鹽酸戊乙奎醚上調(diào)β抑制蛋白-1與M3受體的關(guān)系研究
本文選題:M受體 + 鹽酸戊乙奎醚 ; 參考:《重慶醫(yī)學(xué)》2017年13期
【摘要】:目的探討在脂多糖(LPS)致肺微血管內(nèi)皮損傷中鹽酸戊乙奎醚(PHC)上調(diào)β抑制蛋白-1(β-arrestin-1)的作用與M3受體的關(guān)系。方法 M3shRNA轉(zhuǎn)染肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞和正常肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,分為L(zhǎng)PS組(A)、鹽酸戊乙奎醚+LPS組(B)、LPS+M3shRNA轉(zhuǎn)染組(C)和鹽酸戊乙奎醚+LPS+M3shRNA轉(zhuǎn)染組(D),激光共聚焦觀察細(xì)胞骨架變化,檢測(cè)細(xì)胞上清液中乳酸脫氫酶(LDH)水平,免疫熒光化學(xué)法檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表達(dá),Western blot法和實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)β-arrestin-1表達(dá)。結(jié)果與A組、C組比較,B組、D組肌動(dòng)蛋白骨架排列整齊,LDH水平和VCAM-1蛋白表達(dá)降低,β-arrestin-1表達(dá)升高;與A組、B組相比較,C組、D組肌動(dòng)蛋白骨架排列整齊,LDH水平和VCAM-1蛋白表達(dá)降低,β-arrestin-1表達(dá)無(wú)明顯改變。結(jié)論沉默M3受體有助于降低脂多糖誘導(dǎo)的肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。但鹽酸戊乙奎醚上調(diào)β-arrestin-1的作用與M3受體是否存在無(wú)必然聯(lián)系。
[Abstract]:Objective to investigate the relationship between the up-regulation of 尾 -arrestin-1 (尾 -arrestin-1) and M3 receptor in pulmonary microvascular endothelial injury induced by lipopolysaccharide (LPS).Methods Pulmonary microvascular endothelial cells and normal pulmonary microvascular endothelial cells were transfected with M3shRNA. The cells were divided into LPS group, LPS group and LPS M3shRNA group. The cytoskeleton was observed by confocal laser.The level of lactate dehydrogenase (LDH) in supernatant was detected. The expression of vascular endothelial cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) protein was detected by immunofluorescence method. The expression of 尾 -arrestin-1 was detected by Western blot and real-time quantitative PCR.Results compared with group A and C, the level of VCAM-1 and the expression of 尾 -arrestin-1 were decreased and 尾 -arrestin-1 increased in group B and D.Compared with group A and B, the level of VCAM-1 and the expression of VCAM-1 protein in group C and D were decreased, but the expression of 尾 -arrestin-1 was not changed.Conclusion silencing M 3 receptor can reduce the injury of pulmonary microvascular endothelial cells induced by lipopolysaccharide.However, the up-regulation of 尾 -arrestin-1 by pentenehyclidine hydrochloride was not associated with the existence of M _ 3 receptor.
【作者單位】: 武漢大學(xué)中南醫(yī)院麻醉科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(81101408) 湖北省武漢市科技局晨光計(jì)劃項(xiàng)目(2016070204010150)
【分類(lèi)號(hào)】:R459.7
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,本文編號(hào):1767240
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