本文選題：骨髓間充質干細胞　切入點：血管緊張素Ⅱ　出處：《安徽醫(yī)科大學》2013年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的 研究證實：在體外經(jīng)5-氮胞苷（5-Aza）誘導后，骨髓間充質干細胞（BMMSCs）可分化成心肌細胞或類心肌細胞（CMCs or CLCs），但分化率很很低。我們的研究旨在尋求一種誘導方式能提高BMMSCs分化成心肌細胞的分化率，并觀察誘導后的心肌樣細胞能否定植在缺血心肌組織中，并有效的改善心功能。 方法 從SD大鼠中提取BMMSCs，培養(yǎng)至第4代用于實驗研究。體外實驗分3組：對照組：不添加誘導劑；5-Aza組：向培養(yǎng)液內(nèi)加入5-Aza誘導劑，使終濃度在10μmol/L；共培養(yǎng)組：向培養(yǎng)液內(nèi)加入AngⅡ和5-Aza誘導劑，使前者終濃度在0.1μmol/L，后者終濃度在10μmol/L，觀察細胞形態(tài)學的改變，采用免疫熒光細胞學染色鑒定心肌細胞相關蛋白β-MHC和CTn T的表達，采用PCR鑒定GATA4基因和NKx2.5基因的表達。體內(nèi)試驗：首先通過結扎大鼠的冠狀動脈前降支來建立AMI的動物模型，其次將被移植的細胞用4,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）標記，并將大鼠分為4組：A組大鼠被移植無血清的DMEM液；B組大鼠被移植沒有被誘導的BMMSCs；C組大鼠被移植只被5-Aza誘導的BMMSCs；D組大鼠被移植被AngⅡ和5-Aza共同誘導的BMMSCs。對比組織切片中移植細胞的存活率及大鼠心功能的變化。 結果 1）比較5-Aza和共培養(yǎng)組，可見BMMSCs分化成心肌樣細胞的分化率在兩組間有明顯的統(tǒng)計學差異（p0.05），，共誘導培養(yǎng)后的細胞強陽性表達心肌特異性蛋白。 2）移植后3w，觀察到D組CLCs的存活率明顯高于B組（p0.05），說明共誘導培養(yǎng)的CLCs更能適應缺血缺氧的環(huán)境。 3）比較各組間血流動力學指標，+dp/dtmax及-dp/dtmax均明顯升高(p 0.05);LVSP均明顯增加(p 0.05)；LVEDP均明顯減小(p 0.05)。 4）細胞移植4w后，細胞移植組（B組、C組、D組）殘存心肌細胞分布面積明顯大于心梗對照組（A組），在移植細胞區(qū)域內(nèi)可見血管再生現(xiàn)象，且膠原纖維沉積明顯減少，與此伴隨血清VEGF水平表達增高。 結論 AngⅡ聯(lián)合5-Aza可促進BMMSCs向CLCs分化，這些細胞被移植后在缺血心肌組織中的存活率明顯提高，同時能改善急性心肌梗死大鼠的心功能。
[Abstract]:Purpose. The results showed that: after induction with 5-azacytidine (5-Aza) in vitro, Bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) can differentiate into cardiomyocytes or cardiomyocytes, but the differentiation rate is very low. We also observed whether the induced cardiomyoid cells could be implanted in ischemic myocardium and improve cardiac function effectively. Method. BMMSCs were isolated from SD rats and cultured to the 4th generation for experimental study. In vitro, the rats were divided into three groups: control group: control group: adding 5-Aza inducer into the culture medium. In co-culture group, the final concentration of Ang 鈪

本文編號：1577695