急性肺損傷小鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能降低
發(fā)布時(shí)間:2021-06-15 13:58
目的探討急性肺損傷(ALI)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的變化及其影響因素。方法昆明種小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、ALI模型組,脂多糖經(jīng)氣道滴入激發(fā)構(gòu)建ALI模型小鼠;通過支氣管肺泡灌洗獲取肺泡巨噬細(xì)胞(AM),流式細(xì)胞術(shù)及熒光顯微鏡觀察ALI小鼠AM吞噬功能的變化;免疫印跡與ELISA檢測ALI小鼠肺組織白介素-33(IL-33)的表達(dá)和分泌情況;ELISA檢測不同濃度脂多糖刺激肺泡上皮細(xì)胞株MLE-12細(xì)胞IL-33分泌的情況;采用不同濃度的脂多糖和IL-33作用正常組AM,觀察這些刺激因素對(duì)AM吞噬熒光微球的影響。結(jié)果與正常小鼠AM(75.1%±3.0)%相比,ALI小鼠AM吞噬熒光微球百分率(57.0±4.3)%明顯降低,但ALI小鼠肺組織IL-33的表達(dá)和支氣管肺泡灌洗液中IL-33的分泌均明顯升高(P<0.05);脂多糖(100~1000 ng/mL)促進(jìn)肺泡上皮細(xì)胞IL-33分泌增加(P<0.01);脂多糖(10~500 ng/mL)和IL-33(100 ng/mL)均明顯抑制了AM的吞噬功能(P<0.05)。結(jié)論 ALI小鼠AM吞噬功能降低,這可能是由于脂多糖...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,40(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
圖2 分離的AM FCM的鑒定
不同濃度IL-33刺激來自于正常小鼠的AM 12 h后,再與FITC標(biāo)記的微球孵育2 h。流式細(xì)胞術(shù)檢測AM吞噬熒光微球。IL-33(100 ng/mL)抑制AM對(duì)熒光微球的吞噬(圖7)。3 討論
AM是Siglec F+CD11c+表型細(xì)胞[13]。采用本研究材料與方法中1.5方法獲取的AM,經(jīng)FCM檢測,Siglec F+CD11c+細(xì)胞的純度大于95%(圖2)。取正常對(duì)照組和ALI模型小鼠AM,與FITC標(biāo)記的熒光微球共孵育2 h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測AM吞噬熒光微球的情況(圖3),與正常對(duì)照組(75.1±3.0)%相比,ALI組AM吞噬熒光微球的比率(57.0±4.3)%明顯降低,熒光顯微鏡的觀察顯示ALI小鼠AM吞噬功能減弱(圖4)。2.2 脂多糖的刺激削弱AM的吞噬功能
本文編號(hào):3231182
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,40(03)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
圖2 分離的AM FCM的鑒定
不同濃度IL-33刺激來自于正常小鼠的AM 12 h后,再與FITC標(biāo)記的微球孵育2 h。流式細(xì)胞術(shù)檢測AM吞噬熒光微球。IL-33(100 ng/mL)抑制AM對(duì)熒光微球的吞噬(圖7)。3 討論
AM是Siglec F+CD11c+表型細(xì)胞[13]。采用本研究材料與方法中1.5方法獲取的AM,經(jīng)FCM檢測,Siglec F+CD11c+細(xì)胞的純度大于95%(圖2)。取正常對(duì)照組和ALI模型小鼠AM,與FITC標(biāo)記的熒光微球共孵育2 h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測AM吞噬熒光微球的情況(圖3),與正常對(duì)照組(75.1±3.0)%相比,ALI組AM吞噬熒光微球的比率(57.0±4.3)%明顯降低,熒光顯微鏡的觀察顯示ALI小鼠AM吞噬功能減弱(圖4)。2.2 脂多糖的刺激削弱AM的吞噬功能
本文編號(hào):3231182
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