本文選題：辛伐他汀 + 納米粒��； 參考：《浙江大學(xué)》2013年碩士論文

【摘要】：目的： 初步嘗試辛伐他汀納米粒的制備,研究其理化性質(zhì),并探討其對(duì)脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激的體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響。 方法： (1)采用溶劑擴(kuò)散法方法制備辛伐他汀納米粒,粒度與Zeta電位分析儀測(cè)定納米粒粒徑,以高效液相色譜法測(cè)定藥物包封率和載藥量。(2)采用胰酶消化法進(jìn)行人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng),以免疫組化法對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定。(3)通過LPS刺激臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞制造膿毒癥細(xì)胞模型,分為空白對(duì)照組,LPS組,辛伐他汀靜脈制劑組(LPS+辛伐他汀靜脈制劑)及辛伐他汀納米粒組(LPS+辛伐他汀納米粒),培養(yǎng)6h,12h,24h,予MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性。共培養(yǎng)12h后流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞調(diào)亡率,并用蛋白印跡法(western blot)檢測(cè)四組Bcl-2及Bax蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： (1)采用溶劑擴(kuò)散法成功制備辛伐他汀納米粒,測(cè)其直徑在350.3±156.9nm,包封率65.71%,載藥量3.29%。(2)原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞梭形,連接呈片后顯現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞形狀,呈鋪路石樣。人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Ⅷ因子相關(guān)抗原抗體鑒定為內(nèi)皮細(xì)胞。(3)細(xì)胞活性比較：共培養(yǎng)6h后LPS組的細(xì)胞活性明顯低于空白對(duì)照組(P0.05),辛伐他汀靜脈制劑組及辛伐他汀納米粒組細(xì)胞活性均高于LPS組(P0.05),辛伐他汀納米粒組細(xì)胞活和辛伐他汀靜脈制劑組活性無(wú)明顯差別(P0.05)。共培養(yǎng)12h及24h細(xì)胞活性比較：LPS組的細(xì)胞活性明顯低于空白對(duì)照組(P0.05),辛伐他汀靜脈制劑組及辛伐他汀納米粒組細(xì)胞活性均高于LPS組(P0.05),辛伐他汀納米粒組細(xì)胞活性高于辛伐他汀靜脈制劑組(P0.05)。12h和24h組間活性無(wú)明顯差異。共培養(yǎng)12h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率結(jié)果：LPS組的凋亡率明顯高于空白對(duì)照組(P0.05),辛伐他汀靜脈制劑組凋亡率及辛伐他汀納米粒組均低于LPS組(P0.05),辛伐他汀納米粒組凋亡率低于辛伐他汀靜脈制劑組(P0.05). Western Blot檢測(cè)各組Bc1-2, Bax蛋白結(jié)果：LPS組Bcl-2蛋白的表達(dá)低于空白對(duì)照組(P0.05),Bax蛋白的表達(dá)明顯高于空白對(duì)照組(P0.05)。辛伐他汀靜脈制劑組及辛伐他汀納米粒組Bcl-2蛋白的表達(dá)均高于LPS組(P0.05),低于空白對(duì)照組((P0.05), Bax蛋白的表達(dá)明顯低于LPS組(P0.05),高于空白對(duì)照組(P0.05)。辛伐他汀納米粒組Bcl-2蛋白的表達(dá)高于辛伐他汀靜脈制劑組(P0.05), Bax蛋白的表達(dá)低于辛伐他汀靜脈制劑組(P0.05)。 結(jié)論： (1)采用溶劑擴(kuò)散法方法制備的辛伐他汀納米粒粒徑小,包封率及載藥量較好；(2)LPS可能通過降低Bcl-2蛋白表達(dá),提高Bax蛋白表達(dá)而明顯增加人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率；(3)辛伐他汀靜脈制劑及辛伐他汀納米粒能提高LPS刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的活性,降低其細(xì)胞凋亡率,其可能機(jī)制為提高LPS刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá),而降低Bax蛋白的表達(dá),起到保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的作用；(4)辛伐他汀納米粒組較辛伐他汀靜脈制劑細(xì)胞活性更強(qiáng),凋亡率更低,可能與辛伐他汀納米粒組Bcl-2蛋白表達(dá)高于辛伐他汀組,而Bax蛋白表達(dá)低于辛伐他汀組有關(guān)。
[Abstract]:Objective:
A preliminary attempt was made to prepare simvastatin nanoparticles, to study their physical and chemical properties, and to explore the effect of Lipopolysaccharides (LPS) on the apoptosis of human umbilical vein endothelial cells cultured in vitro.
Method錛，

本文編號(hào)：2003514