急性肺損傷是呼吸系統(tǒng)常見危重癥之一。急性肺損傷的病理生理變化主要是肺泡上皮及血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能的下降,導(dǎo)致肺水腫,保持肺泡毛細(xì)血管膜的屏障功能的完整性以及促進(jìn)肺泡毛細(xì)血管膜損傷后的修復(fù),對(duì)于減輕和防治急性肺損傷具有重要意義。但氣道上皮屏障功能下降以及損傷修復(fù)障礙在急性肺損傷中的作用目前研究甚少。細(xì)胞分裂周期蛋白42（Cdc42）具有調(diào)控細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移及維持細(xì)胞間連接等生物學(xué)活性,缺失cdc42所導(dǎo)致的氣道上皮細(xì)胞屏障下降和損傷修復(fù)延遲對(duì)急性肺損傷的影響,目前還不明確。本課題旨在探索Cdc42缺失介導(dǎo)的氣道上皮屏障下降和修復(fù)延遲在急性肺損傷中的作用及機(jī)制,為進(jìn)一步明確氣道上皮細(xì)胞屏障功能和損傷修復(fù)在急性肺損傷的作用,并尋找急性肺損傷治療的相應(yīng)靶點(diǎn)奠定研究基礎(chǔ)。研究方法:第一部分:研究敲除cdc42對(duì)氣道上皮細(xì)胞屏障功能和損傷修復(fù)的影響1.體內(nèi)實(shí)驗(yàn):1.1通過利用Cre/loxp技術(shù)構(gòu)建氣道上皮細(xì)胞特異性敲除Cdc42基因小鼠模型。1.2收取對(duì)照組及cdc42敲除組小鼠的肺組織,通過免疫組化染色評(píng)估氣道上皮細(xì)胞增殖情況及細(xì)胞間連接蛋白的表達(dá)及分布情況。2.體外實(shí)驗(yàn):2.1通... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１構(gòu)建氣道上皮細(xì)胞特異性敲除Ｃｄｃ４２的小鼠模型

Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ作為氣道上皮細(xì)胞間黏附連接蛋白的重要組成分子，可用于評(píng)??價(jià)氣道屏障功能。因此，我們通過對(duì)照組和敲除Ｃｄｃ４２基因小鼠的肺組織切片??進(jìn)行Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的免疫組化染色，評(píng)估其在氣道上皮的分布情況（如圖２Ａ），結(jié)??果顯示，敲除組的氣道上皮Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ明顯減少且連續(xù)性中斷，同時(shí)我們檢測(cè)??對(duì)照組和敲除Ｃｄｃ４２基因小鼠肺組織中的Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白水平（如圖２Ｂ），結(jié)??果顯示：對(duì)比對(duì)照組的小鼠肺組織，敲除組小鼠的肺組織中Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表??達(dá)水平明顯下降。以上結(jié)果均提示：敲除Ｃｄｃ４２的小鼠氣道上皮細(xì)胞屏障功能??下降??Ａ．??ＷＴ?ＫＯ??ｍｍ，??２８??

３．１．３敲除Ｃｄｃ４２的小鼠氣道上皮增殖能力下降??為研究氣道上皮細(xì)胞増殖能力，我們通過利用ＢｒｄＵ免疫熒光染色評(píng)估氣??道上皮細(xì)胞的增殖能力。從圖３Ａ結(jié)果顯示：對(duì)照組小鼠氣道中處于增殖期的??上皮細(xì)胞數(shù)量明顯多于敲除組小鼠的氣道中處于增殖期的上皮細(xì)胞數(shù)量。圖３Ｂ??結(jié)果提示：對(duì)照組小鼠氣道中處于增殖期的上皮細(xì)胞比例也明顯大于敲除組小??鼠的氣道中處于增殖期的上皮細(xì)胞比例，揭示Ｃｄｃ４２的活性水平與氣道上皮細(xì)??胞的增殖能力呈正相關(guān)關(guān)系。Ｃｄｃ４２可通過促進(jìn)氣道上皮細(xì)胞發(fā)生增殖，調(diào)控??氣道上皮屏障功能的維持，亦可作為啟動(dòng)損傷后氣道上皮屏障修復(fù)的重要調(diào)控??因素。??２９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]氣道防御屏障[J]. 吳曉東,施毅.  中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志. 2011(03)
[2]Rho蛋白家族的生物活性[J]. 朱正.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè)). 2002(03)

碩士論文
[1]Cdc42在急性肺損傷中對(duì)肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞再生修復(fù)的影響及機(jī)制[D]. 呂嘉文.南方醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3476310