大黃素通過抑制NF-κB和HIF-1a信號(hào)通路改善缺氧和LPS誘導(dǎo)的腸上皮屏障損傷
發(fā)布時(shí)間:2021-12-16 21:33
論文一大黃素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子-1a/環(huán)氧化酶-2通路的干預(yù)一、目的觀察脂多糖(LPS)處理腸上皮細(xì)胞對(duì)缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-la)及下游炎癥相關(guān)靶基因環(huán)氧化酶-2(COX-2)表達(dá)的影響,探討大黃素干預(yù)的可能作用靶點(diǎn)。二、方法建立LPS處理人腸上皮細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?.用Western blot檢測(cè)LPS不同劑量和不同時(shí)間處理組的HIF-la和COX-2蛋白表達(dá)的變化趨勢(shì);檢測(cè)LPS和不同劑量大黃素共同干預(yù)組的HIF-1a、COX-2、NF-κB抑制因子(IκB-a)和核轉(zhuǎn)錄因子-κB (NF-kB)蛋白表達(dá)的變化趨勢(shì)。2.用PCR檢測(cè)LPS處理組與LPS和大黃素共同干預(yù)組HIF-la的mRNA水平。3.用MTT法檢測(cè)大黃素對(duì)腸上皮細(xì)胞增殖情況的影響。數(shù)據(jù)采用單因素方差分析,以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三、結(jié)果1.LPS作用可引起HIF-1a表達(dá)升高,且有時(shí)間和劑量效應(yīng)關(guān)系。隨LPS濃度的增加,HIF-la的表達(dá)量先增高后降低,在濃度為10-3mg/ml時(shí)HIF-1a表達(dá)量最高(P<0.05)。作用時(shí)間在0.5h HIF-1a表達(dá)達(dá)峰值,到...
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、大黃素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子-1α/環(huán)氧化酶-2通路的干預(yù)
1.1 材料與方法
1.1.1 主要試劑
1.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和LPS及大黃素干預(yù)模型
1.1.3 Western blot
1.1.4 PCR
1.1.5 四甲基偶氮唑鹽法(MTT)
1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
1.2 結(jié)果
1.2.1 Western blot結(jié)果LPS不同劑量處理組
1.2.2 LPS不同作用時(shí)間組
1.2.3 LPS和大黃素干預(yù)組
1.2.4 PCR結(jié)果
1.2.5 MTT結(jié)果
1.3 討論
1.3.1 HIF-la在腸屏障功能作用的爭(zhēng)議
1.3.2 LPS時(shí)間和濃度依賴性實(shí)驗(yàn)中HIF-la變化的可能原因
1.3.3 LPS誘導(dǎo)HIF-la和NF-κB途徑的交互作用
1.3.4 大黃素的保護(hù)作用機(jī)制
1.4 小結(jié)
二、缺氧再復(fù)氧和脂多糖激活腸上皮細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子-κB和低氧誘導(dǎo)因子-1α信號(hào)通路及大黃素干預(yù)作用
1.1 材料與方法
1.1.1 材料
1.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)分組
1.1.3 Western blot
1.1.4 細(xì)胞形態(tài)觀察
1.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
1.2 結(jié)果
1.2.1 H組和H+LPS組的NF-κB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.2 HR組和HR+LPS組的NF-KB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.3 E共同作用組的NF-κB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.4 E后處理組的NF-κB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.5 顯微鏡觀察
1.3 討論
1.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重癥急性胰腺炎血行感染患者腸屏障功能障礙的研究[J]. 余楊梓,傅強(qiáng),華鸝鸝. 中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志. 2012 (04)
