本文選題：腦外傷 + 神經(jīng)干細(xì)胞��； 參考：《西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2016年04期

【摘要】：目的探討腦外傷后T型鈣通道對神經(jīng)干細(xì)胞的誘導(dǎo)作用及其相關(guān)機制。方法構(gòu)建成年大鼠腦損傷模型,分為手術(shù)組和手術(shù)+米貝地爾組(米貝地爾組),并另設(shè)正常對照組、假手術(shù)組。分離側(cè)腦室壁的腦室下層(subventricular zone,SVZ)細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞懸浮培養(yǎng)法進行培養(yǎng)并鑒定其干細(xì)胞性質(zhì);在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基中加入不同劑量的米貝地爾,通過計數(shù)神經(jīng)干細(xì)胞球、噻唑藍(lán)(MTT)法分析米貝地爾對神經(jīng)干細(xì)胞增殖抑制作用,計算米貝地爾對神經(jīng)干細(xì)胞的半抑制濃度(IC50),Western blot法檢測腦組織中Cav3.2以及神經(jīng)干細(xì)胞中Cav3.2、Cyclin A和caspase-3的蛋白表達。結(jié)果體內(nèi)實驗表明,手術(shù)組中神經(jīng)干細(xì)胞的增殖能力顯著高于正常對照組和假手術(shù)組,應(yīng)用米貝地爾腹腔注射抑制腦組織中T型鈣通道后,神經(jīng)干細(xì)胞的增殖明顯降低。體外細(xì)胞實驗表明,米貝地爾能夠明顯抑制神經(jīng)干細(xì)胞球的形成,MTT法顯示米貝地爾濃度大于5μmol/L時,可顯著抑制細(xì)胞增殖,5、10、20μmol/L組的吸光度(A值)與對照組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。IC50值為8.93μmol/L。Western blot檢測結(jié)果顯示,米貝地爾組的Cav3.2蛋白和Cyclin A蛋白的表達顯著降低,caspase-3蛋白的表達顯著升高。結(jié)論腦外傷后可激活腦組織中T型鈣通道,上調(diào)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖能力。
[Abstract]:Objective to investigate the induction effect of T-type calcium channel on neural stem cells after brain injury and its related mechanism. Methods the adult rat brain injury model was established and divided into two groups: the operation group and the operation group (mibedil group), and the normal control group and the sham operation group. The subventricular SVZ cells were isolated from the lateral ventricular wall, cultured with neural stem cell suspension culture method and identified their stem cell properties, different doses of Mibedil were added to the neural stem cell culture medium, and the neural stem cell balls were counted. The inhibitory effect of mibedil on the proliferation of neural stem cells was analyzed by using thiazolyl blue method. The semi-inhibitory concentration of mibedil on neural stem cells was calculated. The protein expression of Cav3.2 and Cav3.2 Cyclin A and caspase-3 in brain tissue and neural stem cells were detected by IC50 blot. Results in vivo experiments showed that the proliferation of neural stem cells in the operation group was significantly higher than that in the normal control group and the sham operation group. The proliferation of neural stem cells was significantly decreased after intraperitoneal injection of Mibedil to inhibit T-type calcium channel in brain tissue. In vitro cell experiments showed that mibedil could significantly inhibit the formation of neural stem cell spheres. MTT assay showed that when the concentration of mibedil was more than 5 渭 mol / L, it could significantly inhibit the cell proliferation and the absorbance of the group with 10 ~ 10 渭 mol / L) compared with the control group. The results of Western blot analysis showed that the expression of Cav3.2 protein and Cyclin A protein in Mibedil group significantly decreased the expression of caspase-3 protein. Conclusion after brain injury, T-type calcium channel can be activated and the proliferation of neural stem cells can be upregulated.
【作者單位】： 西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科;第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院神經(jīng)外科;西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】：陜西省社會發(fā)展攻關(guān)項目資助(No.2014K11-01-01-12)~~
【分類號】：R651.15

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本文編號：2022368