本文關(guān)鍵詞：海藻酸鈣敷料促進(jìn)大鼠創(chuàng)面愈合的作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《蘇州大學(xué)》 2015年

海藻酸鈣敷料促進(jìn)大鼠創(chuàng)面愈合的作用及機(jī)制研究

汪濤  

【摘要】：目的:探討海藻酸鈣敷料對體外培養(yǎng)的鼠成纖維細(xì)胞(L-929)的毒性和凋亡影響,初步評(píng)價(jià)該材料的細(xì)胞毒性作用并探討對細(xì)胞增殖影響最低的條件。探討海藻酸鈣敷料對大鼠傷口愈合的影響,并觀察在傷口愈合過程中對轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor,TGF-β)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的影響。方法:①采用四唑鹽(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法檢測不同濃度(0%、50%和100%)材料浸提液的吸光度,分別計(jì)算其各濃度成纖維細(xì)胞相對增殖率;②將成纖維細(xì)胞(L-929細(xì)胞)與海藻酸鈣材料共培養(yǎng)72h作為實(shí)驗(yàn)組,采用原位標(biāo)記法(Tunel法)對細(xì)胞死亡類型進(jìn)行檢測,觀察細(xì)胞凋亡情況,并計(jì)算凋亡率,初步評(píng)價(jià)其細(xì)胞相容性;③48只雄性SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組(n=24)。制作大鼠背部皮膚傷口模型,深至皮下在創(chuàng)面局部以海藻酸鈣敷料(實(shí)驗(yàn)組)或棉紗布(對照組)包扎,觀察傷后3、7、14 d創(chuàng)面愈合率的變化;于傷后3、7、14 d取創(chuàng)面組織,石蠟包埋、切片、分別行HE和Masson染色,觀察血管橫斷面面積與肉芽組織面積的比值。肉芽組織厚度和膠原蛋白含量(膠原面積與創(chuàng)面面積比的變化),并進(jìn)行組織學(xué)和VEGF、TGF-β和IL-6免疫組化染色觀察。結(jié)果:①M(fèi)TT檢測結(jié)果顯示:各濃度浸提液均出現(xiàn)較高相對細(xì)胞增殖率,其細(xì)胞毒性均為0或1級(jí)。②TUNEL結(jié)果提示兩組均出現(xiàn)凋亡細(xì)胞,且隨培養(yǎng)時(shí)間呈現(xiàn)持續(xù)升高趨勢,實(shí)驗(yàn)組凋亡檢出率與對照組相比無明顯差異。③術(shù)后3天兩組肉芽組織較薄、炎癥反應(yīng)較重。術(shù)后7天對照組肉芽組織厚度落后于實(shí)驗(yàn)組;14天時(shí)實(shí)驗(yàn)組新生肉芽組織已基本修復(fù)完成;對照組炎癥反應(yīng)較前減輕。免疫組化結(jié)果示術(shù)后各期實(shí)驗(yàn)組傷口VEGF和TGF-β含量與對照組相比均無明顯差異,術(shù)后3和7天實(shí)驗(yàn)組IL-6含量低于對照組,14天時(shí)兩組無明顯差別。④術(shù)后第3天時(shí)實(shí)驗(yàn)組大鼠較對照組創(chuàng)面愈合率明顯增加(P0.05)。術(shù)后第3天實(shí)驗(yàn)組與對照組組肉芽組織厚度[分別為(1540.0±118.5)μm和(1504.6±131.8)μm,P0.05]和新生肉芽組織血管面積與肉芽組織面積之比分別為[(11.8±0.73)%和(11.3±0.67)%,P0.05]差異均無顯著性,但術(shù)后3 d實(shí)驗(yàn)組膠原蛋白面積較對照組明顯增多[分別為(45.7±5.3)%和(11.6±2.5)%,P0.05];術(shù)后第7天實(shí)驗(yàn)組以上指標(biāo)均高于對照組(P0.05),第14天時(shí)這種趨勢依然存在(P0.05)。結(jié)論:海藻酸鈣敷料無細(xì)胞毒性,無明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,具有良好細(xì)胞相容性。且炎癥反應(yīng)輕,提高傷口皮膚組織內(nèi)的膠原蛋白含量,加速創(chuàng)面肉芽組織形成,促進(jìn)傷口的愈合。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R641
【目錄】：

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