【摘要】：目的顱腦損傷患者往往多伴有胃腸道功能障礙,而腸道菌群在維持胃腸道生態(tài)平衡中具有重要作用,可通過(guò)迷走神經(jīng)系統(tǒng)和腸神經(jīng)系統(tǒng)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生相互作用。我們推測(cè)腸道菌群可能與顱腦損傷患者的病理改變以及胃腸道癥狀有密切聯(lián)系。本研究擬探討顱腦損傷患者與健康對(duì)照組人群腸道菌群微生態(tài)結(jié)構(gòu)差異和紊亂特征;經(jīng)益生菌干預(yù)治療后,觀察顱腦損傷患者腸道菌群恢復(fù)特點(diǎn),探索顱腦損傷與腸道菌群之間的關(guān)系,揭示腸道菌群在顱腦損傷病理改變中的作用,以求為顱腦損傷的診治提供新的輔助治療,進(jìn)而改善患者的預(yù)后。方法根據(jù)病例對(duì)照研究,本研究第一部分選取24例中重型顱腦損傷患者和10健康對(duì)照志愿者的糞便樣本為研究對(duì)象。基于IonS5~(TM)XL測(cè)序平臺(tái)和多元統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢測(cè)腸道菌群16S rRNA的V4序列的多樣性,揭示顱腦創(chuàng)傷患者和健康對(duì)照組群落結(jié)構(gòu)的差異特征。本研究第二部分選取6例中重型顱腦損傷患者和8例經(jīng)益生菌干預(yù)治療后的顱腦損傷患者的入院首次糞便樣本為研究對(duì)象,分析益生菌對(duì)顱腦損傷患者腸道菌群的作用。此外,利用Tax4Fun工具預(yù)測(cè)腸道菌群的基因功能。結(jié)果本研究發(fā)現(xiàn)健康對(duì)照人群和顱腦損傷患者的腸道菌群優(yōu)勢(shì)菌門(mén)相同,都是Firmicutes(厚壁菌門(mén))、Bacteroides(擬桿菌門(mén))、Proteobacteria(變形菌門(mén))。健康對(duì)照組的Observed species、Chao1指數(shù)均顯著低于顱腦損傷組(P0.05);但兩組的Shannon、Simpson指數(shù)未見(jiàn)顯著差異(P0.05)。顱腦損傷患者菌群失衡主要表現(xiàn)為Firmicutes(厚壁菌門(mén))、Actinobacteria(放線(xiàn)菌門(mén))、Blautia、Lachnospiraceae(毛螺菌科)、Ruminococcaceae(瘤胃菌科)、Faecalibacterium(柔嫩梭菌屬)、Bifidobacteriaceae(雙歧桿菌科)相對(duì)豐度較健康對(duì)照人群顯著降低,變形菌門(mén)、Akkermansia muciniphila、Enterococcus(腸球菌屬)相對(duì)豐度較健康對(duì)照人群顯著增高。經(jīng)益生菌干預(yù)治療后,顱腦損傷患者腸道菌群在Clostridiales(梭菌目)、Blautia、Faecalibacterium(柔嫩梭菌屬)、unidentified Lachnospiraceae(未分類(lèi)毛螺菌科)、Bifidobacterium(雙歧桿菌屬)、Ruminococcus sp.5_1_39BFAA、Subdoligranulum、Eubacterium hallii(霍氏真桿菌)等益生菌增加;而Enterococcaceae(腸球菌科)、Enterococcus(腸球菌屬)等致病菌降低。此外,Tax4Fun功能預(yù)測(cè)顯示,顱腦損傷患者腸道菌群的遺傳信息加工、環(huán)境信息加工、細(xì)胞過(guò)程功能作用較健康對(duì)照人群顯著減弱,組織系統(tǒng)、新陳代謝、人類(lèi)疾病和未分類(lèi)功能作用較健康對(duì)照組增強(qiáng);而經(jīng)益生菌干預(yù)治療后,患者的遺傳信息加工、環(huán)境信息加工、細(xì)胞過(guò)程功能作用得到增強(qiáng)。結(jié)論本研究發(fā)現(xiàn)顱腦損傷患者腸道菌群與健康對(duì)照組人群具有顯著的差異,主要表現(xiàn)為降解纖維素、產(chǎn)生短鏈脂肪酸的等有益菌減少以及條件致病菌的增加。顱腦損傷患者經(jīng)益生菌干預(yù)治療后,主要表現(xiàn)為降解纖維素等有益菌增加以及條件致病菌的減少。根據(jù)Tax4Fun預(yù)測(cè)結(jié)果證明顱腦損傷患者腸道菌群與健康人群在生長(zhǎng)代謝、信息傳遞等方面存在差異,顱腦損傷患者的腸道菌群功能受到明顯破壞;口服益生菌可促進(jìn)顱腦損傷患者腸道菌群的恢復(fù)。
【圖文】：

基本信息 PT 組 HC 組 P 值例數(shù)性別男女年齡2419550.41±13.40109148.9±8.970.6440.912樣性分析曲線(xiàn)稀釋曲線(xiàn)，查看樣品測(cè)序深度，了解測(cè)序數(shù)據(jù)量的合理味著測(cè)序數(shù)據(jù)量漸進(jìn)合理，測(cè)試的深度已經(jīng)覆蓋到樣本曲線(xiàn)見(jiàn)圖 2，可以看出開(kāi)始時(shí)曲線(xiàn)上升較快，提示測(cè)序，隨著測(cè)序數(shù)據(jù)增加，曲線(xiàn)趨向平坦，繼續(xù)添加樣本，明本研究樣品測(cè)序深度足夠，測(cè)序數(shù)據(jù)量合理。

等級(jí)聚類(lèi)曲線(xiàn)（橫坐標(biāo)代表 OTU 等級(jí)，縱坐標(biāo)對(duì)應(yīng)的 OTU 的相對(duì)豐度）2.4α 多樣性分析α 多樣性是檢驗(yàn)單個(gè)樣本內(nèi)多樣性的方法，最基本的測(cè)定是豐富度以及樣到的物種數(shù)量，其主要表示組內(nèi)差異。ACE、Chao1 用于估算物種總數(shù)，表明物種多。Shannon、Simpson 代表菌群多樣性，前一個(gè)數(shù)值越大，后一小，，說(shuō)明物種多樣性高，分布越均勻。HC 組和 PT 組測(cè)序指數(shù)見(jiàn)表 2。H群的 ACE、Chao1 指數(shù)均顯著低于 PT 組（P＜0.05），說(shuō)明 PT 組與 HC 組道內(nèi)菌群較多，豐度指數(shù)高；但各組的 Shannon、Simpson 指數(shù)未見(jiàn)顯著0.05），說(shuō)明兩組腸道菌群多樣性差異不明顯。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R651.15

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5 樂(lè)t帕

本文編號(hào)：2651678