急性肺損傷是呼吸系統(tǒng)常見危重癥之一。急性肺損傷的病理生理變化主要是肺泡上皮及血管內(nèi)皮細胞屏障功能的下降,導致肺水腫,保持肺泡毛細血管膜的屏障功能的完整性以及促進肺泡毛細血管膜損傷后的修復,對于減輕和防治急性肺損傷具有重要意義。但氣道上皮屏障功能下降以及損傷修復障礙在急性肺損傷中的作用目前研究甚少。細胞分裂周期蛋白42（Cdc42）具有調(diào)控細胞周期、促進細胞增殖、遷移及維持細胞間連接等生物學活性,缺失cdc42所導致的氣道上皮細胞屏障下降和損傷修復延遲對急性肺損傷的影響,目前還不明確。本課題旨在探索Cdc42缺失介導的氣道上皮屏障下降和修復延遲在急性肺損傷中的作用及機制,為進一步明確氣道上皮細胞屏障功能和損傷修復在急性肺損傷的作用,并尋找急性肺損傷治療的相應靶點奠定研究基礎(chǔ)。研究方法:第一部分:研究敲除cdc42對氣道上皮細胞屏障功能和損傷修復的影響1.體內(nèi)實驗:1.1通過利用Cre/loxp技術(shù)構(gòu)建氣道上皮細胞特異性敲除Cdc42基因小鼠模型。1.2收取對照組及cdc42敲除組小鼠的肺組織,通過免疫組化染色評估氣道上皮細胞增殖情況及細胞間連接蛋白的表達及分布情況。2.體外實驗:2.1通... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１構(gòu)建氣道上皮細胞特異性敲除Ｃｄｃ４２的小鼠模型

Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ作為氣道上皮細胞間黏附連接蛋白的重要組成分子，可用于評??價氣道屏障功能。因此，我們通過對照組和敲除Ｃｄｃ４２基因小鼠的肺組織切片??進行Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的免疫組化染色，評估其在氣道上皮的分布情況（如圖２Ａ），結(jié)??果顯示，敲除組的氣道上皮Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ明顯減少且連續(xù)性中斷，同時我們檢測??對照組和敲除Ｃｄｃ４２基因小鼠肺組織中的Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白水平（如圖２Ｂ），結(jié)??果顯示：對比對照組的小鼠肺組織，敲除組小鼠的肺組織中Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表??達水平明顯下降。以上結(jié)果均提示：敲除Ｃｄｃ４２的小鼠氣道上皮細胞屏障功能??下降??Ａ．??ＷＴ?ＫＯ??ｍｍ，??２８??

３．１．３敲除Ｃｄｃ４２的小鼠氣道上皮增殖能力下降??為研究氣道上皮細胞増殖能力，我們通過利用ＢｒｄＵ免疫熒光染色評估氣??道上皮細胞的增殖能力。從圖３Ａ結(jié)果顯示：對照組小鼠氣道中處于增殖期的??上皮細胞數(shù)量明顯多于敲除組小鼠的氣道中處于增殖期的上皮細胞數(shù)量。圖３Ｂ??結(jié)果提示：對照組小鼠氣道中處于增殖期的上皮細胞比例也明顯大于敲除組小??鼠的氣道中處于增殖期的上皮細胞比例，揭示Ｃｄｃ４２的活性水平與氣道上皮細??胞的增殖能力呈正相關(guān)關(guān)系。Ｃｄｃ４２可通過促進氣道上皮細胞發(fā)生增殖，調(diào)控??氣道上皮屏障功能的維持，亦可作為啟動損傷后氣道上皮屏障修復的重要調(diào)控??因素。??２９??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]氣道防御屏障[J]. 吳曉東,施毅.  中國呼吸與危重監(jiān)護雜志. 2011(03)
[2]Rho蛋白家族的生物活性[J]. 朱正.  國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊). 2002(03)

碩士論文
[1]Cdc42在急性肺損傷中對肺微血管內(nèi)皮細胞再生修復的影響及機制[D]. 呂嘉文.南方醫(yī)科大學 2017



本文編號：3476310