莉.  中華實用診斷與治療雜志. 2015(11)
[4]法舒地爾對脂多糖誘導的急性肺損傷大鼠肺組織中核因子-κB激活的影響[J]. 王海云,盛凈,朱健.  中華實用診斷與治療雜志. 2013(02)



本文編號：3729480