目的:探討Caspase-1介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡在膿毒癥心肌損傷過程中的作用及其可能的作用機(jī)制。方法:1.雄性C57BL/6小鼠,6-8w,行盲腸穿刺結(jié)扎術(shù)（Cecal ligation and puncture,CLP）構(gòu)建膿毒癥模型,分別于造模后0h、8h、16h及24h取材,病理學(xué)檢查評(píng)定小鼠心肌損傷程度。2.將6-8w雄性C57BL/6小鼠分為三組:對(duì)照組（control）、模型組（model）、干預(yù)組（intervention）,模型組行盲腸穿刺結(jié)扎術(shù)（CLP）構(gòu)建膿毒癥模型,對(duì)照組只做開腹探查,不做盲腸穿刺結(jié)扎,干預(yù)組行盲腸穿刺結(jié)扎術(shù)之前1小時(shí)先腹腔注射Caspase-1的抑制劑（Ac-YVAD-cmk）進(jìn)行預(yù)處理,造模后24h小時(shí)取材,進(jìn)行心肌蘇木精-伊紅染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE）染色、透射及掃描電鏡檢查;用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）比較三組小鼠心肌組織勻漿中IL-6、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白I（cTn-I）等細(xì)胞因子的水平高低,用蛋白免疫印跡法（W... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠膿毒癥模型的制備

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文23結(jié)果1小鼠造模后的表現(xiàn)與正常小鼠相比較，行CLP手術(shù)后的小鼠逐漸出現(xiàn)活動(dòng)度下降，毛發(fā)光澤消失，食欲下降，并偶有出現(xiàn)寒戰(zhàn)癥狀，眼部有明顯分泌物，糞便不成型，呈稀便。而干預(yù)組小鼠的一般表現(xiàn)介于對(duì)照組和模型組之間。2小鼠心肌組織HE染色觀察結(jié)果2.1按時(shí)間分組的小鼠心肌組織HE結(jié)果造模后0小時(shí)的小鼠心肌組織HE染色顯示為正常心肌組織，細(xì)胞排列緊密，心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，閏盤結(jié)構(gòu)可見，組織內(nèi)無細(xì)胞水腫，也無炎性細(xì)胞浸潤；造模后8小時(shí)后的小鼠心肌組織HE染色可見心肌組織大致正常，僅可見局部組織有水腫表現(xiàn)，心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本完整，未見明顯炎性細(xì)胞浸潤；造模后16小時(shí)的小鼠心肌組織HE染色可見多處組織水腫，并有少量炎性細(xì)胞浸潤，心肌組織間隙增寬，少量心肌細(xì)胞損傷；造模后24小時(shí)的小鼠心肌組織HE染色顯示大片的心肌細(xì)胞損傷，組織內(nèi)可見明顯的炎性細(xì)胞浸潤，組織間隙明顯增寬。詳見圖2。0h8h16h24h圖2造模后不同時(shí)間點(diǎn)小鼠心肌組織HE染色結(jié)果（HE×400）

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文242.2按處理分組的小鼠心肌組織HE結(jié)果對(duì)照組小鼠心肌組織HE染色結(jié)果顯示心肌組織正常，細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞內(nèi)可見閏盤結(jié)構(gòu)，組織中無水腫及炎性細(xì)胞浸潤；模型組小鼠心肌組織HE染色結(jié)果顯示心肌細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，心肌組織間隙明顯增寬，組織中可見明顯的細(xì)胞水腫及炎性細(xì)胞浸潤；干預(yù)組小鼠心肌組織HE染色結(jié)果顯示心肌組織局部水腫及炎性細(xì)胞浸潤，可見少量心肌細(xì)胞的壞死。詳見圖3。對(duì)照組模型組干預(yù)組圖3造模后24小時(shí)不同處理組小鼠心肌組織HE染色結(jié)果（HE×400）3小鼠心肌組織電鏡切片結(jié)果3.1透射電鏡的觀察結(jié)果觀察電鏡照片可發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組小鼠心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞內(nèi)線粒體形態(tài)正常，線粒體嵴結(jié)構(gòu)可見；與對(duì)照組相比較，模型組小鼠心肌細(xì)胞膜的連續(xù)性被破壞，細(xì)胞內(nèi)線粒體形態(tài)明顯異常，線粒體嵴消失，同時(shí)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量游離的白色空泡狀的脂肪滴，說明線粒體功能受到影響；與模型組相比較，干預(yù)組小鼠心肌細(xì)胞膜的完整性較好，線粒體結(jié)構(gòu)基本正常，偶有可見線粒體嵴結(jié)構(gòu)破壞，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)也可見游離脂滴，但數(shù)量較少。詳見圖4。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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