發(fā)布時(shí)間：2022-12-25 10:09

　　目的:本研究探究膿毒癥狀態(tài)下白細(xì)胞介素（Interleukin）-33表達(dá)水平與小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞（DC）焦亡、功能改變的關(guān)系及其與免疫功能障礙的內(nèi)在聯(lián)系。方法:正常小鼠隨機(jī)分為假傷組、CLP組、sST2干預(yù)組。采用盲腸結(jié)扎穿孔（Cecal ligation and puncture,CLP）方法復(fù)制膿毒癥小鼠模型;假傷組（Sham組）除不進(jìn)行盲腸穿孔外,其與處理方法同CLP組;sST2（可溶性ST2受體,可結(jié)合IL-33,拮抗其生物學(xué)功能）干預(yù)組于CLP術(shù)后1 h經(jīng)腹腔注射重組sST2（每只10μg,溶于200μL PBS中）,同批對(duì)照CLP組同時(shí)給予200μL PBS腹腔注射。另設(shè)IL-33處理組,給予正常小鼠腹腔注射重組IL-33（每只5μg,溶于200μL PBS中）,同批正常對(duì)照組給予200μL PBS腹腔注射。采用免疫磁珠分離提純小鼠脾臟DC。正常小鼠脾臟DC體外培養(yǎng)并給予不同濃度（0、1、10、100 ng/mL）、不同時(shí)間（12和24 h）重組IL-33刺激。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組DC焦亡情況以及DC表面標(biāo)志分子CD80、CD86、主要組織相容性復(fù)合物-II（MHC-I... 

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 膿毒癥簡(jiǎn)介
    1.2 樹突狀細(xì)胞與膿毒癥的研究進(jìn)展
        1.2.1 樹突狀細(xì)胞分類
        1.2.2 樹突狀細(xì)胞在膿毒癥免疫調(diào)控中的作用
    1.3 IL-33的研究進(jìn)展
        1.3.1 IL-33分子特征與生物活性
        1.3.2 IL-33介導(dǎo)炎癥反應(yīng)
        1.3.3 IL-33與膿毒癥
    1.4 焦亡的研究進(jìn)展
        1.4.1 細(xì)胞焦亡的簡(jiǎn)介
        1.4.2 細(xì)胞焦亡分子機(jī)制
        1.4.3 細(xì)胞焦亡對(duì)免疫反應(yīng)的調(diào)控作用
    1.5 研究目的及意義
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)小鼠膿毒癥模型建立及分組
        2.2.2 小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞的分離制備
        2.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟DC表面標(biāo)志分子表達(dá)
        2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠脾臟DC焦亡
        2.2.5 裂解法提小鼠脾臟DC蛋白
        2.2.6 裂解法提小鼠組織蛋白
        2.2.7 蛋白印跡法(Western blot)檢測(cè)蛋白表達(dá)水平
        2.2.8 共聚焦顯微鏡觀測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 不同時(shí)間點(diǎn)CLP膿毒癥模型小鼠脾臟DC焦亡情況
        3.1.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CLP小鼠脾臟DC焦亡率
        3.1.2 激光共聚焦檢測(cè)CLP小鼠脾臟DC焦亡
        3.1.3 蛋白印跡檢測(cè)CLP小鼠脾臟DC焦亡相關(guān)蛋白表達(dá)
    3.2 CLP小鼠脾臟IL-33表達(dá)水平
        3.2.1 CLP小鼠脾臟組織IL-33蛋白表達(dá)水平
        3.2.2 CLP小鼠脾臟DC胞內(nèi)IL-33 表達(dá)水平
    3.3 CLP小鼠脾臟DC表面標(biāo)志物表達(dá)情況
    3.4 重組IL-33(rmIL-33)對(duì)小鼠脾臟DC焦亡及功能狀態(tài)的直接影響
        3.4.1 體外重組IL-33對(duì)小鼠脾臟DC功能狀態(tài)的直接影響
        3.4.2 重組IL-33對(duì)小鼠脾臟DC焦亡及功能狀態(tài)的直接影響
    3.5 sST2干預(yù)對(duì)小鼠脾臟DC焦亡率的影響
    3.6 sST2干預(yù)對(duì)小鼠脾臟DC表面標(biāo)志分子的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]白細(xì)胞介素-33對(duì)膿毒癥小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞免疫功能的影響[J]. 陰月,王麗雪,董寧,吳瑤,童亞林,祝筱梅,姚詠明.  感染、炎癥、修復(fù). 2019(04)
[2]HBV感染者血清IL-33表達(dá)水平與疾病進(jìn)展的相關(guān)性研究[J]. 張玉麗,黃天壬,鄧偉,黃月瑩,曾潔,吳玲紅.  應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué). 2018(02)
[3]白細(xì)胞介素-33通過增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的趨化作用從而減弱膿毒癥效應(yīng)[J]. 方濤,胡森.  中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué). 2010 (06)
[4]炎癥復(fù)合體與炎癥反應(yīng)[J]. 祝筱梅,姚詠明,盛志勇.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2010(02)
[5]膿毒癥——挑戰(zhàn)與對(duì)策[J]. 林洪遠(yuǎn).  中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué). 2004(06)



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