慢性間歇性低氧對心肌梗死急性期小鼠C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9的表達(dá)及對心功能的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-07-22 18:47
目的:評價(jià)慢性間歇性低氧(CIH)對心肌梗死急性期小鼠心肌組織中C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9(CTRP9)的表達(dá)及心功能的影響。方法:將36只,雄性,C57BL/6野生型小鼠,隨機(jī)分為常氧(NOR)組(n=18)和CIH組(n=18)。將CIH組小鼠放入氧氣濃度在6%~21%之間循環(huán)的低氧艙內(nèi)28 d,同時(shí)NOR組在常氧環(huán)境中飼養(yǎng)。28 d后兩組小鼠均結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈建立心肌梗死模型。于結(jié)扎后3 d(n=6)、7 d(n=6)和14 d(n=6)時(shí)利用多普勒超聲評估小鼠左心室結(jié)構(gòu)與功能,然后將其處死。在結(jié)扎后3 d、7d時(shí)分別用免疫印跡法及RT-PCR法檢測心肌中CTRP9表達(dá)、ELISA法檢測血漿中CTRP9濃度以及用MASSON染色比較各組心肌纖維化面積。結(jié)果:NOR組和CIH組小鼠在冠狀動(dòng)脈結(jié)扎后3、7及14 d時(shí)的左心室內(nèi)徑均逐漸增加(P<0.001),LVEF和縮短分?jǐn)?shù)(FS)均逐漸降低(P<0.001)。在結(jié)扎后3 d時(shí),與NOR組相比,CIH組小鼠心肌組織中CTRP9的表達(dá)和血漿中CTRP9濃度明顯升高(P<0.05;P<0.01),纖維化面積明顯減...
【文章來源】:心肺血管病雜志. 2020,39(04)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
各組小鼠心臟多普勒超聲圖
CIH和NOR組小鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)扎后3 d的心臟多普勒超聲檢測結(jié)果
提取小鼠心肌組織蛋白,冰上裂解,制備心臟組織勻漿,離心后取上清液存于EP管中。采用BCA法測定蛋白濃度,加裂解液保存于-80 ℃冰箱備用。進(jìn)行SDS-PAGE后,將蛋白轉(zhuǎn)至PVDF膜上。用5% BSA封閉1 h后,孵育相應(yīng)一抗4 ℃慢搖過夜,恢復(fù)室溫后,TBST清洗,室溫慢搖1 h孵育二抗,膠片發(fā)光,并用Image分析軟件進(jìn)行各條帶吸光度值計(jì)算。目的蛋白均與GAPDH蛋白校準(zhǔn)。(7) RT-PCR法檢測小鼠心肌CTRP9
本文編號:3297697
【文章來源】:心肺血管病雜志. 2020,39(04)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
各組小鼠心臟多普勒超聲圖
CIH和NOR組小鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)扎后3 d的心臟多普勒超聲檢測結(jié)果
提取小鼠心肌組織蛋白,冰上裂解,制備心臟組織勻漿,離心后取上清液存于EP管中。采用BCA法測定蛋白濃度,加裂解液保存于-80 ℃冰箱備用。進(jìn)行SDS-PAGE后,將蛋白轉(zhuǎn)至PVDF膜上。用5% BSA封閉1 h后,孵育相應(yīng)一抗4 ℃慢搖過夜,恢復(fù)室溫后,TBST清洗,室溫慢搖1 h孵育二抗,膠片發(fā)光,并用Image分析軟件進(jìn)行各條帶吸光度值計(jì)算。目的蛋白均與GAPDH蛋白校準(zhǔn)。(7) RT-PCR法檢測小鼠心肌CTRP9
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