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脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性呼吸窘迫綜合征中microRNA-27a和PPARγ表達(dá)變化

發(fā)布時(shí)間:2018-10-31 12:03
【摘要】:目的研究脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)誘導(dǎo)小鼠急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)模型中外周血和肺內(nèi)microRNA-27a和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators-activated receptor-γ,PPARγ)表達(dá)變化規(guī)律,探討microRNA-27a和PPARγ在ARDS發(fā)病機(jī)制中的作用。方法將50只8~10周雄性C57BL/6小鼠分為模型組不同給藥時(shí)間(3、6、12、24 h各10只)和對(duì)照組(n=10)。通過(guò)尾靜脈注射LPS建立ARDS模型,通過(guò)組織學(xué)病理評(píng)價(jià)、炎癥反應(yīng)細(xì)胞分泌物表達(dá)水平等炎癥反應(yīng)指標(biāo)評(píng)價(jià)ARDS模型建立的有效性。Western blot和免疫組織化學(xué)(IHC)觀察模型不同時(shí)間點(diǎn)肺內(nèi)PPARγ表達(dá)及變化趨勢(shì);實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)進(jìn)一步研究基因表達(dá)改變情況。結(jié)果與對(duì)照組相比,模型組不同時(shí)間點(diǎn)肺組織病理改變明顯;外周血和肺內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)microRNA-27a表達(dá)明顯增加,外周血各時(shí)間點(diǎn)較變化對(duì)照組增加2~4倍,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[3 h(3.53±0.89),6 h(1.97±0.40),12 h(1.87±0.35),24 h(1.98±0.53),P0.05]。與對(duì)照組相比,肺內(nèi)microRNA-27a 6 h(3.08±0.97)、24 h(3.49±0.94)表達(dá)增加差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;3 h(1.90±0.87)、12 h(1.88±0.62)差異無(wú)意義。PPARγ在蛋白水平表達(dá)明顯減少;基因水平上外周血PPARγ6、12 h表達(dá)降低差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[P0.05,6 h(0.31±0.19),12 h(0.37±0.43)],3(0.70±0.33)、24 h(0.80±0.44)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;肺內(nèi)6、12、24 h表達(dá)降低差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[P0.05,6 h(0.60±0.23),12 h(0.71±0.12),24 h(0.42±0.20)],3 h(0.67±0.36)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 LPS誘導(dǎo)小鼠ARDS模型中,microRNA-27a和PPARγ表達(dá)發(fā)生明顯變化,二者可能參與ARDS發(fā)病過(guò)程。
[Abstract]:Objective to study microRNA-27a and peroxisome proliferator-activated receptor 緯 (peroxisome proliferators-activated receptor- 緯) in peripheral blood and lung of lipopolysaccharide (lipopolysaccharides,LPS) induced acute respiratory distress syndrome (acute respiratory distress syndrome,ARDS) model in mice. To explore the role of microRNA-27a and PPAR 緯 in the pathogenesis of ARDS. Methods 50 male C57BL/6 mice were divided into two groups: model group (n = 10) and control group (n = 10). ARDS model was established by tail vein injection of LPS, and histologically and pathologically evaluated. Inflammatory response indexes such as the level of inflammatory response cell secretion were used to evaluate the effectiveness of ARDS model and immunohistochemical (IHC) to observe the expression and change trend of PPAR 緯 in lung at different time points. Real-time quantitative PCR (qRT-PCR) was used to further study the gene expression changes. Results compared with the control group, the pathological changes of lung tissue in the model group were obvious at different time points. The expression of microRNA-27a in peripheral blood and lung was significantly increased at different time points, and the expression of microRNA-27a in peripheral blood was significantly increased by 2 times than that in control group at different time points [3 h (3.53 鹵0.89), 6 h (1.97 鹵0.40)]. 12 h (1.87 鹵0.35), 24 h (1.98 鹵0.53), P0.05]. Compared with the control group, the expression of microRNA-27a in lung increased significantly at 6 h (3.08 鹵0.97) and 24 h (3.49 鹵0.94). There was no significant difference between 3 h (1.90 鹵0.87) and 12 h (1.88 鹵0.62). The expression of PPAR 緯 was significantly decreased at the protein level. At the gene level, there was no significant difference in the expression of PPAR 緯 at 12 h in peripheral blood [(0.31 鹵0.19), (0.37 鹵0.43)], (3) (0.70 鹵0.33), (0.80 鹵0.44) h (P 0.05), (0.31 鹵0.19), (0.37 鹵0.43), (0.80 鹵0.44), respectively. There was no significant difference in 24 h expression of 6H ~ (12) P ~ (0.05) h (0.60 鹵0.23), 12 h (0.71 鹵0.12), 24 h (0.42 鹵0.20), 3 h (0.67 鹵0.36). Conclusion the expression of microRNA-27a and PPAR 緯 in ARDS model induced by LPS is obviously changed, which may be involved in the pathogenesis of ARDS.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院呼吸內(nèi)科;第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所呼吸內(nèi)科;第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81670070)~~
【分類號(hào)】:R563.8

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本文編號(hào):2302109

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