本文選題：急性ST段抬高心肌梗死 + 梗死相關(guān)動脈��； 參考：《南京醫(yī)科大學(xué)》2013年博士論文

【摘要】：急性ST段抬高心肌梗死(ST-elevation myocardial infarction,簡稱STEMI)是冠心病的一種嚴(yán)重臨床類型,STEMI主要是由于冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂,激活血小板和凝血過程,形成血栓阻塞冠狀動脈所致。早期積極開通梗死相關(guān)動脈,恢復(fù)有效的心肌再灌注是降低急性心肌梗死患者死亡率、改善預(yù)后的關(guān)鍵。病人早期再灌注治療的益處眾所周知,較多的使用經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(PCI)、以及藥理學(xué)和外科手術(shù)治療改善了心肌再灌注,并減少了ST段抬高型心肌梗死患者的死亡率。誘導(dǎo)血管新生、加速側(cè)支循環(huán)的建立可作為冠脈和外周動脈粥樣硬化引起的心肌和肢體缺血的一個治療策略。MPs (Microparticals,微粒)是直徑小于1微米的膜囊泡,在細(xì)胞損傷、激活或凋亡時從細(xì)胞漿膜表面脫落的。血漿中發(fā)現(xiàn)的MPs主要是從血小板來源的,少部分從其它細(xì)胞比如內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞和紅細(xì)胞來源。在動脈粥樣硬化、血栓、血管新生以及和心血管疾病相關(guān)的很多情況中,MPs都參與作用。因此其在心血管疾病中的作用備受關(guān)注。研究顯示,血小板衍生的MPs (PMPs)能誘導(dǎo)體外血管新生和刺激缺血后心肌血管重建。體外研究證明了小鼠缺血肌肉中分離出的MPs促進(jìn)新血管形成。這說明MPs可能作為血管修復(fù)的生存信號。在STEMI患者,MPs亦明顯增多。但是對于STEMI患者梗死相關(guān)動脈微環(huán)境中MPs的研究,至今尚無文獻(xiàn)報導(dǎo)。已有研究表明MPs在血管新生方面的貢獻(xiàn),但是,梗死相關(guān)動脈內(nèi)MPs是否有不同的促血管新生,目前尚不清楚。本研究目的主要探討梗死相關(guān)動脈內(nèi)MPs和循環(huán)動脈中的MPs含量是否不同,是否具有促血管新生的作用,并進(jìn)一步研究其發(fā)揮作用的機(jī)制。樣本分析出實驗:收集行急診PCI并血栓抽吸的ST段抬高心肌梗死患者基礎(chǔ)情況及實驗室化驗結(jié)果,分別從梗死相關(guān)動脈血栓抽吸處及穿刺處主動脈循環(huán)血液中抽取5ml全血,分離提取MPs,流式細(xì)胞術(shù)實驗發(fā)現(xiàn)與循環(huán)血中MPs相比,梗死相關(guān)動脈處血中MPs平均含量增高,其中血小板MPs和內(nèi)皮MPs含量增高,白細(xì)胞MPs差別無統(tǒng)計學(xué)意義。體外細(xì)胞實驗:STEMI患者Circulating MPs及Coronary MPs對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)活力無影響,不引起細(xì)胞增殖作用。和Circulating MPs作用相比,劃痕實驗和Transwell實驗均顯示Coronary MPs可以引起HUVECs明顯遷移。毛細(xì)血管樣小管形成實驗也表明Coronary MPs誘導(dǎo)小管形成。培養(yǎng)基對照組、循環(huán)血MPs離心上清(Circulating Sn)和梗死相關(guān)動脈處血中MPs離心上清(Coronary Sn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和小管形成均無作用。進(jìn)一步研究Coronary MPs作用的機(jī)制,Western blot檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),Coronary MPs增加HUVECs eNOSSer1177磷酸化水平,上調(diào)AKT Ser473磷酸化,不影響eNOS和AKT總蛋白變化。PI3K/AKT通路抑制劑LY294002和NOS抑制劑L-NAME,以及應(yīng)用siRNA的方法敲低HUVECs中PI3K和eNOS表達(dá)均抑制Coronary MPs的促HUVECs遷移和小管形成作用,Western blot方法發(fā)現(xiàn),抑制劑LY294002和siRNA轉(zhuǎn)染抑制PI3K表達(dá)同樣抑制Coronary MPs引起的eNOS Ser1177和AKTSer473磷酸化水平的增加�；瘜W(xué)檢測試劑盒和ELISA方法檢測處理細(xì)胞培養(yǎng)基中總一氧化氮(NO)和VEGF含量發(fā)現(xiàn)Coronary MPs引起內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO增多,VEGF生成也增多,兩種抑制劑抑制這種生成的增加。動物主動脈環(huán)實驗：健康ICR小鼠胸主動脈環(huán)內(nèi)皮依賴性舒張實驗顯示Coronary MPs對小鼠舒張功能沒有損傷,與之前有研究的心梗病人靜息狀態(tài)靜脈血MPs引起內(nèi)皮舒張功能紊亂作用不同。以上結(jié)果表明： (1)STEM患者梗死相關(guān)動脈處血中MPs含量比主動脈循環(huán)血中MPs要多; (2)梗死相關(guān)動脈處血中MPs：①不引起內(nèi)皮細(xì)胞增殖；②促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和小管形成；③通過激活PI3K/AKT/eNOS/VEGF信號通路發(fā)揮作用； (3)梗死相關(guān)動脈處血中MPs不引起內(nèi)皮舒張功能紊亂。STEMI患者梗死相關(guān)動脈處血中MPs為側(cè)支循環(huán)的構(gòu)建提供了新的解釋,為STEMI的治療提供了新的治療思路和靶點,具有潛在的應(yīng)用價值。
[Abstract]:鎬ユ，

本文編號：1931330