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腹腔穿刺引流對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠胃腸動(dòng)力的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-05 19:48

  本文選題:腹腔穿刺引流 + 重癥急性胰腺炎 ; 參考:《西南醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:前期研究中,我們成功制備了胰膽管逆行注入牛磺膽酸鈉建立大鼠重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)伴隨胃腸動(dòng)力障礙的模型,并進(jìn)一步探討出SAP大鼠腹腔穿刺置管引流(abdominal paracentesis drainage,APD)的治療模型。本研究擬在前期研究基礎(chǔ)上探討腹腔穿刺引流對(duì)SAP大鼠胃腸動(dòng)力的作用及相關(guān)機(jī)制。方法:大鼠SAP伴胃腸動(dòng)力障礙模型的制作是經(jīng)十二指腸乳頭行胰膽管逆行注入5%的;悄懰徕c完成,小腸推進(jìn)指數(shù)是以10g/L臺(tái)盼藍(lán)1.5ml灌胃后半小時(shí)處死大鼠(小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn))測(cè)定小腸臺(tái)盼藍(lán)推進(jìn)距離與小腸全長(zhǎng)的比。第一部分,制作30只SD雄性大鼠SAP模型,均分為6小時(shí)組、12小時(shí)組和24小時(shí)組,造模成功后在相應(yīng)時(shí)間再進(jìn)行小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn),選取三組中小腸推進(jìn)指數(shù)最小的實(shí)驗(yàn)組時(shí)間點(diǎn)表示SAP模型大鼠胃腸動(dòng)力最弱的時(shí)間點(diǎn),開展后續(xù)實(shí)驗(yàn)。第二部分,將30只雄性SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(SHAM)組(麻醉大鼠后開腹,不損傷胰腺情況下翻動(dòng)數(shù)次后關(guān)腹)、重癥急性胰腺炎(SAP)組、腹腔穿刺置管引流(APD)組(在大鼠SAP伴胃腸動(dòng)力障礙模型基礎(chǔ)上,關(guān)腹前在大鼠右下腹留置一根特制十字花引流管于大鼠腹腔,用來(lái)引流產(chǎn)生的腹水),每組各10只。根據(jù)第一部分結(jié)果,于造模第24小時(shí)后對(duì)各組大鼠行小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)后麻醉開腹,對(duì)比各組大鼠腹腔內(nèi)大體改變,然后腹主動(dòng)脈采血處死。測(cè)定小腸推進(jìn)指數(shù),取各組大鼠距回盲部5cm的回腸全層標(biāo)本以及胰腺標(biāo)本,ELISA方法測(cè)定大鼠血清中TNF-α、il-1β、胃動(dòng)素(motilin,mtl)、膽囊收縮素(cholecystokinin,cck)以及血管活性腸肽(vasoactiveintestinalpeptide,vip)水平,碘-淀粉比色法測(cè)定血清及腹水中淀粉酶含量,硝酸還原酶法測(cè)定血清中一氧化氮(no)含量;免疫組化檢測(cè)回腸組織中神經(jīng)型一氧化氮合酶(neuronalnosynthase,nnos)表達(dá)情況;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)分析回腸組織中nnos-mrna表達(dá)情況。第三部分,因?yàn)樵炷?4小時(shí)后進(jìn)行小腸肌電測(cè)定時(shí)間較長(zhǎng),這將對(duì)后續(xù)小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)以及標(biāo)本采集造成額外的干預(yù),所以重新選取30只雄性spf級(jí)sd大鼠隨機(jī)分為sham組、sap組、apd組,每組各10只,成功造模24小時(shí)后腹腔注射4%水合氯醛麻醉大鼠開腹,然后用bl-420f生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)測(cè)定回腸肌電。結(jié)果:對(duì)比不同時(shí)間點(diǎn)小腸推進(jìn)指數(shù),發(fā)現(xiàn)在sap造模成功后24小時(shí)小腸推進(jìn)最慢;造模24小時(shí)后,sham組大鼠并無(wú)腹水產(chǎn)生,而sap組和apd組有大量腹水產(chǎn)生,并且腹水中可檢測(cè)到大量淀粉酶及tnf-α、il-1β;與sham組比較,sap組、apd組胰腺組織病理學(xué)評(píng)分增高(p0.05);血清淀粉酶、tnf-α、il-1β以及vip水平均顯著升高(p0.05),而小腸推進(jìn)指數(shù)、mtl及cck均顯著降低(p0.05);sap組和apd組的回腸肌電慢波平均頻率(次/分)和慢波振幅(mv)均減小(p0.05);血清no含量增加(p0.05),回腸組織中nnos以及nnos-mrna表達(dá)情況均明顯高于假手術(shù)組(p0.05);與sap組比較,apd組胰腺組織病理學(xué)評(píng)分降低(p0.05);血清淀粉酶、tnf-α、il-1β以及vip水平均顯著降低(p0.05),而小腸推進(jìn)指數(shù)、mtl及cck均增高(p0.05);apd組的回腸肌電慢波平均頻率升高(p0.05),慢波振幅無(wú)明顯差異(p0.05);血清no含量降低(p0.05),回腸組織中nnos以及nnos-mrna表達(dá)情況均明顯低于sap組(P0.05)。結(jié)論:腹腔穿刺引流可顯著改善SAP大鼠的胃腸動(dòng)力障礙,其可能的機(jī)制是APD降低了腸道組織內(nèi)nNOS的表達(dá),以致腸道神經(jīng)遞質(zhì)NO含量降低,從而增加了小腸慢波頻率。
[Abstract]:Objective : To study the effect of peritoneal puncture drainage on gastrointestinal motility in rats with severe acute pancreatitis ( SAP ) . 絎笁閮ㄥ垎,鍥犱負(fù)閫犳ā24灝忔椂鍚庤繘琛屽皬鑲犺倢鐢墊祴瀹氭椂闂磋緝闀,

本文編號(hào):1983209

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