目的:探討程序性死亡配體1（Programmed death ligand 1,PD-L1）對(duì)膿毒血癥中性粒細(xì)胞（Polymorphonuclear neutrophil,PMN）延遲凋亡的調(diào)控作用及可能機(jī)制。方法:（1）分別采集18例膿毒血癥患者和18例健康志愿者的靜脈外周血,采用Ficoll密度梯度離心法分離中性粒細(xì)胞（Polymorphonuclear neutrophil,PMN）。（2）采用臺(tái)盼藍(lán)和懷特-姬姆薩混合染色法對(duì)PMN的純度和活力進(jìn)行檢測(cè)。（3）分別在體外培養(yǎng)PMN細(xì)胞5 h、10 h和20 h后,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;（4）采用瓊脂糖趨化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PMN趨化性。（5）培養(yǎng)18例膿毒血癥患者的PMN,通過(guò)Annexin V-FITC/PI雙染色法分析細(xì)胞凋亡率,采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)PD-L1的表達(dá)量。（6）取健康志愿者的PMN,采用干擾素-γ（Interfero-gama,IFN-γ）和干擾素-γ/脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）激活PD-L1的表達(dá);采用RNA干擾技術(shù)沉默PD-L1;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PMN細(xì)胞的凋亡率,采... 

【文章來(lái)源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

懷特-姬姆薩染色（A）和臺(tái)盼藍(lán)

表 1-5 膿毒血癥 PMN 和健康 PMN 細(xì)胞凋亡率比較 Table 1-5 Early apoptosis results of PMN in the two groups 不同時(shí)間點(diǎn)凋亡率 空白對(duì)照組 (n=5) 膿毒血癥組 (n=5) F P 5h（%） 61.42±7.82 18.64±3.68 50.82 P＜0.05 10h（%） 64.91±4.16 27.90±6.35 119.31 P＜0.05 20h（%） 81.25±11.67 34.46±3.21 122.552 P＜0.05

274膿毒血癥病人PMN趨化性受到抑制fMLP為PMN的趨化物，使用瓊脂糖凝膠法檢測(cè)各組PMN趨化性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖1-3和圖1-4所示：膿毒血癥病人PMN趨化距離為1215.33±17.89μm，顯著小于正常對(duì)照組（1432.67±11.67μm）差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明，膿毒血癥病人體內(nèi)PMN的趨化性明顯受到抑制。圖1-3PMN趨化性實(shí)驗(yàn)結(jié)果注：與空白對(duì)照組相比*P＜0.05；Figure1-3ExperimentalresultsofchemotaxisofneutrophilsNote:Comparedwiththeblankcontrolgroup,*P＜0.05A：正常對(duì)照組B：膿毒血癥組圖1-4PMN趨化性Figure1-4Chemotaxisofneutrophils

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值在膿毒癥診斷及預(yù)后評(píng)估中的作用[J]. 蔣劍文,郭端,蔣涵,賈超.  海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2019(19)
[2]膿毒血癥患兒血脂、乳酸水平變化與預(yù)后關(guān)系的探討[J]. 譚曉明,李梅愛(ài),鄺婉儀.  國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2016(16)



本文編號(hào)：3414573