【摘要】：背景 現(xiàn)代社會，隨著生活的壓力日益增加及搶險救災等非戰(zhàn)斗軍事應急任務的增多，地方和軍隊面臨的應激相關疾病也日益增多。其中，應激性潰瘍表現(xiàn)最為明顯，嚴重影響人們的生活質量及部隊的戰(zhàn)斗力。已有研究表明，應激性潰瘍的發(fā)生是多種因素綜合作用的結果，包括神經(jīng)內分泌的調節(jié)失控、粘膜損傷因素（如胃酸、胃蛋白酶、膽汁）的相對增強及胃粘膜防御屏障作用的減弱等。胃粘膜屏障中上皮細胞及緊密連接尤為重要，但是近年來研究發(fā)現(xiàn)，黏附連接相關蛋白紐蛋白（Vinculin, VCL）和粘著斑激酶（Focal adhension kinase, FAK）在細胞-細胞間及細胞-細胞外基質連接中有要作用，并且通過復雜的信號傳導通路調節(jié)上皮細胞遷移、增殖、凋亡等，然而黏附連接在應激性潰瘍發(fā)病中及粘膜損傷后修復中的作用研究尚屬空白。我科既往研制的主要用于治療消化道出血的中藥復合制劑--止血膠，其主要成分為白芨和阿膠，既有止血作用，又能粘附于糜爛及出血部位，對消化道出血具有顯著療效。因此，研究黏附連接及相關蛋白在應激性潰瘍發(fā)病中的作用以及止血膠對應激性潰瘍的預防作用，對于研究應激性潰瘍的發(fā)生機制及對應激性潰瘍的防治具有極其重要的意義。 目的 1．構建大鼠應激性潰瘍模型，通過大體標本觀察、潰瘍指數(shù)計算以及檢測大鼠血清表皮生長因子（Epidermal growth factor, EGF）、白細胞介素2（Interleukin2,IL-2），血小板活化因子（Platelet activating factor, PAF）水平，證實小平臺-水環(huán)境法能夠成功構建大鼠應激性潰瘍模型，并且探明應激相關細胞因子在小平臺-水環(huán)境法構建的應激性潰瘍中的變化情況； 2．通過對標本行黏附連接相關蛋白VCL、FAK免疫熒光染色，觀察應激性潰瘍發(fā)病中VCL、FAK表達變化情況，分析VCL、FAK表達變化與應激性潰瘍的相關性； 3．給予大鼠止血膠灌胃，觀察大鼠胃粘膜潰瘍指數(shù)、血清EGF、IL-2、PAF水平及胃粘膜VCL、FAK變化情況，進一步探討?zhàn)じ竭B接在應激應激性潰瘍發(fā)病中的作用以及止血膠對應激性潰瘍的預防作用。 方法 依據(jù)睡眠剝奪原理，采用小平臺-水環(huán)境法構建大鼠應激性潰瘍模型，通過大體標本觀察、潰瘍指數(shù)計算、常規(guī)胃粘膜組織HE染色及ELISA法測大鼠血清EGF、IL-2、PAF水平證明模型構建成功；運用免疫熒光化學法檢測大鼠胃粘膜組織中VCL、FAK的表達情況；通過預先給予大鼠止血膠灌胃，觀察止血膠對大鼠應激性潰瘍的預防作用。 結果 1．各應激組大鼠胃粘膜不同程度糜爛、潰瘍、出血，尤其是應激5天及7天組，糜爛融合成片并有多處陳舊性血痂覆蓋；各應激組大鼠的潰瘍指數(shù)均較正常對照組明顯增加（P0.05）；EGF、IL-2水平隨應激程度加重而下降（P0.05），PAF水平隨應激程度加重而升高（P0.05）。 2．隨著應激時間延長及胃粘膜損傷程度加重，胃黏膜VCL的表達呈現(xiàn)下降趨勢，VCL熒光光度值與潰瘍指數(shù)存在負相關，r=-0.839，（P0.01）；FAK表達也呈下降趨勢，F(xiàn)AK熒光光度值與潰瘍指數(shù)存在負相關，r=-0.811，（P0.01）。 3．給予大鼠止血膠灌胃，止血膠組胃粘膜潰瘍指數(shù)較單純應激組明顯下降（P0.01），EGF、IL-2較單純應激組升高（P0.05），而PAF較單純應激組下降（P0.05）；VCL、FAK表達水平較單純應激組升高（P0.05）。 結論 小平臺-水環(huán)境法可成功構建大鼠應激性潰瘍模型；黏附連接相關蛋白VCL、FAK在應激性潰瘍的發(fā)生中表達下降，由此推論黏附連接與應激性潰瘍的發(fā)生有關；止血膠對于大鼠應激性潰瘍的發(fā)生有一定的預防作用。
【圖文】：

將各組大鼠血清樣本逐漸復溫后，按照 ELISA 試劑盒說明逐步操作。2.6 統(tǒng)計學分析潰瘍指數(shù)及血清 EGF、IL-2、PAF 水平數(shù)據(jù)以 x±s 表示，并以 SPSS 13.0 進行處理，組建比較采用 ANOVA 方差分析法，以 α=0.05 為檢驗標準進行比較。3 結果3.1 睡眠剝奪對大鼠胃粘膜損傷及潰瘍指數(shù)（UI）正常組及大平臺組胃粘膜光滑，色澤正常；應激 1 天組可見胃粘膜可見散在的點狀糜爛，余粘膜光滑；D 組看見較為密集的點狀、條狀糜爛，表面可見點狀的血痂；E 組和 F 組粘膜糜爛更嚴重，，糜爛融合成條片，表明覆蓋黑色血痂，局部覆蓋黃色苔。（如圖 1）

意義（P>0.05）；應激 1 天組、3 天組、5 天組和 7 天組與正常IL-2、PAF 水平的差別有統(tǒng)計學意義（P<0.05），特別是應激對照組比較有顯著差異（P<0.01）。柱狀圖顯示 EGF、IL-2 隨著達呈下降趨勢，PAF 表達呈上升趨勢（表 1、圖 2~4）。睡眠剝奪對大鼠血清 EGF、IL-2、PAF 水平的影響（n=5， 別 EGF IL-2 PAFA 0.42±0.03 4.67±0.2 46.6±4.4B 0.41±0.05 4.52±0.42 48.81±7.C 0.33±0.03 3.8±0.17 55.63±7.D 0.31±0.03 2.58±0.37 75.16±3E 0.21±0.03 1.33±0.32 93.77±4.F 0.22±0.05 1.3±0.28 92.71±5.常組；B 大平臺組；C 1d 組；D 3d 組；E 5d 組；F 7d 組
【學位授予單位】：第四軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R573.1

【引證文獻】

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1 張瑩瑩;張廣慧;王碩;唐紅衛(wèi);;災害后應激性潰瘍研究進展[J];中華災害救援醫(yī)學;2016年12期

2 楊春;;膝關節(jié)置換術圍術期應激性潰瘍發(fā)生預見性護理[J];疾病監(jiān)測與控制;2015年06期

本文編號：2562245