本文選題：臍帶間充質干細胞 + 創(chuàng)面�。� 參考：《昆明醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：[目的]現階段大面積燒傷患者的救治仍然存在著一定的難題,在早期如何盡快的封閉創(chuàng)面,使患者病情及早的進入穩(wěn)定期,是臨床醫(yī)生及科研工作者一直想解決的臨床問題。近年來有關間充質干細胞(Mesenchymal Stem Cells,MSC s)的研究絡繹不絕,研究者們對間充質干細胞的特性十分的感興趣,尤其是最近臍帶間充質干細胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UCMSCs)更是表現出自身的優(yōu)勢,如提取方便,自我更新能力強等,這也讓許多的研究人員對它產生興趣,孜孜不倦的進行研究探索。鑒于臍帶間充質干細胞有促進創(chuàng)面愈合,本實驗研究探討局部涂抹臍帶間充質干細胞對燒傷創(chuàng)面的修復能力。首先,根據燒傷模型實驗效果篩選出較理想的燒傷模型制備方法,然后依據此方法進行燒傷模型的制備,采用局部涂抹的方法,應用臍帶間充質干細胞對大鼠創(chuàng)面治療,探索臍帶間充質干細胞對燒傷創(chuàng)面調節(jié)作用,及其對血管內皮生長因子調節(jié)的影響,期望通過研究探索可以為臨床救治燒傷患者,修復創(chuàng)面提供一些新的創(chuàng)意及思路。[方法1]采用三種方法(燒傷法、熱固體燙傷法、熱水燙傷法)對SD大鼠進行燒燙傷模型的制備,比較三種方法的差異。燒傷法為采用燒烤噴火器對大鼠背部進行燒傷,熱固體燙傷法為應用水域鍋加熱后的銅棒對大鼠背部進行燙傷,熱水燙傷法為應用特制離心管放置于大鼠背部,然后向離心管中倒入固定水量的熱水,使熱水與大鼠皮膚接觸固定時間后造成大鼠背部皮膚的燙傷。大鼠燒燙傷后每日正常飲食水,觀察大鼠基本情況,創(chuàng)面變化情況。于大鼠燒燙傷后第3日切除大鼠背部受傷的皮膚,多聚甲醛固定保存,蔗糖溶液脫水,皮膚組織進行冰凍切片后再進行HE染色,觀察各組大鼠受傷皮膚組織的病理情況。[結果1]從燙傷過程比較,3組燙傷模型制備都較順利,第一組噴火器燒傷組的燒傷效果尚明顯,傷后可見較明顯的燒傷痕跡,大鼠受傷皮膚成白色。第二組熱銅棒燙傷大鼠的背部皮膚燙傷效果易可,傷后見明顯的燙傷痕跡,且銅棒燙傷處有較明顯的凹陷,燙傷后即刻見淺黃色,燙傷皮膚均勻。第三組熱水燙傷組的大鼠背部皮膚燙傷明顯,燙傷后皮膚呈現黃白相間,未見凹陷及腫脹。[結論1]三種方法對SD大鼠背部皮膚都造成一定的程度上皮膚損傷,但是綜合各個方面考慮,第三組的熱水燙傷方法的燙傷面積、深度可控,所需器材易獲得,相比之下更適合進行重復性操作。可以用來進行小型動物如SD大鼠、兔子、裸鼠等皮膚燒燙傷模型的制備。[方法2]應用熱水燙傷法對30只SD大鼠進行背部燙傷模型的制備,大鼠隨機分成3組,每組10只。于大鼠燙傷后第三日將大鼠背部燙傷皮膚切除,切除后測量創(chuàng)面大小,拍照后用圖像分析軟件ipp6計算創(chuàng)面大小(此面積為大鼠創(chuàng)面的原始面積)。然后按照不同分組給予不同的治療,第一組的治療方法為1ml濃度(1x106/ml)臍帶間充質干細胞+自體微粒皮治療,第二組治療方法為自體微粒皮治療,第三組為空白對照組,未施加藥物治療,最后三組大鼠創(chuàng)面均應用異體覆蓋創(chuàng)面,紗布打包固定。以后每日觀察大鼠情況,治療后的每7天對大鼠進行創(chuàng)面拍照,計算出愈合面積后進行統(tǒng)計分析,對大鼠創(chuàng)面愈合速度進行評估。大鼠創(chuàng)面愈合后進行背部愈合后的皮膚取材,對皮膚組織進行病理觀察、免疫熒光檢查VEGF。[結果2]三組大鼠應用熱水燙傷法制備燙傷模型較成功,如果操作得當可使個體差異較小。通過對大鼠創(chuàng)面愈合面積進行統(tǒng)計學評估,結果顯示在第2、3、4、5、6周時第一組創(chuàng)面愈合速度快于第二組,第一組與第三組創(chuàng)面愈合速度無統(tǒng)計學意義;在第2、3、4周時第三組創(chuàng)面愈合速度快于第二組,第5、6周時第二組與第三組之間愈合速度無統(tǒng)計學意義。從愈合后皮膚病理觀察看第三組大鼠創(chuàng)面中的新生肉芽組織是三組中最多的一組。第一組切片中可見多處毛細血管的表達,膠原含量為三組中最多,且膠原排列整齊。第二組大鼠的切片觀察可見組織內膠原排列紊亂,膠原含量少于第一組大鼠的含量。本實驗免疫熒光檢測結果顯示第一組臍帶間充質干細胞加自體皮治療組的血管內皮生長因子的表達高于第二組單獨的自體微粒皮治療組和第三組空白對照組的表達。[結論2]臍帶間充質干細胞可以加速大鼠自體微粒皮修復燒傷創(chuàng)面的速度。其次臍帶間充質干細胞可能是通過促進VEGF的增殖來加速創(chuàng)面的愈合。
[Abstract]:A new method for treating burn wound by using umbilical cord mesenchymal stem cells ( umbilical cord mesenchymal stem cells ) was studied in this paper . The rats were treated with hot water scald . The results showed that the wound healing rate was higher than that of the second group , and the wound healing rate was higher than that of the second group .

【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R644

【參考文獻】

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本文編號：1859850