【摘要】：目的：研究過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ共同激活因子-lα(Peroxisomeproliferative activated receptor-γ activation of auxiliary factor1Alpha PGC-1α)對(duì)氧糖剝奪神經(jīng)元的保護(hù)作用及可能機(jī)制探討。 方法：本研究采用原代胚胎小鼠大腦皮層神經(jīng)元作為載體，氧-糖剝奪作為缺血性腦卒中的體外模擬方法，細(xì)胞隨機(jī)分為五組：正常組，氧-糖剝奪（OGD）組；OGD+PGC-1α過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組（過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組）；OGD+PGC-1α iRNA組（干擾質(zhì)粒組），OGD+空載質(zhì)粒（空載質(zhì)粒組）。各組在氧糖剝奪24小時(shí)后，噻唑藍(lán)比色分析法(MTT)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞存活率。流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞死亡率及氧自由基(ROS)量，以采用蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)PGC-1α、解偶聯(lián)蛋白-2（UncouplingProtein-2,UCP2）的表達(dá)，，另外，利用質(zhì)粒干擾技術(shù)抑制PGC-1α的表達(dá)和過(guò)表達(dá)。 結(jié)果：OGD組較正常組神經(jīng)元存活率明顯下降（P＜0.01）；予以PGC-1α過(guò)表達(dá)質(zhì)粒預(yù)處理后，PGC-1α蛋白水平明顯上調(diào)，其神經(jīng)元存活率升高，與OGD組及空載質(zhì)粒組比較具有顯著差異性（P＜0.01），而PGC-1αiRNA質(zhì)粒預(yù)處理后神經(jīng)元存活率明顯降低。OGD組神經(jīng)元死亡率明顯上升，PGC-1α過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組細(xì)胞死亡率下降，與OGD組和空載質(zhì)粒組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，干擾質(zhì)粒組細(xì)胞死亡率明顯升高與PGC-1α過(guò)表達(dá)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。OGD組神經(jīng)元氧自由基（ROS）含量明顯高于正常組升高（P＜0.01)；過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組ROS水平降低，與OGD組及空載質(zhì)粒組ROS含量比較其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，干擾質(zhì)粒組ROS含量明顯升高。研究的結(jié)果還顯示過(guò)表達(dá)組UCP-2表達(dá)較OGD組顯著上調(diào)，經(jīng)PGC-1α干擾質(zhì)粒預(yù)處理后，UCP-2表達(dá)明顯被下調(diào)。 結(jié)論：PGC-α具有抑制氧糖剝奪神經(jīng)毒性作用；PGC-1α可能通過(guò)上調(diào)線粒體UCP-2表達(dá)，抑制氧自由基生成，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective: To study the protective effect and possible mechanism of peroxisome proliferator-activated receptor-activated receptor-activation of auxin factor1Alpha PGC-1. Methods: The primary embryonic mouse cerebral cortex neurons were used as the carrier, and the oxygen-sugar deprivation was used as an in-vitro simulation method of the ischemic stroke. The cells were randomly divided into five groups: normal group, oxygen-sugar deprivation (OGD) group, OGD + PGC-1 and overexpressing plasmid group (over-expression plasmid group). ); OGD + PGC-1, iRNA group (interference plasmid group), OGD + no-load plasmid (no-load plasmid group) ). After a 24-hour deprivation of oxygen for each group, the cell survival was detected by a blue-blue colorimetric assay (MTT). The expression of PGC-1 and the expression of unconjugated protein-2 (UCP2) were detected by flow cytometry. The expression of PGC-1 and the overexpression of PGC-1 were also inhibited by plasmid-interference technique. The results showed that the survival rate of the neurons in the OGD group was significantly lower than that in the normal group (P <0.01); after the pre-treatment of the PGC-1 expression plasmid, the level of the PGC-1 protein was significantly increased, and the survival rate of the neurons was increased, and there was a significant difference with the OGD group and the no-load plasmid group (P <0. 01), and the survival of neurons after pre-treatment of PGC-1-iRNA plasmid In the OGD group, the death rate of the cells increased significantly, and the cell death rate of the PGC-1-overexpressing plasmid group decreased significantly (P <0.01), and the cell death rate of the interfering plasmid group was significantly higher than that of the PGC-1-overexpressing group (P <0.01). The content of ROS in the OGD group was significantly higher than that in the normal group (P <0.01). The ROS level of the overexpressing plasmid group was decreased, and the content of ROS in the OGD group and the no-load plasmid group was statistically significant (P <0.01), and the ROS content of the interfering plasmid group was bright. The results of the study also showed that the expression of UCP-2 in the overexpressing group was up-regulated by the OGD group, and the expression of UCP-2 was obvious after the pretreatment of the PGC-1 interference plasmid. Conclusion: PGC-1 can inhibit the neurotoxicity of oxygen. PGC-1 may play a role in inhibiting the formation of oxygen free radicals by up-regulating the expression of UCP-2 in mitochondria and inhibiting the formation of oxygen free radicals.
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R459.7

【共引文獻(xiàn)】

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4 張?jiān)?李耀康;王敏;尹紅春;王光明;;PPARα在器官移植中的作用初探[J];大理學(xué)院學(xué)報(bào);2012年12期

5 盧穎;王偉銘;;過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ與腎臟纖維化的研究進(jìn)展[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年01期

6 金楠,王憲;過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體與動(dòng)脈粥樣硬化[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2004年01期

7 趙青,陳楠,周同;TGF-β誘導(dǎo)CTGF表達(dá)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及與纖維化形成[J];生命科學(xué);2003年03期

8 楊大春;馬雙陶;楊永健;譚燕;唐兵;李德;張?chǎng)?速曉華;朱峻;;急性冠脈綜合征單核細(xì)胞PPARδ表達(dá)及其與血清MMP-9和TIMP-1的相關(guān)性[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年01期

9 楊大春;馬雙陶;李秀川;楊永健;李德;唐兵;;羅格列酮對(duì)2型糖尿病合并急性冠脈綜合征患者血清TGF-β1及IL-1β的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2011年21期

10 秦瑾;炎癥與動(dòng)脈粥樣硬化[J];實(shí)用心腦肺血管病雜志;2003年02期

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2 蘇宜香;夏延平;;n-3多不飽和脂肪酸影響炎癥及免疫的細(xì)胞機(jī)制研究進(jìn)展[A];營(yíng)養(yǎng)健康新觀察（第二十四期）：營(yíng)養(yǎng)與免疫專題[C];2004年

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9 裴劍浩;吡格列酮對(duì)NOD鼠糖尿病的預(yù)防作用與機(jī)理探討[D];中南大學(xué);2003年

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5 曾曉麗;過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ在慢性阻塞性肺疾病炎癥中的作用[D];蘭州大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：2447071