【摘要】：目的探討激活過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)-β對(duì)老齡膿毒血癥大鼠模型肺部炎癥、炎癥指標(biāo)及死亡率的影響。方法選用24月齡雄性SD大鼠,通過(guò)盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)手術(shù)建立膿毒血癥模型,予GW501516 0.25、0.75 mg/kg為低、高劑量組。分別液體復(fù)蘇CLP術(shù)后大鼠,與空白對(duì)照組、單純CLP手術(shù)組比較24、48 h死亡率,運(yùn)用HE染色、免疫組化染色及RT-PCR等方法了解肺組織中PPAR-β及Akt-1、核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB、白細(xì)胞介素(IL)-6的表達(dá)。結(jié)果 (1)24 h死亡率:單純手術(shù)組42.1%,低劑量組10%,高劑量組20%;48 h死亡率:單純手術(shù)組27.3%,低劑量組16.7%,高劑量組50%。(2)RT-PCR:CLP術(shù)后24 h PPAR-β表達(dá)下調(diào),使用GW501516后上調(diào)PPAR-β表達(dá)。CLP手術(shù)打擊可上調(diào)IL-6、NF-κB炎癥因子表達(dá)量,使用GW501516后IL-6、NF-κB表達(dá)量下調(diào),Akt-1表達(dá)量上調(diào)。(3)HE染色:CLP手術(shù)打擊后肺組織中大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺間質(zhì)水腫充血,GW501516處理組肺部炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)水腫減輕。(4)免疫組化:使用GW501516后肺組織中PPAR-β陽(yáng)性細(xì)胞增多。結(jié)論低劑量GW501516(0.25 mg/kg)可降低膿毒血癥老齡大鼠早期死亡率,其機(jī)制與激活A(yù)kt-1、下調(diào)NF-κB有關(guān)。
【圖文】：

顯微鏡下觀察、照相。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用GraphPadPrism5.0軟件，各組間比較使用onewayANOVA檢驗(yàn)或t檢驗(yàn)，不符合條件的使用non-parametric檢驗(yàn)。各組間死亡率比較使用χ2檢驗(yàn)，不符合條件的使用Fisher檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1死亡率CLP術(shù)后24h觀察點(diǎn)，CLP組術(shù)后24h內(nèi)死亡8只(42.1%);使用不同劑量GW501516鹽水復(fù)蘇后，CLP-LD組24h內(nèi)死亡1只(10.0%)，CLP-HD組24h內(nèi)死亡2只(20.0%)。以CLP術(shù)后48h觀察點(diǎn)，CLP-48組48h內(nèi)共死亡3只(27.3%);CLP-LD-48組48h內(nèi)死亡1只(16.7%)，CLP-HD-48組48h內(nèi)死亡3只(50.0%)。2.2肺組織HE染色見(jiàn)圖1。CLP手術(shù)打擊后肺組織中大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺間質(zhì)水腫充血，，GW501516處理組肺部炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)水腫減輕。2.3PPAＲ-β免疫組化染色結(jié)果見(jiàn)圖2。使用GW501516后肺組織中PPAＲ-β陽(yáng)性細(xì)胞增多。2.4ＲT-PCＲ結(jié)果見(jiàn)表2。CLP術(shù)后24hPPAＲ-β表達(dá)下調(diào)，使用GW501516后上調(diào)PPAＲ-β表達(dá)。CLP手術(shù)打擊可上調(diào)白細(xì)胞介素(IL)-6、核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB等炎癥因子表達(dá)量，使用GW501516后IL-6、NF-κB表達(dá)量下調(diào)，Akt-1表達(dá)上調(diào)。見(jiàn)表1。圖1老齡大鼠肺組織HE染色(×400)圖2老齡大鼠肺組織PPAＲ-β免疫組化染色(×200)表1各組間PPAＲ-β及各因子mＲNA半定量結(jié)果(x±s)指標(biāo)CON組(n=5)CLP-24組(n=8)CLP-LD-24組(n=4)CLP-HD-24組(n=4)PPAＲ-β1.0000±0.42500.5057±0.46751.4260±0.26611.8680±0.0732Akt-10.9999±0.29160.9673±0.56711.8690±0.69550.7283±0.2214NF-κB1.0000±0.29351.3130±0.71101.0980±0.39921.4090±1.0550IL-60.9992±0.55841.4270±0.01461.0790±0.51310.6971±0.3497指標(biāo)CLP-48組(n=11)CLP-LD-48組(n=6)CLP-HD-48組(n=6)NO-CLP-HD-48組(n=2)PPAＲ-β1.4160±0.98791.6370±0.84444.7270±2.8930

組間死亡率比較使用χ2檢驗(yàn)，不符合條件的使用Fisher檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1死亡率CLP術(shù)后24h觀察點(diǎn)，CLP組術(shù)后24h內(nèi)死亡8只(42.1%);使用不同劑量GW501516鹽水復(fù)蘇后，CLP-LD組24h內(nèi)死亡1只(10.0%)，CLP-HD組24h內(nèi)死亡2只(20.0%)。以CLP術(shù)后48h觀察點(diǎn)，CLP-48組48h內(nèi)共死亡3只(27.3%);CLP-LD-48組48h內(nèi)死亡1只(16.7%)，CLP-HD-48組48h內(nèi)死亡3只(50.0%)。2.2肺組織HE染色見(jiàn)圖1。CLP手術(shù)打擊后肺組織中大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肺間質(zhì)水腫充血，GW501516處理組肺部炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、間質(zhì)水腫減輕。2.3PPAＲ-β免疫組化染色結(jié)果見(jiàn)圖2。使用GW501516后肺組織中PPAＲ-β陽(yáng)性細(xì)胞增多。2.4ＲT-PCＲ結(jié)果見(jiàn)表2。CLP術(shù)后24hPPAＲ-β表達(dá)下調(diào)，使用GW501516后上調(diào)PPAＲ-β表達(dá)。CLP手術(shù)打擊可上調(diào)白細(xì)胞介素(IL)-6、核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB等炎癥因子表達(dá)量，使用GW501516后IL-6、NF-κB表達(dá)量下調(diào)，Akt-1表達(dá)上調(diào)。見(jiàn)表1。圖1老齡大鼠肺組織HE染色(×400)圖2老齡大鼠肺組織PPAＲ-β免疫組化染色(×200)表1各組間PPAＲ-β及各因子mＲNA半定量結(jié)果(x±s)指標(biāo)CON組(n=5)CLP-24組(n=8)CLP-LD-24組(n=4)CLP-HD-24組(n=4)PPAＲ-β1.0000±0.42500.5057±0.46751.4260±0.26611.8680±0.0732Akt-10.9999±0.29160.9673±0.56711.8690±0.69550.7283±0.2214NF-κB1.0000±0.29351.3130±0.71101.0980±0.39921.4090±1.0550IL-60.9992±0.55841.4270±0.01461.0790±0.51310.6971±0.3497指標(biāo)CLP-48組(n=11)CLP-LD-48組(n=6)CLP-HD-48組(n=6)NO-CLP-HD-48組(n=2)PPAＲ-β1.4160±0.98791.6370±0.84444.7270±2.89303.1450±0.2464Akt-12.5250±1.30500.9107±0.39021.5830±0.62311.0090±0.0000NF-κB2.4420±2.50001.1760±0.48031.0810±0.42551.1980±0.5066

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1 唐e

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