背景和目的：膿毒癥（sepsis）是指由感染引起的全身性炎癥反應(yīng)綜合征,是創(chuàng)傷、燒傷、術(shù)后感染和危重病的常見并發(fā)癥,可進一步發(fā)展成嚴重膿毒癥、膿毒性休克和器官功能障礙綜合征,甚至導(dǎo)致死亡。通過對雙胞胎和收養(yǎng)子的研究發(fā)現(xiàn)遺傳因素在感染性疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸中起著重要的作用。遺傳關(guān)聯(lián)研究顯示多種炎癥基因的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism, SNP）和膿毒癥易感性相關(guān)。如白細胞介素6（interleukin6, IL6）啟動子區(qū)的-174G/C可產(chǎn)生新的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點,與膿毒癥發(fā)病風(fēng)險顯著相關(guān)。纖溶酶原激活物抑制劑1（plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1）基因啟動子區(qū)的5G/4G多態(tài)性與膿毒性休克的轉(zhuǎn)歸相關(guān),攜帶4G/4G基因型的膿毒癥患者更易發(fā)生休克�？梢�,機體的遺傳因素在膿毒癥的發(fā)生、發(fā)展和臨床轉(zhuǎn)歸中起著重要的作用。本研究旨在鑒定與膿毒癥發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸相關(guān)的易感基因和易感SNPs,并初步探討它們的作用機制。材料和方法：本研究基于候選基因的研究策略,采用回顧性病例-對照實驗設(shè)計,對膿毒癥的遺傳因素... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
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摘要
Abstract
前言
第一章 基于候選基因的膿毒癥遺傳關(guān)聯(lián)研究
    第一節(jié) 材料與方法
        1 研究人群的招募
            1.1 膿毒癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)
            1.2 病例和對照的入選和排除標(biāo)準(zhǔn)
            1.3 臨床和社會人口學(xué)資料的收集
        2 候選基因和SNPs的選擇
        3 儀器設(shè)備
        4 實驗試劑
            4.1 試劑及耗材
            4.2 試劑配制
        5 實驗方法
            5.1 DNA的提取方法
            5.2 SNPs的分型方法
        6 統(tǒng)計分析方法
    第二節(jié) 結(jié)果
        1 入選樣本的社會人口學(xué)資料及臨床特征
        2 候選基因和候選SNPs
        3 SNPs的分型結(jié)果
            3.1 SNPs分型結(jié)果的質(zhì)量控制
            3.2 SNPs分型結(jié)果圖
        4 遺傳關(guān)聯(lián)分析結(jié)果
            4.1 膿毒癥易感性的關(guān)聯(lián)分析
            4.2 膿毒癥嚴重程度的關(guān)聯(lián)分析
        5 關(guān)聯(lián)SNPs的分析和注釋
            5.1 SELE-rs4656700的分析和注釋
            5.2 NOS2-rs2297518的分析和注釋
            5.3 IRAK4-rs4251569的分析和注釋
    第三節(jié) 小結(jié)
第二章 顯著關(guān)聯(lián)的SNPs的功能研究
    第一節(jié) 材料與方法
        1 儀器設(shè)備
        2 實驗試劑
            2.1 試劑及耗材
            2.2 試劑配制
        3 細胞培養(yǎng)
            3.1 永生化細胞系的培養(yǎng)
            3.2 RAW264.7細胞系的培養(yǎng)
        4 RNA的提取和cDNA的制備
            4.1 RNA的提取
            4.2 cDNA的制備
        5 NOS2活性的檢測
            5.1 rs2297518在永生化細胞系中的分型
            5.2 LPS刺激體系
            5.3 NOS2活性檢測
        6 等位表達不平衡實驗
            6.1 rs4251569在永生化細胞系中的分型
            6.2 LPS刺激體系
            6.3 TaqMan qPCR實驗
    第二節(jié) 結(jié)果和討論
        1 NOS2活性實驗的結(jié)果和討論
            1.1 rs2297518在永生化細胞系中的分型結(jié)果
            1.2 NOS2活性實驗的結(jié)果
            1.3 NOS2-rs2297518與膿毒性休克易感性關(guān)聯(lián)結(jié)果的討論
        2 IRAK4等位表達不平衡實驗的結(jié)果和討論
            2.1 rs4251569在永生化細胞系中的分型結(jié)果
            2.2 等位表達不平衡實驗的結(jié)果
            2.3 IRAK4-rs4251569與膿毒癥易感性關(guān)聯(lián)結(jié)果的討論
    第三節(jié) 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
附表
論文圖表索引
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]外科重癥監(jiān)護室645例膿毒癥患者臨床流行病學(xué)調(diào)查[J]. 王鳴,彭煒,蔡敏,季剛.  中國危重病急救醫(yī)學(xué). 2006(02)



本文編號：3304767