[2]硫化氫對(duì)心肺復(fù)蘇后大鼠心肌缺氧誘導(dǎo)因子-1α的影響[J]. 陳娣,潘昊,李醇文,蘭秀彩,劉蓓蓓,楊光田. 中華急診醫(yī)學(xué)雜志. 2011 (07)
[3]腦出血灶周缺氧誘導(dǎo)因子-1a表達(dá)與腦水腫的關(guān)系[J]. 劉慶新,陳金波,朱玉紅,張合亮. 中華急診醫(yī)學(xué)雜志. 2007(09)
[4]大黃對(duì)危重癥患者胃腸道的保護(hù)作用[J]. 陳德昌,景炳文,楊興易,宋志芳,嚴(yán)鳴,趙良,單紅衛(wèi),余康龍,張翔宇,馬鈞. 中國危重病急救醫(yī)學(xué). 2000(02)
[5]高滲鹽溶液對(duì)腸缺血/再灌注損傷兔腸屏障功能保護(hù)的時(shí)相性研究[J]. 徐軍,鄭亮亮,梁璐,劉業(yè)成,張暉,李毅,徐騰達(dá),朱華棟,王仲,于學(xué)忠,馬遂. 中國危重病急救醫(yī)學(xué). 2013 (06)
本文編號(hào):3538855
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、大黃素對(duì)脂多糖誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子-1α/環(huán)氧化酶-2通路的干預(yù)
1.1 材料與方法
1.1.1 主要試劑
1.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和LPS及大黃素干預(yù)模型
1.1.3 Western blot
1.1.4 PCR
1.1.5 四甲基偶氮唑鹽法(MTT)
1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
1.2 結(jié)果
1.2.1 Western blot結(jié)果LPS不同劑量處理組
1.2.2 LPS不同作用時(shí)間組
1.2.3 LPS和大黃素干預(yù)組
1.2.4 PCR結(jié)果
1.2.5 MTT結(jié)果
1.3 討論
1.3.1 HIF-la在腸屏障功能作用的爭(zhēng)議
1.3.2 LPS時(shí)間和濃度依賴性實(shí)驗(yàn)中HIF-la變化的可能原因
1.3.3 LPS誘導(dǎo)HIF-la和NF-κB途徑的交互作用
1.3.4 大黃素的保護(hù)作用機(jī)制
1.4 小結(jié)
二、缺氧再復(fù)氧和脂多糖激活腸上皮細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子-κB和低氧誘導(dǎo)因子-1α信號(hào)通路及大黃素干預(yù)作用
1.1 材料與方法
1.1.1 材料
1.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)分組
1.1.3 Western blot
1.1.4 細(xì)胞形態(tài)觀察
1.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
1.2 結(jié)果
1.2.1 H組和H+LPS組的NF-κB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.2 HR組和HR+LPS組的NF-KB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.3 E共同作用組的NF-κB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.4 E后處理組的NF-κB和HIF-1a通路的變化趨勢(shì)
1.2.5 顯微鏡觀察
1.3 討論
1.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重癥急性胰腺炎血行感染患者腸屏障功能障礙的研究[J]. 余楊梓,傅強(qiáng),華鸝鸝. 中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志. 2012 (04)
[2]硫化氫對(duì)心肺復(fù)蘇后大鼠心肌缺氧誘導(dǎo)因子-1α的影響[J]. 陳娣,潘昊,李醇文,蘭秀彩,劉蓓蓓,楊光田. 中華急診醫(yī)學(xué)雜志. 2011 (07)
[3]腦出血灶周缺氧誘導(dǎo)因子-1a表達(dá)與腦水腫的關(guān)系[J]. 劉慶新,陳金波,朱玉紅,張合亮. 中華急診醫(yī)學(xué)雜志. 2007(09)
[4]大黃對(duì)危重癥患者胃腸道的保護(hù)作用[J]. 陳德昌,景炳文,楊興易,宋志芳,嚴(yán)鳴,趙良,單紅衛(wèi),余康龍,張翔宇,馬鈞. 中國危重病急救醫(yī)學(xué). 2000(02)
[5]高滲鹽溶液對(duì)腸缺血/再灌注損傷兔腸屏障功能保護(hù)的時(shí)相性研究[J]. 徐軍,鄭亮亮,梁璐,劉業(yè)成,張暉,李毅,徐騰達(dá),朱華棟,王仲,于學(xué)忠,馬遂. 中國危重病急救醫(yī)學(xué). 2013 (06)
本文編號(hào):3538855
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